人淋巴组织中ACTH-R及5-HT受体1A亚型表达

①目的 了解人淋巴组织中促肾上腺皮质激素受体 (ACTH R)及 5 羟色胺受体 1A亚型 (5 HT1A R)的表达情况 ,寻求神经免疫、内分泌网络之间功能双向调节的形态学依据。②方法 应用免疫组织化学SP及Pic TureTM法 ,检测ACTH R、5 HT1A R在 80例人体淋巴结、脾脏及肠道淋巴组织中的表达。③结果 ACTH R、5 HT1A R在淋巴组织中表达的总阳性率为 82 .5 %和 86 .3% ,二者在淋巴结、脾脏及肠道淋巴组织中表达差异无显著性 (χ2 =0 .5 80～ 1 .790 ,P >0 .0 5 )。④结论 ACTH R、5 HT1A R为神经免疫、内分泌网络共有的生物学语言媒介 ,内分泌源性的ACTH、神经源性的 5 HT与免疫源性的ACTH、5 HT都可以通过免疫细胞膜上的ACTH R、5 HT1A R发挥对免疫系统的调节作用。

6周递增跑台运动对大鼠肾上腺ACTH、GC受体和血清GC的影响

目的探讨6周递增跑台运动对大鼠血清GC和肾上腺ACTH、GC受体的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠128只,随机分成16组,分别是完全不训练组(A),共4小组,每小组8只;处死当天不训练组(B),共4小组,每小组8只;运动后即刻处死组(C),共4小组,每小组8只;运动后3 h处死组(D),共4组,每小组8只。A组在整个实验过程中不训练,B、C、D组进行6周递增负荷跑台运动。分别在第0、2、4、6周周末处死A、B、C、D组各一小组。取肾上腺和血液,用Real-time PCR测试各小组肾上腺ACTH-R mRNA和GR mRNA的表达,用ELISA法测试各小组血清中GC的含量。结果第0、2、4、6周末4组大鼠的肾上腺中ACTH-R mRNA在第0周、第2周末和第6周末的表达没有显著性差异(P﹥0.05),只是在第4周末B组和C组比A组和D组有显著性升高(P<0.05);各组GR mRNA在第0周和第2周末无显著性差异,第4周末和第6周末的C组和D组比其它两组有极显著性升高(P<0.001);各周末血清中GC含量都表现为C组和D组比其它两组有显著性升高(P<0.05)。结论 6周递增负荷运动过程中,肾上腺ATCH-R mRNA表达表现出时相性和饱和性,其表达并没有和ACTH阳性细胞的表达保持一致,二者具有不同步性,可能是ACTH在运输或在正、负反馈调节环节受到调控的结果。随着运动强度的增大,机体的中GR mRNA表达的含量降低,其表达趋势和GC分泌趋势相反,这应该是机体保持自身稳态的保护机制之一。

R-(α)-甲基组胺对AtT20垂体瘤细胞Pomc及其转录因子表达的影响

[目的]研究R-(α)-甲基组胺[R-(α)-MeHA]对AtT20垂体瘤细胞Pomc及其转录因子表达的影响。[方法]以小鼠垂体瘤细胞(AtT20)为实验对象,分别采用0.02~12.5μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞24h,通过MTT检测药物对细胞增殖的影响;采用0.1μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞30min、1、2、4、8、12h等相应时间,运用ELISA方法检测细胞分泌至培养液的促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,RT-q PCR方法检测相关基因mRNA表达,Western blot方法检测相关蛋白表达。[结果]0.02~12.5μmol/L的R-(α)-MeHA对AtT20细胞的增殖无抑制作用更无毒性作用。0.1μmol/L R-(α)-MeHA对AtT20细胞ACTH分泌功能无明显作用。与对照组比较,0.1μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞4h后,可增强阿片促黑素皮质素原(Pomc)基因表达、0.5μmol/L R-(α)-MeHA促进Pomc蛋白表达;此外0.1μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞30min^12h不同时点后Pou1f1基因表达均显著上调,其中以4h最为明显,上调达3倍(P<0.05);同样,0.1μmol/L R-(α)-MeHA作用4h也显著促进Egr1基因表达上调约2倍(P<0.05);作用1h显著增强了Prop1基因表达,上调近4倍(P<0.05);干预4h、8h均显著上调Foxl2基因表达,上调约3倍(P<0.05),对Neurod1、Pitx1和Tbx19基因表达无明显影响。[结论]R-(α)-MeHA具有促进Pomc基因以及其转录因子Pou1f1、Egr1、Prop1和Foxl2的表达作用。