我国草地贪夜蛾田间种群有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂靶标基因ace-1的基因型和突变频率

【目的】对入侵我国的草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂靶标基因ace-1的基因型进行分子检测,明确抗性基因频率,进而指导田间科学用药。【方法】采集中国12省份的草地贪夜蛾田间种群幼虫样本,提取单头样本的基因组DNA,利用特异性引物进行PCR扩增,获得ace-1基因片段。根据碱基、氨基酸序列比对和测序峰图分析,明确与有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性相关的3个氨基酸突变位点A201S, G227A和F290V的基因型和抗性基因频率。【结果】通过DNA检测分析中国12省份草地贪夜蛾田间种群589头个体ace-1基因的基因型和突变频率发现,在A201S位点检测到137头个体为抗性杂合基因型,抗性基因频率为11.6%,未发现抗性纯合基因型个体;G227A位点589头个体均为敏感纯合基因型;F290V位点的抗性基因频率最高,达到57.1%,携带抗性基因的个体数量达到523头(占样本总数的88.8%)。【结论】结果表明入侵我国的草地贪夜蛾种群携带高频率的对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性基因。田间防治建议不用或少用有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂,同时进一步加强田间抗性监测工作。

海南省白纹伊蚊抗药性及抗性相关kdr和ace-1基因突变调查

目的了解海南省白纹伊蚊对常用杀虫剂抗性水平及其击倒抗性(knockdown resistance,kdr)和乙酰胆碱酯酶1(acetylcholnesterase number one,ace-1)基因的突变情况。方法分别于2020年和2021年在海南省儋州、三亚、琼中、琼海、昌江和万宁采集白纹伊蚊幼虫,测定其对常用杀虫剂的抗药性,抽取抗性测定存活样品并对其kdr基因和ace-1基因的突变进行检测。结果海南不同地区白纹伊蚊种群成蚊接触溴氰菊酯(0.03%)、氯菊酯(0.40%)、高效氯氰菊酯(0.40%)、高效氯氰菊酯(0.08%)和高效氯氟氰菊酯(0.07%)药膜24 h后的死亡率分别为5.56%~83.33%、29.89%~92.22%、26.67%~97.78%、11.11%~88.89%和40.00%~83.33%;接触残杀威(0.05%)、噁虫威(0.20%)、马拉硫磷(0.50%)、杀螟硫磷(0.20%)、毒死蜱(2.00%)5种杀虫剂药膜24 h后死亡率为94.89%~100.00%,其中昌江白纹伊蚊种群接触残杀威的死亡率为97.78%,三亚、万宁和琼海白纹伊蚊种群接触马拉硫磷的死亡率分别为94.89%、96.67%和96.67%,三亚和琼海白纹伊蚊种群接触杀螟硫磷的死亡率均为97.78%,其他种群死亡率均为100.00%。聚合酶链式反应产物测序结果显示kdr基因仅1534位点存在突变,共有4种等位基因,即野生型TTC/F和突变型TGT(TGC)/C、TCC/S、TTG/L,其突变频率分别为40.47%,22.25%、36.44%和0.85%,这些突变共组成7种类型,即野生型纯合子F/F,野生型/突变型杂合子F/C、F/S和F/L,突变型杂合子S/C,突变纯合子C/C和S/S,其突变频率依次为19.92%、6.78%、32.63%、1.69%、11.44%、13.14%和14.41%。在ace-1基因对应的119位点未检测到相关氨基酸突变。结论海南省6个地区白纹伊蚊对拟除虫菊酯类的溴氰菊酯、氯菊酯、高效氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯均产生较高抗性,而对氨基甲酸酯类和有机磷类杀虫剂敏感或产生可能抗性;抗性基因突变主要以kdr基因1534位点为主,其突变频率可能是导致海南地区白纹伊蚊产生抗药性的重要原因。

多哥冈比亚按蚊靶标抗性kdr、ace-1基因突变研究

目的 调查多哥冈比亚按蚊(Anopheles gambiae s.l.)中kdr和ace-1的等位基因突变,为该地区蚊媒传染病防制提供科学依据。方法 蚊虫样本采集自多哥2个疟疾高发地区东莫诺(Est-mono)和阿涅(Anié)的6个村庄。所有蚊虫均用于蚊种鉴定以及kdr和ace-1基因分型。结果 An. coluzzii和An. gambiae是在6个采集地点发现的2个冈比亚按蚊复合组中的近缘物种,其中An. gambiae占主导地位,占比约为96.53%。在所有检测到的蚊虫样品中,冈比亚按蚊复合组在kdr 1014位点具有高频率的突变,其中An. gambiae在奥古库利代(Ogou koulidé)、巴纳(Bana)、阿福莱(Afolé)地区突变频率达到100.0%,凯普西(Kepssi)、伊格博梅吉(Igbomedji)的突变频率为97.5%,科洛科佩(Kolocopé)地区突变频率为91.1%,1014F的等位基因频率为85.5%~100.0%,3个地区的An. coluzzii 1014位点的突变频率均为100.0%,1014F的等位基因频率为90.0%~100.0%,突变纯合度较高。An. gambiae在kdr 1575的突变频率为6.6%~24.3%,1575Y的等位基因频率为3.2%~12.2%,所有检测到的突变类型均为杂合突变,An. coluzzii的1575位点未检测到突变。冈比亚按蚊复合组在ace-1基因的119位点也检测到了突变,其中An. gambiae的突变频率为8.8%~15.0%,119S等位基因频率为4.4%~7.5%,An. coluzzii的突变频率为0~20.0%,119S等位基因频率为0~10.0%,所有检测到的119S突变均为杂合突变。结论 由于本研究中检测到的多哥冈比亚按蚊kdr突变频率很高,疟疾蚊媒可能对拟除虫菊酯类杀虫剂已产生高度抗性,同时可能对有机磷或氨基甲酸酯类杀虫剂也产生一定的抗性。提示当地相关病媒管理部门在今后的疟疾病媒控制及耐药性管理规划中应着重考虑杀虫剂耐药问题,并定期进行监测。

ACE-I对实验性缺血心肌中自由基清除酶的影响

目前，血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥ－Ｉ）对缺血性心脏病，尤其是在急性心肌梗死及急性缺血损伤时，对心肌的保护作用及其改善梗死后左室重构等作用正日益受到国内外学者的重视。作者采用异丙基肾上腺素（ＩＳＰ）诱发大鼠急性心肌缺血损伤的模型，以心肌组织中自由基...

非调节型原发性高血压:血管紧张素转换酶抑制剂的应用

原发性高血压可依据患者的肾和肾上腺对摄钠量和输注血管紧张素Ⅱ是否呈现适当的调节反应而分为调节型和非调节型。非调节型约占原发性高血压的40%,其发病机理是:①组织局部的血管紧张素Ⅱ浓度过高:②膜缺陷及钠离于转运异常;③遗传因素。文中还对非调节型的诊断标准和治疗问题作了讨论.

湖北四个地区草地贪夜蛾田间种群的杀虫剂敏感性及靶标突变检测

【目的】测定湖北草地贪夜蛾田间种群对4种杀虫剂的敏感性,并对杀虫剂靶标Ace-1,VGSC和RyR的基因型和突变频率进行检测,以明确湖北草地贪夜蛾田间种群药剂敏感性现状,进而指导田间科学用药。【方法】采集湖北黄冈、武穴、咸宁和荆州4个地区玉米田中的草地贪夜蛾幼虫,采用浸叶法测定其对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐4种杀虫剂的敏感性;提取4个种群80头个体的单头总RNA合成cDNA,利用特异性引物进行PCR扩增,获得目的基因片段,根据序列比对和测序峰图分析,确定Ace-1,VGSC和RyR的基因型和靶标突变位点的突变频率。【结果】生测结果表明,湖北这4个田间种群的草地贪夜蛾幼虫对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐均比较敏感,敏感性从高到低依次为:甲维盐>乙基多杀菌素>氯虫苯甲酰胺>茚虫威。分子检测结果表明,湖北草地贪夜蛾这4个田间种群Ace-1基因在A201S, G227A和F290V位点均存在抗性杂合突变,且在F290V位点检测到抗性纯合突变,而VGSC和RyR两个基因均没有检测到靶标位点突变。【结论】湖北草地贪夜蛾4个田间种群对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐这4种杀虫剂均较敏感,但这4个草地贪夜蛾田间种群均携带有对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性基因,存在潜在的抗性风险,田间防治建议少用或不用该类杀虫剂,同时需要进一步加强抗性监测工作。

海南省三亚市中华按蚊抗药性及抗性相关基因突变调查

目的了解海南省三亚市中华按蚊对常用杀虫剂的抗性状况及电压门控钠离子通道(VGSC)击倒抗性(kdr)相关基因及编码乙酰胆碱酯酶(AChE)的ace-1基因的突变情况。方法分别于2018年9-10月和2020年9月在海南省三亚市天涯区采集中华按蚊成蚊,用生物测定法测定其对5种常用杀虫剂的抗药性。抽取抗性测定后存活样品,以直接测序法对VGSC基因1014位点和ace-1基因119位点的突变进行检测。结果2018和2020年中华按蚊对0.05%溴氰菊酯和4.00%滴滴涕(DDT)均产生抗性,24 h死亡率分别为43.00%、11.11%和71.00%、39.18%;该蚊对5.0%马拉硫磷由2018年的可能抗性(91.00%)到2020年的敏感(100%)。PCR产物测序结果显示VGSC基因1014位点和ace-1基因119位点分别发现1种突变基因,即L1014F亮氨酸(L)突变为苯丙氨酸(F)(TTG突变为TTT)和G119S甘氨酸(G)突变为丝氨酸(S)(GGC突变为AGC),2018和2020年突变频率分别为48.75%、57.14%和52.50%、43.75%。结论海南省三亚市中华按蚊对溴氰菊酯、DDT等产生抗性,而对马拉硫磷、醚菊酯、溴虫腈较敏感。抗性基因突变可能是导致中华按蚊产生抗药性的重要原因。