毕赤酵母表达重组红林蚁AChE高密度发酵工艺研究

【目的】优化毕赤酵母高密度生产重组红林蚁乙酰胆碱酯酶(AChE)的发酵条件,为AChE在农药残留检测中应用提供酶源。【方法】采用毕赤酵母表达系统,选用高表达AChE的重组子X33/pPICZαAAChE,对毕赤酵母高密度生产重组红林蚁AChE的发酵条件进行优化,确定最佳发酵pH值、温度、溶解氧、补料流加速率等因素。【结果】毕赤酵母表达重组红林蚁AChE高密度发酵工艺的最佳参数:pH5.0、溶解氧30%、温度29℃、转速500 r/min、罐压0.06 MPa,甲醇诱导72~96 h时发酵液上清AChE活性增长最快。从发酵结果看,发酵结束菌体湿重可达280 mg/mL,发酵罐内甲醇诱导96 h酶活性最高,达6 000 U/mL,是摇瓶诱导表达的8倍。【结论】毕赤酵母表达系统最佳发酵工艺能实现红林蚁AChE的高密度发酵生产,降低AChE提取成本。

甲基丙烯酸甲酯的ACH生产工艺研究

ACH法操作弹性大,目前在中国MMA仍是最主要的生产方法,在欧,美地区也广泛采用。本文结合实际生产经验对ACH法的生产工艺、原料配比、反应温度、压力进行了讨论。

大学英语的分层教学

随着近年来高校的扩招 ,各种生源日趋复杂 ,学生的英语水平参差不齐 ,如果再继续沿用传统的教学模式 ,就经常会遇到许多新难题 ,特别是满足不了大学生急于提高英语水平的要求。为了满足不同层次学生的要求 ,使大学英语教学得到实质性的提高 ,在大学英语教学中 ,确定“分层教学、分类指导、分级达标”的改革指导思想 ,打破传统单一的教学模式 ,从而使大学英语教学得到实质性的提高 ,是十分必要的。

基于抗乙酰胆碱酯酶活性及多成分含量分析的天泰1号提取工艺优化

目的优化主治老年痴呆症的天泰1号(黄连、人参、天麻等组成)的提取工艺。方法以乙酰胆碱酯酶抑制率、浸膏得率、黄连生物碱和人参皂苷含量加权综合评分为指标优选工艺;采用改进的Ellman法测定抑制乙酰胆碱酯酶活性;采用高效液相色谱法(HPLC)测定主药黄连生物碱(小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀)和人参皂苷(人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rd)的含量;在单因素考察基础上,采用正交设计方法,考察乙醇浓度、溶媒用量、提取时间、浸泡时间对提取工艺的影响。结果改良Ellman法测定乙酰胆碱酯酶方法操作简单、结果准确可靠;黄连生物碱和人参皂苷检测方法线性关系良好(R2>0.999 5),平均加样回收率95.44%~101.50%,相对标准偏差(RSD)<2.96%;优选最佳提取工艺为采用70%乙醇为溶媒,加入10倍溶媒,提取2次,每次1.5 h,最优提取工艺参数组合验证得分0.91分,所得提取物具有良好的抑制乙酰胆碱酯酶活性作用。结论基于活性评价和药效成分多指标优化的提取工艺参数具有科学性、合理性,适合产业化生产。

日本荚蒾叶片中乙酰胆碱酯酶抑制物的提取工艺优化

荚蒾属植物中含有抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的物质。文章对日本荚蒾叶片中AChE抑制物的提取工艺进行了优化。结果显示:日本荚蒾叶片提取液对AChE的抑制活性较高,在提取液浓度为1 mg/mL时抑制率为68.5%;最适提取条件为乙醇浓度80%、提取温度60℃、提取时间120 min;同时,各有机溶剂的萃取组分在1.0 mg/mL时的AchE抑制率分别为:石油醚组分80.76%、乙酸乙酯组分75.68%和正丁醇组分48.74%,且石油醚相和乙酸乙酯相的抑制率高于未萃取的提取液;预示这2种萃取相中可能存在活性更强的AChE抑制成分。

正交实验设计优选十味平痤复方中大黄提取工艺

目的:筛选十味平痤复方中大黄的提取工艺。方法:以肠推进率、大黄素和干膏率为指标,通过小鼠小肠运动试验及正交实验L9(34)复方中大黄优化提取工艺。结果:实验条件下,三个样品组大黄打粉加入复方组(B)、大黄乙醇提取物加入复方组(C)、全方水提取组(D)与生理盐水组(A)比较有显著性差异(P<0.05),其中水提取全复方样品(D)泻下作用较大黄打粉加入复方组(B)显著减弱,大黄乙醇提取物加入复方组(C)泻下作用与大黄打粉加入复方组(B)比较无显著性差异(P>0.05);大黄的最佳提取工艺为A2B3C2,即以10倍量70%乙醇提取2次,每次1.5h。结论:十味平痤复方中大黄以70%乙醇提取后加入复方,优化提取工艺稳定、合理可行。

Baastrup's disease: The kissing spine

A 67-year-old male presented with a gradually progressive low back pain of 2 years duration. The patient was leading a retired life and there was no history of chronic fever or significant trauma. There was no radiation of pain or any features suggestive of claudication. There was no history of any comorbidity. The pain was aggravated with extension of the spine and relieved with flexion. There was no swelling or neurological deficit, but muscle spasm was present. Radiographs of the spine revealed degenerative changes in the lumbosacral spine, along with articulation of spinous processes at in lumbar spine at all levels level suggestive of Baastrup's disease, commonly known as "kissing spine". Routine blood investigations were within normal limits. The patient was managed conservatively. He was given a week's course of analgesics and muscle relaxants and then started on spinal flexion exercises, with significant improvement being noted at 6 months follow up.

不同类型腐乳理化性质及乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

比较了青方、红方、白方和低盐红腐乳理化性质及乙酰胆碱酯酶(Ach E)抑制活性,研究高Ach E抑制活性腐乳样品发酵过程中Ach E抑制活性的变化规律。结果表明:4种腐乳中,青方腐乳pH和食盐含量最高,总酸和水分含量最低,氨基态氮和水溶性蛋白含量高于红方和白方腐乳。青方腐乳中含量最高的5种氨基酸均为疏水性氨基酸,分别为Leu,Ala,Val,Ile和Phe,其它3种腐乳中Glu和Asp含量最高。青方腐乳Ach E抑制活性明显高于其它类型腐乳,其乙醇提取物的IC50值为0.52 mg/m L;白方腐乳抑制活性次之,其IC50值约为青方腐乳的2.54倍。白坯提取液几乎不显示Ach E抑制活性,生产过程Ach E抑制活性明显增加,对Ach E的抑制率达56.32%,而盐腌过程抑制活性降低24.15%;后酵前期,青方腐乳Ach E抑制活性继续增加,增幅小于前酵过程,而后酵45 d后Ach E抑制活性变化不明显。