沉默ACY-1基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的:初步探索氨基酰化酶1(ACY-1)与结直肠癌SW480细胞增殖、凋亡、侵袭的关系以及作用机制。方法:小干扰RNA(siRNA)技术沉默结直肠癌细胞中ACY-1基因的表达,转染至SW480细胞中,分为对照组、si-NC组、si-ACY-1组,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹试验(Western Blot)检测转染效果;用四甲基偶氮唑盐微量(MTT)实验检测干扰ACY-1基因表达对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Transwell法检测细胞的侵袭,Western Blot检测Ki-67、Caspase-3、β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的蛋白水平。结果:Western Blot检测结果显示si-ACY-1组细胞中ACY-1蛋白的表达量显著低于对照组(P<0.05)。干扰ACY-1表达显著抑制细胞的增殖(P<0.05)和Ki-67蛋白水平,促进其凋亡(P<0.05),增加Caspase-3蛋白水平,降低细胞的侵袭能力(P<0.05)。siACY-1组细胞中β-catenin、c-Myc、Cyclin D1的蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:沉默ACY-1抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭,诱导其凋亡,其作用与Wnt/β-catenin信号通路及其下游靶基因的激活有关,为结直肠癌的治疗提供新的治疗靶点。

ACY-1在儿童神经母细胞瘤组织和细胞中的表达及其意义

目的:探究氨基酰化酶-1(aminoacylase-1,ACY-1)在儿童神经母细胞瘤组织和细胞中的表达及其意义。方法:采用qRT-PCR和Western blot技术对儿童神经母细胞瘤患者的肿瘤组织和癌旁组织中ACY-1的表达进行检测。然后对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞株)进行体外细胞功能实验,运用重组腺病毒载体转染技术过表达或者抑制ACY-1的表达,采用CCK-8法、流式细胞术和Transwell法检测研究ACY-1对该肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:qRT-PCR和Western blot实验结果表明,儿童神经母细胞瘤组织中ACY-1的mRNA表达水平和蛋白表达水平均低于癌旁组织。ACY-1过表达不仅可抑制SH-SY5Y细胞株的增殖并诱导其凋亡,而且可抑制其迁移和侵袭;当ACY-1的表达受到抑制时,实验则显示出相反的趋势。结论:ACY-1可能与儿童神经母细胞瘤的发生发展密切相关,它可调节神经母细胞瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。

氨基酰化酶-1在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的探究氨基酰化酶-1(ACY-1)在肝细胞癌(肝癌,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织中的ACY-1 mRNA表达进行检测;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测肝癌和癌旁标本中ACY-1蛋白的表达,同时结合免疫组化的方法分析了ACY-1蛋白的表达与HCC的关系。结果 qRT-PCR和Western blot结果表明癌旁组织中ACY-1的mRNA和蛋白的表达高于肝癌组织。免疫组化结果与Western blot结果一致。另外,通过对ACY-1免疫组化结果与临床病理参数分析发现,ACY-1蛋白表达与AFP水平密切相关。结论 ACY-1可能与肝癌的发生发展密切相关。