芪参颗粒调控ACE2-Ang(1-7)-Mas轴改善大鼠心力衰竭合并骨骼肌萎缩的作用及机制探讨

目的 探讨芪参颗粒对大鼠心力衰竭合并骨骼肌萎缩的作用及相关机制。方法 通过结扎大鼠左冠脉前降支建立模型,随机分为模型组、芪参颗粒组和福辛普利组,以假手术组作为对照。术后干预12周,超声检测大鼠心脏射血分数(ejection fraction, EF),ELISA法检测N端脑利钠肽前体(n-terminal brain natriuretic peptide precursor,NT-pro BNP)、血管紧张素(angiotensin,Ang)Ⅱ和Ang (1-7)浓度,测定大鼠抓力值和腓肠肌重量,苏木素伊红(htoxylin eosin, HE)观察心脏和腓肠肌形态,Western blot检测血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)2、(mas receptor,MasR)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHc)蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心脏EF值下降,NT-pro BNP和AngⅡ的浓度升高,Ang(1-7)含量降低,HE染色显示心肌组织排列不规则,大鼠的抓力值和腓肠肌重量都降低,腓肠肌肌纤维的横截面积缩小,蛋白ACE2、MasR和MyHc的表达降低(P<0.05)。与模型组比较,芪参颗粒和福辛普利均能提高心脏EF值,降低NT-pro BNP和AngⅡ的浓度,升高Ang(1-7)含量,改善心肌组织排列,增加大鼠抓力、腓肠肌重量和肌纤维横截面积,升高ACE2、MasR和MyHc的表达水平(P<0.05)。结论 芪参颗粒能抑制心力衰竭合并骨骼肌萎缩的发生,其机制可能与增加ACE2-Ang(1-7)-Mas轴活性有关。

血管紧张素转换酶2-血管紧张素(1-7)-Mas受体轴抗炎机制研究进展

肾素-血管紧张素系统(RAS)与炎症反应关系密切。血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是RAS的主要参与者,可激活与组织损伤、炎症相关的信号通路,而血管紧张素转换酶2(ACE2)-血管紧张素(Ang)(1-7)-Mas受体轴可发挥与AngⅡ相反的作用,抑制炎症反应。本文拟对ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴的基本特性及其在心血管疾病、肾病、肺损伤、神经性疾病中的抗炎机制的研究进展作一综述。

ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴在高血压射血分数保留心力衰竭中的作用

目的:探讨高血压射血分数保留心力衰竭(以下简称心衰)中血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)2、血管紧张素(1-7)[angiotensin(1-7),Ang(1-7)]的变化及ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴在高血压射血分数保留心衰(heart failure with preserved ejection fraction,HFp EF)中的作用。方法:1)入选原发性高血压患者70例,心脏彩超检测左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)≥50%,根据HFp EF的诊断标准将高血压患者分为单纯高血压(hypertension,HBP)组和高血压HFp EF组;同时入选35例健康体检者作为正常对照组(Control)。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assays,ELISA)检测各组血浆中ACE2,Ang(1-7),血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)及脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)水平。2)选取雄性SD大鼠24只,随机选取8只作为假手术组(Sham),16只SD大鼠行腹主动脉缩窄术(abdominal aortic constriction,AAC)建立HFp EF模型组,后将HFp EF模型组SD大鼠随机分为两组(n=8):一组于腹腔内注射Ang(1-7)0.5 mg/(kg.mg)作为Ang(1-7)干预组;另一组于腹腔内注射等剂量生理盐水(AAC组)。干预6周后处死所有大鼠,对心脏标本行苏木精-伊红(hematoxylineosin,HE)染色,采用Western印迹法测定心肌组织中ACE,ACE2及Mas受体蛋白表达水平。结果:HBP组及高血压HFp EF组的BNP和Ang II均较Control组明显增高(P<0.01);HBP组的ACE2,Ang(1-7)与Control组比较,差异无统计学意义(P>0.05),而高血压HFp EF组ACE2和Ang(1-7)较HBP组及Control组均明显升高(P<0.01)。HE染色结果显示A AC组的心肌细胞较Sham组明显肥大,而Ang(1-7)干预组的心肌细胞肥大程度较AAC组减轻,AAC组的ACE2,ACE及Mas受体蛋白表达水平较Sham组均明显升高(P<0.05),Ang(1-7)干预组ACE2和Mas受体表达水平较AAC组明显升高(P<0.05),而ACE表达水平未受影响(P>0.05)。结论:ACE2和Ang(1-7)参与高血压HFp EF的发生发展过程,对高血压HFp EF的心衰和心肌重构的严重程度有重要预测价值;ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴可能在抑制高血压HFp EF心肌重构中起保护作用。

奥司他韦对肺炎幼鼠ACE2/Ang(1-7)/Mas受体轴及肺损伤的影响

目的 研究奥司他韦对肺炎幼鼠ACE2/Ang(1-7)/Mas受体轴、肺损伤及炎症水平的影响。方法 SPF级SD雄性幼鼠50只随机抽取12只作为健康组,剩余38只幼鼠建立流感病毒模型。建模中意外死亡2只,随机数字表法将建模成功的36只幼鼠分为模型组、奥司他韦组及对照组,每组各12只。健康组与模型组幼鼠常规饲养,奥司他韦组幼鼠给予10 mg/kg奥司他韦灌胃,1次/d,持续5 d;对照组幼鼠经尾静脉注射75 mg/mL阿奇霉素,1次/d,持续1周。另取40只SPF级幼鼠建立病毒性肺炎模型后分为激动剂组、抑制剂组、激动剂+奥司他韦组、抑制剂+奥司他韦组,共诊治7 d,1次/d。ELISA检测各组IL-6、IL-8、TNF-α水平。小动物肺功能检测仪检测各组肺功能指标。HE染色观察各组肺炎幼鼠肺组织病理形态。TUNEL检测各组幼鼠肺组织细胞凋亡。免疫印迹检测各组幼鼠ACE2、Ang(1-7)、MasR、ACE、AngⅡ蛋白表达水平。结果 与健康组相比,模型组、奥司他韦组与对照组幼鼠血清中IL-6、IL-8、TNF-α、肺组织细胞凋亡率升高(P<0.05),在经过奥司他韦干预后IL-6、IL-8、TNF-α、肺组织细胞凋亡率均降低(P<0.05)。与健康组相比,模型组FEF50、FEF75、MMF、PEF水平降低(P<0.05),肺系数升高(P<0.05),在经过奥司他韦干预后FEF50、FEF75、MMF、PEF水平升高(P<0.05),肺系数降低(P<0.05)。各组肺组织病理形态对比明显。与健康组相比,模型组、奥司他韦组、对照组、抑制剂组、激动剂组、激动剂+奥司他韦组与抑制剂+奥司他韦组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平降低(P<0.05),ACE、AngⅡ水平升高(P<0.05);与模型组相比,奥司他韦组、对照组、激动剂组、激动剂+奥司他韦组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平升高(P<0.05),ACE、AngⅡ水平降低(P<0.05),抑制剂组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平降低(P<0.05),ACE、AngⅡ水平升高(P<0.05);模型组与抑制剂+奥司他韦组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,奥司他韦组、激动剂组、激动剂+奥司他韦组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平升高(P<0.05),ACE、AngⅡ水平降低(P<0.05);奥司他韦组与激动剂组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与奥司他韦组相比,激动剂+奥司他韦组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平升高(P<0.05),ACE、AngⅡ水平降低(P<0.05)。结论 奥司他韦通过提高ACE2/Ang(1-7)/Mas受体轴水平及降低炎症因子水平,改善肺炎幼鼠肺功能。

ACE2-Ang(1-7)-Mas轴的生物学功能及其下游信号通路

ACE2-Ang(1-7)-Mas轴具有拮抗ACE-AngⅡ-AT1R经典轴的作用,参与体内众多的生理反应。在循环、泌尿和消化等系统及炎性反应中发挥着重要的保护作用。ACE2-Ang(1-7)-Mas轴功能的发挥与其信号通路密切相关。探讨此调节轴的生物学功能及其信号传导通路将为相关疾病的治疗提供新的思路。

从ACE2-AngI(1-7)-Mas轴及中医学探讨高血压性ED的机制

回顾和探讨ACE2-AngI(1-7)-Mas轴对高血压性ED的影响及中药复方改善高血压性ED的机制。研究阐明ACE2-AngI(1-7)-Mas轴对高血压性ED的影响及奠定中药复方改善高血压性ED的物质基础和调控机制的研究基础。

中药复方补肾益心片对高血压大鼠血压、勃起功能及ACE2-Ang(1-7)-MAS轴的干预作用

目的观察补肾益心片对高血压大鼠(SHR)血压的影响和对其勃起功能、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)及Ang(1-7)的作用。方法将原发性高血压雄性大鼠分为3组,补肾益心片组、缬沙坦组、模型对照组。治疗4周后,检测血浆和腹主动脉组织内NOS、NO浓度以及血浆Ang(1-7)浓度。用尾动脉测压仪测量大鼠尾动脉收缩压,颈部皮下注射阿朴吗啡(APO)记录其阴茎勃起次数以检测大鼠的勃起功能。结果补肾益心片及缬沙坦均可提高腹主动脉组织内NO含量,提高血浆Ang(1-7)含量,但差异无统计学意义(P>0.05)。补肾益心片组、缬沙坦组治疗后血压都明显降低,与治疗前比较差异有统计学意义。治疗后补肾益心片组、缬沙坦组勃起次数明显增多,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论补肾益心片可以降低SHR的收缩压。补肾益心片补肾益心片可以改善SHR的勃起功能。补肾益心片可增加SHR腹主动脉NO含量及血浆Ang(1-7)含量。

ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴在调节慢性炎症性肾损伤中的研究进展

炎症因子在肾损伤疾病中发挥了重要作用。研究证实血管紧张素1-7[Ang-(1-7)]能够拮抗血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的炎症反应,同时ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴能够调控炎症反应的相关通路,发挥抑制炎症的作用,从而减轻肾损伤,延缓肾疾病进程。本文就近年来血管紧张素转化酶2(ACE2)-Ang-(1-7)-Mas轴在炎症方面的研究进展,及其对各类慢性炎症性肾损伤的调节作用进行综述。

黄芪多糖对非酒精性脂肪性肝炎大鼠ACE2-[Ang-(1-7)]-Mas轴及胰岛素抵抗的影响

目的探讨黄芪多糖对非酒精性脂肪性肝炎大鼠ACE2-[Ang-(1-7)]-Mas轴及胰岛素抵抗的影响。方法 40只大鼠随机分为正常组、模型组、黄芪多糖组(400 mg/kg)、吡格列酮组(20 mg/kg),每组10只,高脂饲料建立非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型。给药4周后,测定体质量、肝湿重、血脂、肝功能、血清Ang(1-7)水平,观察肝脏组织病理学变化,RT-PCR、Western blot检测肝组织ACE2、Mas、IRS-1水平。结果与模型组比较,黄芪多糖组肝指数及ALT、AST、TG、TC、MDA水平显著降低(P<0.01),Ang-(1-7)、SOD水平,Mas、ACE2、IRS-1 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),肝脂肪变性、炎症反应明显减轻。结论黄芪多糖可有效缓解非酒精性脂肪性肝炎大鼠胰岛素抵抗,其机制可能与上调ACE2-[Ang-(1-7)]-Mas轴基因表达、改善胰岛素敏感性有关。

复方芪麻胶囊对SHR大鼠RAS系统ACE-AngⅡ-AT1轴与ACE2-Ang(1-7)-Mas轴动态平衡的调控作用研究

目的探索复方芪麻胶囊对自发性高血压大鼠(SHR)肾素-血管紧张素系统(RAS)的动态平衡调节作用.方法将大鼠按血压值分为正常组(WKY组),模型组(SHR组),卡托普利组(Captopril组),复方芪麻胶囊高(QM-H)、中(QM-M)、低(QM-L)剂量组,每组10只,连续灌胃给药4周.给药前、给药2周和给药4周测定各组大鼠血压.末次给药后,各大鼠麻醉后取血,分离血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测大鼠血清中血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素(Ang)Ⅱ、血管紧张素1型受体(AT1)、ACE2、Ang(1-7)、Mas含量.结果在给药前,与WKY组相比,各组SHR高血压模型大鼠收缩压、舒张压均显著升高(P<0.01).SHR组、Capto-pril组、QM-H、QM-M、QM-L组之间两两比较,收缩压、舒张压差异均无统计学意义(P>0.05);在给药2周后与4周后,与WKY组比较,SHR组大鼠收缩压、舒张压均明显升高(P<0.01);与SHR组大鼠比较,Captopril组、QM-H、QM-M、QM-L组大鼠收缩压、舒张压均明显降低(P<0.01).与WKY组比较,SHR组大鼠血清ACE、AngⅡ、AT1含量均显著上升(P<0.01);与SHR组大鼠比较,Captopril组、QM-H、QM-M、QM-L组ACE、AngⅡ、AT1含量均显著降低(P<0.05或P<0.01).与WKY组比较,SHR组大鼠血清ACE2、Ang(1-7)、Mas含量均显著性降低(P<0.01);与SHR组大鼠比较,Captopril组、QM-H、QM-M、QM-L组ACE2、Ang(1-7)、Mas含量均显著升高(P<0.05或P<0.01).结论复方芪麻胶囊可明显降低SHR大鼠的收缩压和舒张压,其作用可能与抑制ACE-AngⅡ-AT1轴,增强ACE2-Ang(1-7)-Mas轴有关.

中低强度运动训练对早期高血压大鼠中枢系统ACE2-Ang(1-7)-Mas与ACE-AngⅡ-AT 1轴ACE2、ACE、AT 1的影响

目的考察中低强度运动训练对早期高血压大鼠(SHR)中枢系统血管紧张素转化酶2-人血管紧张素(1-7)-G蛋白偶联受体[ACE2-Ang(1-7)-Mas]与血管紧张素转化酶-人血管紧张素Ⅱ-血管紧张素1型受体(ACE-AngⅡ-AT1)轴的影响,探讨中低强度运动训练对SHR血压调节能力的作用机制。方法采用大鼠跑台的训练方式对大鼠进行中低强度运动训练,采用静脉快速注射苯肾上腺素引起反射性心动过缓或过速,采用“尾套法”记录心率变化(ΔHR)、血压变化(ΔMAP),利用大鼠脑立体定位仪结合大鼠脑图谱进行大鼠中枢系统延髓腹外侧部(RVLM)、孤束核(NTS)和室旁核(PVN)组织的定位剥离,采用Real-time PCR检测ACE2-Ang(1-7)-Mas与ACE-AngⅡ-AT1轴血管紧张素转化酶2(ACE2)、G蛋白偶联受体(Mas)、血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素1型受体(AT1)的mRNA表达。结果与同源正常血压大鼠安静(WKY+Sed)组相比,自发性高血压大鼠安静(SHR+Sed)组LVEDP、LVM升高,-dp/dt max降低,差异均有统计学意义(P<0.05),自发性高血压大鼠运动(SHR+ExT)组与自发性高血压大鼠安静(SHR+Sed)组相比,LVEDP、LVM降低,差异有统计学意义(P<0.05)、+dp/dt max、-dp/dt max升高;与WKY+Sed组相比,SHR+Sed组压力反射敏感性(BRS)下降,差异均有统计学意义(P<0.05),SHR+ExT组的BRS较SHR+Sed组增强,差异有统计学意义(P<0.05);在RVLM、NTS及PVN中,与WKY+Sed组相比,SHR+Sed组ACE2均下降,差异均有统计学意义(P<0.05),RVLM及PVN中的ACE、AT1上升,NTS中的AT1上升(P<0.05);在RVL、MNTS及PVN中,WKY+ExT组的ACE2、ACE、AT1与WKY+Sed组差异无统计学意义,SHR+ExT组的ACE2较SHR+Sed组增强,差异有统计学意义(P<0.05),AT1下降,差异有统计学意义(P<0.05),与WKY+Sed组、WKY+ExT组差异无统计学意义;在PVN中,与WKY+Sed组、WKY+ExT组相比,SHR+ExT组的ACE增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中低强度运动训练通可能通过改善BRS、调节ACE2-Ang(1-7)-Mas与ACE-AngⅡ-AT1轴ACE2、ACE、AT1的表达改善自发性大鼠血压。

醛固酮通过调节ACE2—Ang(1-7)—Mas受体轴诱导内皮细胞凋亡的研究

目的探讨醛固酮对内皮细胞ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴的影响及其与凋亡的关系。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为对照组(DMEM/F12培养基)、醛固酮组(10、100、1 000 nmol/L醛固酮干预)和醛固酮拮抗组(100 nmol/L醛固酮+1μmol/L醛固酮受体拮抗剂共同干预)。采用免疫荧光细胞化学染色法观察细胞ACE2蛋白的表达;Western blotting检测细胞中ACE2和Mas受体的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养上清中AngⅡ和Ang(1-7)蛋白的含量以及凋亡相关蛋白caspase-3的活性;流式细胞术结合FITC-Annexin V/PI荧光染色检测细胞凋亡。结果与对照组比较,醛固酮组细胞ACE2和Mas受体的表达明显下调(P<0.01),并呈浓度依赖性。在100 nmol/L醛固酮组,随着干预时间的延长,细胞ACE2和Mas受体的表达明显下调(P<0.01),呈时间依赖性;而醛固酮拮抗组细胞ACE2和Mas受体的表达显著高于100 nmol/L醛固酮组(P<0.01)。ELISA检测结果显示,随着干预时间的延长,醛固酮组细胞培养上清中AngⅡ浓度和caspase-3活性均显著升高,而Ang(1-7)浓度降低。流式细胞术检测结果显示:醛固酮组细胞凋亡率显著高于对照组,醛固酮拮抗组细胞凋亡率显著低于醛固酮组(P<0.05)。结论醛固酮具有调节ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴的作用,并可能通过此轴诱导内皮细胞凋亡。

基于ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路研究唐古特红景天活性部位抗大鼠高原缺氧性肺动脉高压的作用机制

目的本研究基于ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路研究唐古特红景天活性部位(ACRT)抗大鼠高原缺氧性肺动脉高压的作用机制。方法将大鼠分为对照组、模型组、给药组,模型组和给药组大鼠在低压氧舱(模拟海拔4500米)内通过诱导构建高原缺氧性肺动脉高压模型。给药组分别灌胃给予250、125、62.5 mg/Kg的ACRT。给药4周后,测定大鼠肺动脉压,观察肺组织切片,测定与肺组织中ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路相关的蛋白表达情况。结果不同剂量给药组ACRT能显著抑制大鼠的肺动脉压升高,抑制大鼠的肺血管重塑、炎性病变,抑制大鼠的肺小动脉内皮Ⅰ、Ⅱ型上皮细胞线粒体肿胀,并调控大鼠肺组织中与ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路相关的蛋白活化,其中高剂量给药组效果最佳。结论ACRT具有显著的抗大鼠高原缺氧性肺动脉高压作用,其具体作用机制可能与调控ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路有关。

电针人中穴对脑梗死大鼠ACE-AngⅡ/ACE2-Ang(1-7)轴相关因子表达的干预效应研究

[目的]观察脑梗死大鼠血管紧张素转化酶(ACE)-血管紧张素(Ang)Ⅱ/ACE2-Ang(1-7)轴通路的变化规律以及电针干预效应,从血管舒缩的角度探讨针刺治疗脑梗死的作用机制。[方法]将126只大鼠随机分为空白组、模型组、电针组。模型组和电针组按术后1、3、6、9、12、18、24 h,3、7、12 d各分为10个时相组,造模后电针组每日针刺人中穴。各组大鼠进行神经功能缺损,脑梗死面积以及免疫组化的检测。[结果]1)针刺后各组大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠神经功能缺损评分(NSS)随缺血时间延长逐渐下降,各时相评分均显著高于空白组(P<0.01);电针组各时相评分低于模型组,两组在3、7、12 d差异有统计学意义(P<0.01)。2)绿化三苯四氮唑(TTC)染色结果模型组与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),各时相电针组明显小于同时相模型组(P<0.05,P<0.01)。3)免疫组化结果:模型组ACE表达在术后上调至18 h回落,1 h~7 d显著高于空白组(P<0.01);电针组除6 h外表达均低于模型组,9、18、24 h有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。模型组AngII表达在术后上调至24 h回落,在3~9 h和18 h~7 d高于空白组(P<0.05,P<0.01);电针组1 h~3 d均低于模型组,3、6、18 h~3 d差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。模型组血管紧张素受体AT1表达在术后9 h上调至24 h回落,其中3 h、9 h~24 h有统计学差异(P<0.05,P<0.01);电针组自9 h后均低于模型组,12、18、24 h差异有统计学意义(P<0.05)。电针组ACE2表达在术后3 h上调至18 h后下调,1 h到12 d高于空白组,1、9到3 d有统计学差异(P<0.05);电针组24 h~3 d时相与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。模型组Ang(1-7)表达自9 h上调至12 h后下调,除1、6 h时相外,均显著高于空白组(P<0.05,P<0.01)。电针组从3 h开始上调至24 h后下调,24 h到7 d高于模型组差异有统计学意义(P<0.01)。模型组血管内皮细胞表达的Ang(1-7)的特异性受体(MAS)表达自12 h上调至3 d后下调,3、6、12 h~12 d时相均高于空白组,12 h~7 d差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);电针组自9 h后表达高于模型组,其中3、24 h,3、7 d差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]电针干预能显著改善MCAO大鼠的神经功能症状,减少脑缺血体积,改善脑血流量,下调ACE、AngII、ATl的表达情况,上调Ang(1-7)、ACE2、MAS的表达情况,改善脑梗死的预后。

附子中单酯型生物碱类成分靶向ACE2-Ang1-7轴治疗慢性心力衰竭的研究进展

心力衰竭是指心脏无法泵血,除了心脏移植或心室辅助装置外,尚无更有效的治疗方法的一个公共卫生问题.肾素-血管紧张素系统(RAS)在调节正常生理和心血管疾病的发病机制中具有重要作用.血管紧张素转换酶2(ACE2)及其产物血管紧张素1-7(Ang1-7)被认为对其他已知的RAS成员的不良反应具有抵消作用.现代药理学研究发现,单酯型生物碱是附子二萜类双酯型生物碱的水解产物,具有明显降压,抑制心肌收缩力等作用,但其作用机制还有待研究.本文论述了慢性心衰中ACE2、Ang(1-7)的基本特性及其相互关系,探讨了通过靶向ACE2-Ang(1-7)-MAS受体轴从而产生心血管保护作用的机制,总结了近年来附子中单酯型生物碱靶向ACE2-Ang(1-7)-MAS轴的抗心衰作用研究进展,为深入研究心力衰竭以及药物的开发利用提供依据.

补中益气汤基于ACE2-Ang(1-7)-Mas轴减轻CIH诱发的肺脏炎症损伤

目的:探讨补中益气汤对慢性间歇性低氧(CIH)小鼠肺脏炎症的干预作用,并初步阐明其作用机制。方法:将40只健康的6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分成:常氧组、模型组(CIH)和补中益气汤低、中、高剂量组。常氧组暴露于常氧环境中,模型组与补中益气汤低、中、高剂量组暴露于间歇性低氧环境中。其中,补中益气汤低、中、高剂量每日放入低氧舱前30 min给予补中益气汤灌胃(低、中、高剂量分别为8.1、16.2、32.4 g·kg^(-1)·d-1),而模型组与常氧组给予同等体积生理盐水。造模5周后,应用EMKA型动物肺功能仪检测小鼠肺功能,肺功能检测完毕后取材。应用苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠肺脏的病理学改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和肺组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)及免疫组化检测IL-6、IL-8、TNF-α、血管紧张素转化酶2(ACE2)、线粒体组装受体(Mas)蛋白的表达。结果:与常氧组比较,模型组小鼠肺功能出现明显异常(P<0.05,P<0.01),肺组织出现肺泡壁增厚、炎性细胞浸润等改变;血清中IL-6、IL-8、TNF-α和肺组织中AngⅡ的含量显著上升(P<0.01),Ang(1-7)含量显著下降(P<0.01),IL-6、IL-8、TNF-α蛋白表达显著升高、ACE2、Mas蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,中药组小鼠肺功能有所改善(P<0.05,P<0.01),肺脏HE染色可见肺泡壁厚度大致正常,炎性细胞浸润减少;免疫组化和Western blot检测炎症相关蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),ACE2、Mas蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:补中益气汤可通过调节ACE2-Ang(1-7)-Mas轴抑制炎症反应改善CIH暴露后小鼠的肺脏损伤。

自发性高血压大鼠左心室肥厚与ACE-Ang Ⅱ-AT_1R轴/ACE2-Ang(1-7)-MasR轴变化

目的探讨血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)-血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)-血管紧张素1型受体(angiotensin type 1receptor,AT_1R)轴与ACE2-Ang(1-7)-Mas受体(Mas receptor,MasR)轴在自发性高血压左心室肥厚中作用。方法 10只20周龄雄性自发性高血压(spontaneously hypertension,SH)大鼠为SH组,10只20周龄正常血压Wistar-Kyoto大鼠为对照组,采用尾动脉测压仪测定2组大鼠尾动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)和平均动脉压(mean arterial pressure,MAP);取2组大鼠全心和左心室称质量,计算心脏指数(cardiac index,CI)和左心室指数(left ventricular mass index,LVMI);取左心室心肌组织行组织病理检查HE染色,采用病理图像分析系统检测心肌细胞横径(cardiomyocytes transection diameter,CTD);采用ELISA法测定左心室心肌组织ACE、ACE2、AngⅡ和Ang(1-7)水平;采用Western blot法测定左心室心肌组织AT_1R和MasR蛋白表达情况,并进行2组间比较。结果SH组SBP[(217.07±17.83)mm Hg]、DBP[(160.10±13.85)mm Hg]、MAP[(179.10±13.43)mm Hg]、CI[(3.61±0.15)mg/g]、LVMI[(2.57±0.21)mg/g]、CTD[(145.65±30.86)μm]、AT_1R蛋白表达水平[(104.95±15.59)%]明显高于对照组[SBP(142.36±16.71)mm Hg、DBP(98.09±23.30)mm Hg、MAP(112.93±19.88)mm Hg、CI(3.13±0.24)mg/g、LVMI(1.94±0.14)mg/g、CTD(75.51±16.25)μm、AT_1R(63.82±17.56)%](P<0.01),MasR蛋白表达水平[(59.25±19.76)%]明显低于对照组[(96.83±30.53)%](P<0.01);SH组左心室心肌组织ACE、ACE2、AngⅡ、Ang(1-7)含量均低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);SH组ACE与AngⅡ、ACE2呈明显正相关(r=0.915 8,P=0.001 2;r=0.844 7,P=0.003 8),ACE2与Ang(1-7)呈明显正相关(r=0.987 9;P=0.000 1)、AngⅡ与Ang(1-7)呈明显正相关(r=0.991 2,P=0.000 1);对照组ACE与AngⅡ、ACE2呈明显正相关(r=0.973 3,P=0.000 1;r=0.968 2,P=0.000 1),ACE2与Ang(1-7)呈明显正相关(r=0.916 0,P=0.000 1),AngⅡ与Ang(1-7)呈明显正相关(r=0.907 6,P=0.000 1)。结论ACE-AngⅡ-AT_1R/ACE2-Ang(1-7)-MasR平衡失调参与SH左心室肥厚的病理生理过程,主要机制与AT_1R功能增强及MasR功能减弱有关。

Ang(1-7)与2型糖尿病合并冠心病的研究进展与展望

血管紧张素(1-7)[angiotensin1-7,Ang(1-7)]是肾素-血管紧张素(renin-agiotensin system,RAS)系统中新近发现的一种重要活性肽物质,与Mas受体结合,形成血管紧张素转换酶2(angiotensin-converting enzyme2,ACE2)-Ang(1-7)-Mas轴拮抗血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)-血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)-AT1R轴参与2型糖尿病及冠心病的功能调控。最近来自体外、体内和临床研究的证据反映了Ang(1-7)具有抗氧化、抗纤维化、抗炎、抗动脉粥样硬化等特性。本文结合国内外相关文献就RAS系统新成员Ang(1-7)与2型糖尿病及冠心病的最新研究进展做一综述,旨在延缓疾病的发展,为临床实践提供更好的治疗思路及治疗靶点。

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠ACE-AngⅡ-AT1R及ACE2-Ang(1-7)-MASR轴“调控-拮抗”作用的影响

目的:研究复肾功方对腺嘌呤诱导的慢性肾衰竭(CRF)大鼠血管紧张素转化酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(ACE-AngⅡ-AT1R)轴与血管紧张素转化酶2-血管紧张素(1-7)-Mas受体[ACE2-Ang(1-7)-MASR]轴的"调控-拮抗"作用,探讨其延缓CRF进展的作用机制。方法:将65只雄性SD大鼠随机分为正常组10只、造模组55只,正常组常规饲养,造模组进行为期28 d的0.25 g·kg^(-1)d-1腺嘌呤混悬液灌胃。模型建立后,将存活造模大鼠随机分为模型组,贝那普利组(0.01 g·kg^(-1)·d^(-1)),复肾功方低、中、高剂量(4,8,16 g·kg^(-1)·d^(-1))组,正常组和模型组以等体积生理盐水灌胃,持续28 d。实验结束后,测量各组大鼠尾静脉舒张压(SBP),收缩压(DBP),并收集24 h尿液以测定24 h尿蛋白(24 h U-pro);测定血清中肌酐(SCr),尿素氮(BUN)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织形态;马松(Masson)染色观察肾间质纤维化程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清和肾组织匀浆中AngⅡ,Ang(1-7)及血清中胱抑素C(CysC)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织中ACE,ACE2,AT1R,MASR蛋白表达水平;免疫组化标记肾组织中ACE,ACE2蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清SCr,BUN,CysC明显上升(P<0.05),血清与肾组织中的AngⅡ含量明显增加,Ang(1-7)含量明显减少(P<0.05),肾组织中ACE,AT1R蛋白表达量明显升高(P<0.05),ACE2,MASR蛋白表达量明显降低(P<0.05);与模型组、贝那普利组比较,经复肾功方干预治疗后,大鼠血清SCr,BUN,CysC含量明显下降(P<0.05),血清与肾组织中的AngⅡ含量显著减少,Ang(1-7)含量明显增加(P<0.05),肾组织中ACE,AT1R蛋白表达量显著降低,ACE2,MASR蛋白表达量明显升高(P<0.05),其中复肾功方高剂量效果最佳,复肾功方高、中、低剂量的效果呈剂量相关性。结论:复肾功方可改善腺嘌呤所致CRF大鼠肾功能和肾脏的病理学改变,其机制可能与通过抑制ACE-AngⅡ-AT1R轴,同时促进ACE2-Ang(1-7)-MASR轴来延缓CRF的进展有关。

血管紧张素转化酶2(ACE2)在糖尿病大鼠肾损伤中的作用及机制分析

目的:通过比较肾脏组织中血管紧张素转化酶Ⅰ(angiotensin converting enzymeⅠ,ACE)-血管紧张素Ⅱ(ang iotensinⅡ,AngⅡ)-血管紧张素Ⅱ受体1亚型(AngⅡtype 1 receptor,AT1)/血管紧张素转化酶2(angiotensinconverting enzymeⅡ,ACE2)-血管紧张素1-7(angiotensin 1-7,Ang 1-7)-Mas及肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensinsystem,RAS)相关调节因子在肾损伤过程中的表达差异,探讨ACE2在糖尿病大鼠肾脏损伤发生发展中的作用及可能的分子机制。方法:研究选用STZ腹腔注射致大鼠糖尿病,分别于15d(对照1组和模型1组)和30d(对照2组和模型2组)断头处死,取肾脏组织。PCR检测肾脏组织中ACE、AT1、ACE2和Mas mRNA的表达水平;放免法测定肾脏局部组织中肾素活性和Ang I、AngⅡ含量。结果显示:与对照组相比,模型1组大鼠肾脏组织中ACE2和其Mas受体mRNA表达升高,ACE mRNA表达无显著差异,AT1 mRNA表达下降,ACE/ACE2 mRNA比值下降;模型2组大鼠肾脏组织中ACE2 mRNA表达低于对照2组,Mas受体mRNA表达无显著变化,ACE mRNA的表达高于对照2组,AT1受体有同样升高趋势,ACE/ACE2 mRNA表达比值较对照2组升高,有显著性差异。放射免疫分析结果显示:模型1组肾脏局部组织中肾素活性和Ang I含量低于对照1组,有显著性差异(P<0.05),而AngⅡ含量高于对照1组,无显著性差异(P>0.05);模型2组肾素活性和Ang I极显著高于对照2组(P<0.01),同时AngⅡ也显著高于对照2组(P<0.05)。结论:ACE与ACE2表达失调是糖尿病大鼠肾损伤发生发展的原因之一。损伤初期以ACE2-Ang(1-7)-Mas轴的激活占优势;严重损伤时,ACE-AngⅡ-AT1轴的激活占优势。ACE2在早期肾脏病变的发病中通过降解AngⅡ发挥积极的保护作用。