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Myod1通过调节lncRNA SNHG15和miR-24-3p对氧糖剥夺SH-SY5Y细胞增殖及凋亡的影响
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作者 冀方超 张晨昕 +3 位作者 任占军 潘云志 逯琦 孙兴元 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期989-999,共11页
目的:探讨肌源性分化蛋白1(Myod1)对氧糖剥夺(OGD)诱导的SH-SY5Y细胞增殖抑制和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测正常对照组研究对象和缺血性脑梗死组患者外周血及正常培养的SH-SY5Y细胞(对照组)... 目的:探讨肌源性分化蛋白1(Myod1)对氧糖剥夺(OGD)诱导的SH-SY5Y细胞增殖抑制和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测正常对照组研究对象和缺血性脑梗死组患者外周血及正常培养的SH-SY5Y细胞(对照组)和OGD细胞模型(OGD组)细胞中Myod1和长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)mRNA表达水平。分别采用si-Myod1、pcDNA3.0-Myod1、si-SNHG15、pcDNA3.0-SNHG15、si-NC、空载质粒(Vector)、miR-NC和miR-24-3p模拟物(miR-mimics)质粒转染SH-SY5Y细胞后,进行OGD处理,将SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD组、OGD+Vector组、OGD+Myod1组、OGD+si-NC组、OGD+si-Myod1组、OGD+si-SNHG15组、OGD+si-SNHG15+Vector组、OGD+si-SNHG15+Myod1组、OGD+miR-NC组、OGD+miR-mimics组、OGD+miR-mimics+Vector组和OGD+miR-mimics+SNHG15组。采用CCK-8法检测各组细胞活性,采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色法检测各组EdU阳性细胞率,采用原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测各组TUNEL阳性细胞率,采用Western blotting法检测各组细胞中裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved caspase-9)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。染色质免疫共沉淀(CHIP)法评估Myod1和SNHG15之间的关联。双荧光素酶报告基因实验评估Myod1与SNHG15及SNHG15与miR-24-3p的靶向关系。结果:与正常对照组比较,缺血性脑梗死组患者外周血中Myod1和SNHG15 mRNA表达水平均升高(P<0.05)。与对照组比较,OGD组细胞中Myod1和SNHG15 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05)。与OGD组比较,48和72 h时OGD+Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率均降低(P<0.01),TUNEL阳性细胞率升高(P<0.01);OGD+si-Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率均升高(P<0.01),TUNEL阳性细胞率降低(P<0.01)。Myod1可与SNHG15的启动子序列结合。SNHG15可吸附miR-24-3p,Myod1与SNHG15及SNHG15与miR-24-3p存在靶关系。敲低SNHG15后,与OGD组比较,48和72 h时OGD+si-SNHG15组细胞活性和EdU阳性细胞率均升高(P<0.01),TUNEL阳性细胞率降低(P<0.01),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.01);与OGD+si-SNHG15组比较,48和72 h时OGD+si-SNHG15+Myod1组细胞活性和EdU阳性细胞率降低(P<0.05),TUNEL阳性细胞率升高(P<0.05),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平升高(P<0.05),Bcl-2的蛋白表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-24-3p和SNHG15后,与OGD组比较,48和72 h时OGD+miR-mimics组细胞活性和EdU阳性细胞率升高(P<0.01),TUNEL阳性细胞率降低(P<0.01),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.01);与OGD+miR-mimics组比较,48和72 h时OGD+miR-mimics+SNHG15组细胞活性和EdU阳性细胞率降低(P<0.05),TUNEL阳性细胞率升高(P<0.05),细胞中Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:Myod1可通过与SNHG15启动子区结合进而吸附miRNA-24,促进OGD诱导的SH-SY5Y细胞的增殖抑制和细胞凋亡。 展开更多
关键词 肌源性分化蛋白1 小核仁RNA宿主基因15 微小RNA-24-3p SH-SY5Y细胞 脑梗死
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circPVT1通过miR-24-3p/let-7a-5p/FSCN1轴促进鼻咽癌细胞侵袭迁移
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作者 莫勇真 王裕民 +4 位作者 范春梅 晏其佳 曾朝阳 蒋卫红 熊芳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1946-1958,共13页
目的鼻咽癌是一种来源于鼻咽上皮的恶性肿瘤,其临床特征之一是易发生淋巴转移,但是目前鼻咽癌转移的分子机制尚未阐明。circPVT1是由PVT1基因2号外显子反向拼接形成的环状RNA(circRNA),在多种肿瘤中表达上调,本文探讨了circPVT1在鼻咽... 目的鼻咽癌是一种来源于鼻咽上皮的恶性肿瘤,其临床特征之一是易发生淋巴转移,但是目前鼻咽癌转移的分子机制尚未阐明。circPVT1是由PVT1基因2号外显子反向拼接形成的环状RNA(circRNA),在多种肿瘤中表达上调,本文探讨了circPVT1在鼻咽癌侵袭迁移中的作用和分子机制。方法通过RT-qPCR检测circPVT1及其下游miRNA和FSCN1在鼻咽癌细胞的表达情况,Transwell和划痕愈合实验检测circPVT1对鼻咽癌细胞侵袭迁移的影响,RNA pull-down实验检测circPVT1结合的miRNA,双荧光素酶报告实验检测miR-24-3p和let-7a-5p靶向抑制FSCN1 mRNA表达。结果在鼻咽癌细胞中过表达circPVT1可以促进鼻咽癌细胞侵袭迁移,而敲低circPVT1则可以抑制鼻咽癌细胞的侵袭迁移。进一步研究发现,circPVT1可以通过竞争性吸附miR-24-3p和let-7a-5p,上调FSCN1的表达,从而促进鼻咽癌细胞的侵袭迁移。结论circPVT1通过miR-24-3p/let-7a-5p/FSCN1轴促进鼻咽癌细胞侵袭迁移,证实circPVT1是鼻咽癌发生发展过程中一个重要驱动因子。 展开更多
关键词 鼻咽癌 circPVT1 侵袭迁移 miR-24-3p let-7a-5p FSCN1
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衍生肽Esc-1GN(1-24)能减轻细胞氧化应激损伤和调节细胞因子抑制炎症反应
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作者 卢万成 徐学清 莫国香 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1276-1281,共6页
目的 探究衍生肽Esc-1GN(1-24)的抗氧化和抗炎活性。方法 利用MTT检测Esc-1GN(1-24)对Raw264.7和PC12细胞增殖的影响及对H_(2)O_(2)诱导PC12细胞损伤的保护作用;利用FRAP、ABTS和DPPH法检测Esc-1GN(1-24)的抗氧化活性;利用流式细胞术检... 目的 探究衍生肽Esc-1GN(1-24)的抗氧化和抗炎活性。方法 利用MTT检测Esc-1GN(1-24)对Raw264.7和PC12细胞增殖的影响及对H_(2)O_(2)诱导PC12细胞损伤的保护作用;利用FRAP、ABTS和DPPH法检测Esc-1GN(1-24)的抗氧化活性;利用流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)和细胞凋亡;通过ELISA检测Esc-1GN(1-24)对炎症因子的影响。利用小鼠足趾肿胀模型检测Esc-1GN(1-24)的体内抗炎活性。结果 Esc-1GN(1-24)细胞毒性低,并且抑制H_(2)O_(2)对PC12细胞的损伤;Esc-1GN(1-24)的总抗氧化能力强,能快速清除ABTS和DPPH自由基,减少H_(2)O_(2)诱导PC12的ROS产生和细胞凋亡;Esc-1GN(1-24)浓度依赖性抑制LPS诱导的Raw264.7细胞NO、IL-6、IL-1β和TNF-α的产生,且能抑制角叉菜胶诱导的小鼠足趾肿胀和MPO活力。结论 Esc-1GN(1-24)是一种具有良好抗氧化和抗炎活性的衍生肽,对抗菌肽的结构改造具有重要的参考意义。 展开更多
关键词 两栖动物 衍生肽 Esc-1GN(1-24) 炎症因子 抗氧化 抗炎
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Long non-coding RNA DPP10-AS1 represses the proliferation and invasiveness of glioblastoma by regulating miR-24-3p/CHD5 signaling pathway 被引量:3
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作者 JIWEI SUN LIANG XU +4 位作者 YESEN ZHANG HAORAN LI JIE FENG XUEFENG LU JUN DONG 《BIOCELL》 SCIE 2023年第12期2721-2733,共13页
This investigation aimed to unveil new prospective diagnosis-related biomarkers together with treatment targets against glioblastoma.Methods:The expression levels of long non-coding RNA(lncRNA)DPP10-AS1 were assessed ... This investigation aimed to unveil new prospective diagnosis-related biomarkers together with treatment targets against glioblastoma.Methods:The expression levels of long non-coding RNA(lncRNA)DPP10-AS1 were assessed using real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR)within both the patient tissue specimens and glioblastoma cell lines.The relationship between lncRNA DPP10-AS1 expression in glioblastoma and patient prognosis was investigated.Cell Counting Kit-8(CCK-8),transwell,and clonogenic experiments were utilized to assess tumor cells’proliferation,invasiveness,and migratory potentials after lncRNA DPP10-AS1 expression was up or down-regulated.Using an online bioinformatics prediction tool,the intracellular localization of lncRNA DPP10-AS1 and its target miRNA were predicted,and RNA-FISH verified results.A dual-luciferase reporter experiment validated the relationship across miR-24-3p together with lncRNA DPP10-AS1.MiR-24-3p expression within glioblastoma was identified through RT-qPCR,and potential link across miR-24-3p and lncRNA DPP10-AS1 was assessed using Pearson correlation analysis.Moreover,influence from lncRNA DPP10-AS1/miR-24-3p axis upon glioblastoma cell progression was assessed in vivo via a subcutaneous xenograft tumor model.Results:The expression of lncRNA DPP10-AS1 was notably reduced in both surgical specimens of glioblastoma and the equivalent cell lines.Low level of lncRNA DPP10-AS1 in glioblastoma is following poor prognosis.The downregulation of lncRNA DPP10-AS1 in glioblastoma cells resulted in enhanced cellular proliferation,migration,and invasion capabilities,accompanied by downregulated E-cadherin and upregulated vimentin and N-cadherin.Additionally,the observed upregulation of lncRNA DPP10-AS1 demonstrated a substantial inhibitory function upon proliferation,invasion,and migratory capabilities of LN229 cells.Subcellular localization disclosed that lncRNA DPP10-AS1 had a binding site that interacted with miR-24-3p.Upregulated miR-24-3p was detected in glioblastomas,displaying an inverse correlation with lncRNA DPP10-AS1 expression.MiR-24-3p downstream target has been determined as chromodomain helicase DNA binding protein 5(CHD5).LncRNA DPP10-AS1 affected the invasion and proliferation of glioblastoma by controlling the miR-24-3p/CHD5 axis.Conclusion:The present study demonstrated that lncRNA DPP10-AS1 can inhibit the invasive,migratory,and proliferative properties of glioblastoma by regulating the miR-24-3p/CHD5 signaling pathway.Consequently,lncRNA DPP10-AS1 has potential as a tumor suppressor and might be utilized for accurate diagnosis and targeted treatments of glioblastomas. 展开更多
关键词 GLIOBLASTOMA lncRNA DPP10-AS1 miR-24-3p Chromodomain helicase DNA binding protein 5
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慢性根尖周炎患者根尖肉芽肿组织IL-1β、IL-24变化及与根尖周骨吸收的相关性分析 被引量:3
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作者 马丽芳 王玮 +2 位作者 邝容 徐宁 侯立鹏 《临床误诊误治》 CAS 2023年第1期129-132,共4页
目的探讨慢性根尖周炎(CAP)患者根尖肉芽肿组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-24(IL-24)变化及与根尖周骨吸收的相关性。方法选取2020年5月—2022年5月诊治的CAP 90例作为CAP组,提取根尖肉芽肿组织,根据炎症程度将其进一步分为重... 目的探讨慢性根尖周炎(CAP)患者根尖肉芽肿组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-24(IL-24)变化及与根尖周骨吸收的相关性。方法选取2020年5月—2022年5月诊治的CAP 90例作为CAP组,提取根尖肉芽肿组织,根据炎症程度将其进一步分为重度炎症组(43例)和轻中度炎症组(47例),根据根尖周病变范围最大径将其进一步分为A组(最大径≥6 mm,39例)和B组(最大径3~6 mm,51例)。另选取同期诊治的正畸拔牙50例作为对照组,提取根尖健康牙龈组织。比较CAP组根尖肉芽肿组织与对照组健康牙龈组织及CAP重度炎症组与轻中度炎症组、A组与B组根尖肉芽肿组织IL-1β和IL-24表达水平,采用Pearson相关性分析探讨CAP患者根尖肉芽肿组织IL-1β和IL-24表达水平与根尖周骨吸收面积的相关性。结果IL-1β和IL-24表达水平CAP组根尖肉芽肿组织高于对照组根尖健康牙龈组织;根尖肉芽肿组织IL-1β和IL-24表达水平CAP重度炎症组高于轻中度炎症组,CAP A组高于B组(P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,CAP患者根尖肉芽肿组织IL-1β和IL-24表达水平与根尖周骨吸收面积均呈正相关(r=0.723、0.707,P<0.001)。结论CAP患者根尖肉芽肿组织IL-1β和IL-24表达水平升高,二者表达水平与根尖周炎症程度及骨吸收面积密切相关。 展开更多
关键词 慢性根尖周炎 白细胞介素-1Β 白细胞介素-24 根尖周骨吸收
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24-乙酰泽泻醇A对氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞脂代谢因子ABCA1、CD36及炎症因子CD147、MMP-9的影响 被引量:13
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作者 施凤飞 魏伟 +2 位作者 汪玉成 苏清平 薛偕华 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期7-12,共6页
目的通过体外实验探讨24-乙酰泽泻醇A对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠腹腔巨噬细胞脂代谢因子ATP结合盒转运体A1(ABCA1)、B族清道夫受体(CD36)和炎症因子细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的... 目的通过体外实验探讨24-乙酰泽泻醇A对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠腹腔巨噬细胞脂代谢因子ATP结合盒转运体A1(ABCA1)、B族清道夫受体(CD36)和炎症因子细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的影响。方法分别采用50 mg/L ox-LDL和10 mg/L Dil-ox-LDL诱导巨噬细胞,10 mg/L 24-乙酰泽泻醇A进行干预。荧光显微镜观察细胞内Dil-ox-LDL蓄积情况;蛋白免疫印迹检测细胞ABCA1、CD36、CD147、MMP-9蛋白的表达。结果 10 mg/L Dil-ox-LDL诱导后大鼠腹腔巨噬细胞内有大量的Dil-ox-LDL蓄积,10 mg/L 24-乙酰泽泻醇A干预后,细胞内Dil-ox-LDL蓄积明显减轻。与对照组比较,50 mg/L ox-LDL诱导后大鼠腹腔巨噬细胞ABCA1、CD36和CD147、MMP-9蛋白表达明显增加,10 mg/L 24-乙酰泽泻醇A干预后,ABCA1蛋白表达进一步上升(P<0.01),CD36、CD147和MMP-9蛋白表达被明显抑制(P<0.05或P<0.01)。结论 24-乙酰泽泻醇A上调巨噬细胞的脂代谢因子ABCA1和抑制CD36的表达,减少胆固醇蓄积,同时抑制炎症因子CD147和MMP-9的分泌。 展开更多
关键词 24-乙酰泽泻醇A 巨噬细胞 ABCA1 CD36 CD147 MMP-9
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自拟狼疮方联合泼尼松治疗系统性红斑狼疮疗效及对24 h尿蛋白定量、免疫指标、β-arrestin1的影响 被引量:6
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作者 岳峰 崔丽敏 +3 位作者 张珍 安巨会 刘东海 周文花 《现代中西医结合杂志》 CAS 2018年第27期3038-3041,共4页
目的观察自拟狼疮方联合泼尼松治疗系统性红斑狼疮疗效及对24 h尿蛋白定量、免疫指标、β-抑制蛋白质1(β-arrestin1)的影响。方法将90例系统性红斑狼疮患者随机分为2组,对照组45例给予泼尼松治疗,观察组45例在此基础上加用自拟狼疮方治... 目的观察自拟狼疮方联合泼尼松治疗系统性红斑狼疮疗效及对24 h尿蛋白定量、免疫指标、β-抑制蛋白质1(β-arrestin1)的影响。方法将90例系统性红斑狼疮患者随机分为2组,对照组45例给予泼尼松治疗,观察组45例在此基础上加用自拟狼疮方治疗,观察2组治疗前后糖皮质激素用量、症状体征评分、系统性红斑狼疮疾病活动度评分(SLEDAI)、24 h尿蛋白定量、白细胞介素-10(IL-10)、IL-12及β-arrestin1水平变化情况,统计2组近期疗效,随访复发及不良反应发生情况。结果 2组治疗后糖皮质激素用量明显减少(P均<0.05),面部红斑、关节疼痛、发热及水肿积分,SLEDAI评分,24 h尿蛋白定量及IL-10、β-arrestin1水平均显著降低(P均<0.05),IL-12水平均显著提高(P均<0.05),且观察组治疗后以上指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05);观察组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05),不良反应发生率和随访复发率均显著低于对照组(P均<0.05)。结论自拟狼疮方联合泼尼松治疗系统性红斑狼疮可有效减少激素用量,改善相关症状体征,降低尿蛋白定量,调节免疫指标和β-arrestin1水平,并有助于减轻药物不良反应,避免远期复发。 展开更多
关键词 自拟狼疮方 系统性红斑狼疮 24 h尿蛋白定量 β-抑制蛋白质-1
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CEA、CYFRA21-1、ACTH联检对肺癌的诊断价值 被引量:13
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作者 王书奎 蔡舜英 +1 位作者 蔡均 杜同信 《放射免疫学杂志》 CAS 1996年第3期182-184,共3页
肺癌是严重影响人类健康的恶性肿瘤,其发病率及死亡率正呈上升趋势,可临床上约有95%的肺癌病人为在确切诊断时已属中晚期,早期诊断漏诊率为39~70%,不能满足临床需要。因此,我们对128例肺癌病人血清中的癌胚抗原(CEA)、CYFRA21-1及血... 肺癌是严重影响人类健康的恶性肿瘤,其发病率及死亡率正呈上升趋势,可临床上约有95%的肺癌病人为在确切诊断时已属中晚期,早期诊断漏诊率为39~70%,不能满足临床需要。因此,我们对128例肺癌病人血清中的癌胚抗原(CEA)、CYFRA21-1及血浆中的促肾上腺皮质激素(ACTH)进行了联合检测,并初步探讨其对肺癌的诊断价值。 材料和方法 一、对象: (一)肺癌组:128例(男81,女47),年龄43~81岁,平均62.7岁。均为我院住院病例,并经临床。 展开更多
关键词 肺肿瘤 癌胚抗原 CYFRA21-1 acth 诊断 联检
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核基质结合区结合蛋白SATB1上调乳腺癌干细胞表型CD44^+/CD24^-的表达 被引量:2
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作者 陈忠清 张乔安 +2 位作者 包芸 周仲文 许祖德 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期309-313,共5页
目的探讨核基质结合区结合蛋白,富含A-T序列特异性结合蛋白1(special A-T rich sequencebinding protein 1,SATB1)对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-的影响及机制。方法用SATB1相关小干扰RNA(SATB1related small interfering RNA,SATB1-siR... 目的探讨核基质结合区结合蛋白,富含A-T序列特异性结合蛋白1(special A-T rich sequencebinding protein 1,SATB1)对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-的影响及机制。方法用SATB1相关小干扰RNA(SATB1related small interfering RNA,SATB1-siRNA)双链寡核糖核酸干扰MDA-MB-231细胞;pEGFP-N1-SATB1-GFP真核表达质粒瞬时转染MCF7细胞后,流式细胞术检测SATB1对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-表达的影响。结果 MCF7细胞转染SATB1后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显升高;MDA-MB-231细胞在SATB1-siRNA干扰后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显降低(P<0.05)。结论 SATB1可能在形成并维持乳腺癌肿瘤干细胞特性中起重要作用。 展开更多
关键词 A-T序列特异性结合蛋白1(SATB1) 乳腺癌干细胞(BrCSC) CD44+/CD24-
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HIV-1核蛋白p24在昆虫细胞中的表达 被引量:2
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作者 谢云 董明 张鹏飞 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期202-207,共6页
将完整的HIV-1p24基因克隆到杆状病毒转移质粒中。使用重组转移质粒与野生型杆状病毒(AcNPV)DNA共转染Sf9昆虫细胞,经筛选获得带有编码p24基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Sf9细胞后在细胞中表达了H... 将完整的HIV-1p24基因克隆到杆状病毒转移质粒中。使用重组转移质粒与野生型杆状病毒(AcNPV)DNA共转染Sf9昆虫细胞,经筛选获得带有编码p24基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Sf9细胞后在细胞中表达了HIV核蛋白p24。其重组蛋白的分子量为24kD。此重组糖蛋白在免疫荧光,免疫印染和酶联免疫实验中都能被人HIV-1阳性血清和单克隆抗体所识别。 展开更多
关键词 艾滋病毒-1 核蛋白 病毒蛋白p^24 昆虫细胞 研制
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分离型痘苗病毒表达载体的构建及HIV-1 gag p17-24的表达 被引量:1
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作者 金宁一 王宏伟 +4 位作者 殷震 李体远 王玉红 罗坤 安汝国 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第1期8-11,共4页
目的:探索荧光蛋白作为报告基因以及His·Tag作为纯化标签在重组痘苗病毒表达系统中的应用.方法:将N-端融合His·Tag基因序列,插入痘苗病毒表达载体pSFJ2-16,并在其多克隆位点下游装入带有巨细胞病毒(CMV)启动子的突变型荧光蛋... 目的:探索荧光蛋白作为报告基因以及His·Tag作为纯化标签在重组痘苗病毒表达系统中的应用.方法:将N-端融合His·Tag基因序列,插入痘苗病毒表达载体pSFJ2-16,并在其多克隆位点下游装入带有巨细胞病毒(CMV)启动子的突变型荧光蛋白基因(GFP),构建成N-端融合His·Tag并带有荧光蛋白报告基因的分离型痘苗病毒表达载体.再从pET-28中切出C-端融合His·Tag及多克隆位点序列,并与CMV-FP基因一同装入pSFJ2-16,构建成C-端融合His·Tag的分离型痘苗病毒表达载体.将人免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)核心蛋白(gag)p17-24基因分别插入上述载体,并筛选出重组病毒.结果:实验表明,重组病毒表达了gag蛋白.结论:将His-Tag的纯化标签加入到通用型痘苗病毒表达载体中用于纯化表达的目的蛋白,该方法是可行的.荧光蛋白基因作为一个筛选标记基因应用于痘苗病毒载体系统还有待进行进一步研究. 展开更多
关键词 痘苗病毒 荧光蛋白 HIV-1 p17-24 载体构建
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艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原和抗体联合检测的临床价值分析 被引量:4
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作者 李雷 王喆 《皮肤病与性病》 2019年第6期801-802,共2页
目的分析联合检测艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原与抗体的临床价值。方法纳入本院2018年1月至2018年12月接收进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测患者1 000例血液样本,分别进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测,针对(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本检... 目的分析联合检测艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原与抗体的临床价值。方法纳入本院2018年1月至2018年12月接收进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测患者1 000例血液样本,分别进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测,针对(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本检测CD4+T淋巴细胞与RNA,对比分析检测结果。结果 1 000份检测样本中,HIV抗体检测阳性80例、(HIV)-1、p24抗原检测阳性11例,(HIV)-1、p24抗原与抗体联合检测阳性6例。11例(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本中,四代酶联试剂检测显示9例HIV抗原、抗体检测阳性,2例检测阴性,进行病毒载量检测均≥20 000拷贝/ml,检测CD4细胞显示<500个/μl样本4例。结论临床应用可区分(HIV)-1、p24抗原与抗体的四代试剂进行检测可提高对HIV感染患者的检出率并缩短检测窗口期,在检测过程中结合应用病毒载量与CD4细胞水平计数检测对于促进检验准确性的提高也具有积极意义。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 (HIV)-1、p24抗原 HIV抗体 联合检测 临床价值
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IL-24对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、细胞周期和缺氧诱导因子-1α表达的影响 被引量:1
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作者 汤炀炀 梁杰 唐旭东 《广东医学院学报》 2012年第3期237-239,242,共4页
目的观察IL-24对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)的抑制效应及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法建立KF组、携带绿色荧光蛋白表达质粒的KF组(pEGFP-KF组)、携带转染IL-24基因表达质粒的KF组(IL-24-pEGFP-KF组),用噻唑蓝法及流式细胞术... 目的观察IL-24对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)的抑制效应及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法建立KF组、携带绿色荧光蛋白表达质粒的KF组(pEGFP-KF组)、携带转染IL-24基因表达质粒的KF组(IL-24-pEGFP-KF组),用噻唑蓝法及流式细胞术检测KF增殖、细胞周期变化。建立KF、pEGFP-KF、IL-24-pEGFP-KF细胞株裸鼠移植瘤模型,免疫组织化学检测KF中HIF-1α表达。结果 IL-24-pEGFP-KF组较pEGFP-KF组、KF组到达平台期延迟,IL-24明显抑制了细胞增殖(P<0.05)。IL-24-pEGFP-KF组的G0/G1期比例明显高于pEGFP-KF组、KF组,而S、G2/M期比例明显降低(P<0.05)。IL-24-pEGFP-KF组的HIF-1α表达明显低于pEGFP-KF组和KF组。结论 IL-24可抑制KF增殖和HIF-1α表达,阻止细胞周期于G0/G1期。 展开更多
关键词 白介素24 缺氧诱导因子-1Α 瘢痕疙瘩
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HPLC-ELSD法测定珠子参根茎中新化合物24(R)-珠子参苷R_1的质量比
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作者 王加付 彭绍 +5 位作者 李兰杰 杨洁 孙婷 李绪文 金永日 时晓磊 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1095-1099,共5页
采用高效液相色谱蒸发光散射法(HPLC-ELSD)测定珠子参根茎中新化合物24(R)-珠子参苷 R1的质量浓度.色谱条件为:Aglilent Zorbax SB-C18(ODS,4.6 mm ×250 mm,5μm)色谱柱,流动相V(甲醇)∶V(水)=58∶42,流速1.0 mL/min,柱... 采用高效液相色谱蒸发光散射法(HPLC-ELSD)测定珠子参根茎中新化合物24(R)-珠子参苷 R1的质量浓度.色谱条件为:Aglilent Zorbax SB-C18(ODS,4.6 mm ×250 mm,5μm)色谱柱,流动相V(甲醇)∶V(水)=58∶42,流速1.0 mL/min,柱温25℃,载气压力1.94×105 Pa,漂移管温度85℃,撞击器关闭,进样量20μL.结果表明:在0.40-20.0μg内,24(R)-珠子参苷R1线性关系较好,r=0.9993(n=6);24(R)-珠子参苷 R1的平均回收率为98.7%,RSD=1.28%(n=6). 展开更多
关键词 24(R)-珠子参苷R1 高效液相色谱蒸发光散射法 质量比
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固相反应合成Sr_(1+x)Zr_4P_(6-2x)Si_(2x)O_(24)磷酸盐粉体
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作者 姜斌 房明浩 +3 位作者 彭鹏 卫礼贤 黄朝晖 刘艳改 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第A02期82-85,共4页
以SrCO3、SiO2、ZrO2和(NH4)H2PO4为实验原料,采用固相反应法制备出磷酸盐Sr1+xZr4P6-2xSi2xO24(x=0~0.4)粉体。XRD和SEM分析表明:在1100℃,4h温度下煅烧能够合成单相Sr1+xZr4P6-2xSi2xO24(x=0~0.4)粉体,1100℃,4h条件下制备的Sr1+xZr... 以SrCO3、SiO2、ZrO2和(NH4)H2PO4为实验原料,采用固相反应法制备出磷酸盐Sr1+xZr4P6-2xSi2xO24(x=0~0.4)粉体。XRD和SEM分析表明:在1100℃,4h温度下煅烧能够合成单相Sr1+xZr4P6-2xSi2xO24(x=0~0.4)粉体,1100℃,4h条件下制备的Sr1+xZr4P6-2xSi2xO24(x=0~0.4)粉体成球状,平均粒径在300~500nm之间。在1100℃煅烧温度下适当延长保温时间,有利于Sr1+xZr4P6-2xSi2xO24(x=0~0.4)单相粉体的形成。 展开更多
关键词 Sr1+xZr4P6-2xSi2xO24 固相反应法 热膨胀系数
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PWN1-24TH型配电箱自动电压调整器的改造
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作者 刘谊露 张友荣 夏斌 《移动电源与车辆》 2009年第3期6-8,共3页
介绍了SG3525A的电路结构和主要特性,并将其应用于PWN1-24TH型配电箱的自动电压调整电路中。该调节器采用MOSFET和PWM控制技术,电路结构简单。经过负载实验,证明了电路的可行性。
关键词 PWN1-24TH型配电箱 自动电压调整器 SG3525A 脉宽调制
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24-乙酰泽泻醇A对ox-LDL诱导大鼠VSMC表型转化的影响及其与ERK1/2通路的关系 被引量:9
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作者 周晓茂 魏伟 +2 位作者 陈彤 邓阳阳 薛偕华 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期342-346,共5页
目的观察24-乙酰泽泻醇A(alisol A 24-acetate)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化及其表型转化过程中合成基质金属蛋白酶9(MMP-9)能力的影响,并探讨与ERK1/2的相关性。方法以酶消化法体外培养大鼠VSMC,... 目的观察24-乙酰泽泻醇A(alisol A 24-acetate)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化及其表型转化过程中合成基质金属蛋白酶9(MMP-9)能力的影响,并探讨与ERK1/2的相关性。方法以酶消化法体外培养大鼠VSMC,ox-LDL(50 mg/L)进行诱导,24-乙酰泽泻醇A(10 mg/L)进行干预,免疫细胞化学染色观察VSMC收缩表型标记蛋白SM22α的变化;RT-PCR检测VSMC MMP-9 mRNA的表达及Western blot检测VSMC MMP-9和ERK、p-ERK蛋白表达的变化。结果在ox-LDL诱导下,VSMC收缩表型标志蛋白SM22α的表达降低,细胞向合成型转化,促进MMP-9的合成,伴随着ERK1/2磷酸化水平升高(P<0.05);在24-乙酰泽泻醇A的干预下,VSMC收缩表型标志蛋白SM22α的表达增加,细胞向收缩表型转化,伴随着MMP-9及pERK的表达下降(P<0.05)。结论 24-乙酰泽泻醇A能有效抑制VSMC表型转化和MMP-9的表达,其机制可能与抑制ERK1/2信号通路有关。 展开更多
关键词 24-乙酰泽泻醇A VSMC 表型转化 SM22α MMP-9 ERK1/2
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miR-106a和miR-24-1在结肠癌中的表达及意义 被引量:2
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作者 李秋娴 王晓华 +1 位作者 魏亚明 黄颖烽 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期303-306,共4页
目的检测结肠癌与癌旁组织miR-106a和miR-24-1的表达差异及其与c-myc的表达是否具有关联性。方法选临床病理诊断明确的结肠癌患者,手术后取癌组织标本提取RNA,RT-PCR检测原癌基因c-myc在结肠癌组织与癌旁组织中的表达。TaqMan荧光定量PC... 目的检测结肠癌与癌旁组织miR-106a和miR-24-1的表达差异及其与c-myc的表达是否具有关联性。方法选临床病理诊断明确的结肠癌患者,手术后取癌组织标本提取RNA,RT-PCR检测原癌基因c-myc在结肠癌组织与癌旁组织中的表达。TaqMan荧光定量PCR检测结肠癌与癌旁组织miR-106a和miR-24-1的表达差异。结果 c-myc表达阳性的癌组织表达miR-106a要明显高于癌旁组织,其差异具有统计学意义(P<0.05);c-myc表达阴性的癌组织表达miR-106a要高于癌旁组织(P<0.05),结肠癌组织与癌旁组织miR-24-1的表达无差异。结论结肠癌组织c-myc阳性组和c-myc阴性组表达miR-106a均高于癌旁组织,miR-106a有可能作为结肠癌的筛查目标之一;结肠癌组织c-myc阳性组和c-myc阴性组表达miR-24-1与癌旁组织无差异,还需更多研究证实其与结肠癌的关系。 展开更多
关键词 结肠癌 miR-24-1 miR-106a C-MYC
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长链非编码RNA钾离子电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录本1通过靶向miR-24-3p调控人牙周膜干细胞增殖和成骨分化 被引量:6
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作者 庞鸣 韦红霞 陈茜 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期547-554,共8页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)钾离子电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录本1(KC‐NQ1OT1)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖和成骨分化的影响及分子机制。方法分离培养正常牙周组织的hPDLSCs,矿化液诱导hPDLSCs成骨分化,研究下调lncRNA KCN... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)钾离子电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录本1(KC‐NQ1OT1)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖和成骨分化的影响及分子机制。方法分离培养正常牙周组织的hPDLSCs,矿化液诱导hPDLSCs成骨分化,研究下调lncRNA KCNQ1OT1、过表达miR-24-3p对hPDLSCs增殖、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、碱性磷酸酶(ALP)的影响。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNA KCNQ1OT1、miR-24-3p、OCN、OPN、ALP的表达水平;甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞增殖能力;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测lncRNA KCNQ1OT1和miR-24-3p的靶向关系。结果在hPDLSCs成骨诱导中,lncRNA KCNQ1OT1表达水平升高,miR-24-3p表达水平降低(P<0.05);下调lncRNA KCNQ1OT1表达,抑制细胞增殖,降低OCN、OPN和ALP的mRNA与蛋白表达水平(P<0.05)。lncRNA KCNQ1OT1靶向调控miR-24-3p,过表达miR-24-3p后,抑制细胞增殖,降低OCN、OPN和ALP的mRNA与蛋白表达水平(P<0.05)。抑制miR-24-3p可逆转下调lncRNA KCNQ1OT1对细胞增殖以及OCN、OPN和ALP的mRNA与蛋白表达水平的影响(P<0.05)。结论下调lncRNA KCNQ1OT1通过靶向上调miR-24-3p抑制hPDLSCs的增殖和成骨分化。 展开更多
关键词 钾离子电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录本1 miR-24-3p 人牙周膜干细胞 增殖 成骨分化
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转化植物甾醇产22-羟基-23,24-双降甾-1,4-二烯-3-酮(HPD)工程菌株的构建及发酵培养基优化
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作者 马治国 刘相岑 +4 位作者 袁辰阳 杜桂林 钮冰 张保国 史吉平 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第15期131-138,共8页
22-羟基-23,24-双降甾-1,4-二烯-3-酮(HPD)作为一种重要的甾体药物中间体,是合成很多皮脂类药物的原材料。通过在分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum DSM 1381)体内过表达3-甾酮-Δ^(1)脱氢酶(KstD)基因,Mycobacterium neoaurum DSM 1381... 22-羟基-23,24-双降甾-1,4-二烯-3-酮(HPD)作为一种重要的甾体药物中间体,是合成很多皮脂类药物的原材料。通过在分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum DSM 1381)体内过表达3-甾酮-Δ^(1)脱氢酶(KstD)基因,Mycobacterium neoaurum DSM 1381Z菌株发酵液中HPD的产量由71%提高到84%。在单因素选择的基础上,以产物HPD的产量作为衡量指标,利用响应面方法优化发酵培养基,建立各个因素之间变化的二次回归方程。结果表明,最合适的发酵培养基组成条件是玉米浆9 g/L、硝酸钠1.8 g/L、葡萄糖6 g/L、磷酸氢二钾2 g/L。此条件下5 g/L的植物甾醇,HPD的产量可达3.73 g/L,HPD的产量比原始菌株提高了大约2.7倍,具备潜在的工业化应用价值。 展开更多
关键词 22-羟基-23 24-双降甾-1 4-二烯-3- 3-甾酮-Δ^(1) 脱氢酶 菌株构建 发酵培养基 植物甾醇 微生物转化
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