新型胆碱酯酶抑制剂对AD大鼠空间记忆及海马结构胆碱能纤维的影响

目的探讨新型胆碱酯酶抑制剂(NAI)及水迷宫训练对AD大鼠海马结构胆碱能纤维的影响。方法用36只Wistar♂大鼠制作AD动物模型,随机分成3组:NAI组、石杉碱甲组(Hup组)、单纯损伤组(SO组)。水迷宫训练后,采用组织化学方法测定海马结构胆碱能纤维密度。结果①定位航行实验中,NAI组逃避潜伏期较SO组显著缩短(P<0.01)。②空间探索实验中,NAI组跨越各象限平台相应位置次数占总次数百分率较SO组明显增高(P<0.01)。③组化结果显示:NAI组海马结构胆碱能纤维密度较SO组明显增加(P<0.05)。尽管NAI组胆碱能纤维密度高于Hup组,但无统计学意义。结论经NAI治疗及水迷宫行为训练后的AD大鼠,海马结构内胆碱能纤维密度明显增加,提示NAI及水迷宫训练联合作用可促进AD大鼠海马结构胆碱能纤维重建。

远志皂苷对脑定位注射Aβ_(1-40)拟AD大鼠脑内神经形态病理学变化的影响

目的:建立阿尔茨海默病(AD)的大鼠模型,并观察远志皂苷对AD模型大鼠β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积及其神经细胞毒性的影响。方法:在大鼠右侧基底核区定向注射凝聚态Aβ1-40和鹅膏蕈氨酸建立AD模型,20只AD大鼠分为模型组和远志皂苷组,相同部位注射生理盐水作为假手术组。30天后,采用HE、N issl、透射电子显微镜和免疫组化染色等方法观察海马区神经细胞形态和基底核Aβ沉积变化。结果:脑内Aβ注射后,模型大鼠海马区神经元数目明显比假手术组减少,基底核M eynert细胞区可见棕黄色斑块沉积。电镜下可见神经元内脂褐质含量增加,线粒体等细胞器出现明显变性改变。结论:凝聚态Aβ1-40基底核定位注射具有明显的在体神经毒性作用,可较好地模拟AD病理表现,远志皂苷对Aβ引起的神经细胞凋亡有明显的保护作用。

针刺足三里、关元穴对AD大鼠海马区离子泵ATP酶及线粒体体密度的影响

目的:观察针刺对老年性痴呆(Alzheimer’sdisease,AD)大鼠海马区线粒体体密度及离子泵ATP酶的影响。方法:在D-半乳糖致衰基础上,再用β-淀粉样蛋白(β-amyloidprotein,Aβ)颅内注射制成AD大鼠模型,将健康Wister雄性大鼠随机分为空白组、假损伤组、模型组、针刺组、脑复康组。通过电镜观察及比色法,观察针刺对AD大鼠海马区线粒体体密度及离子泵ATP酶的影响。结果:针刺组AD大鼠的线粒体体密度与模型组相比有显著差异,Ca-ATP酶、Na、K-ATP酶的活力水平有明显提高。结论:针刺能改善AD大鼠线粒体损伤程度,提高离子泵ATP酶的活力。

基于内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路探讨白藜芦醇对AD大鼠脑神经细胞凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(RESV)基于内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-转录活化因子4(ATF4)-C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路对阿尔茨海默病(AD)大鼠脑神经细胞凋亡的影响。方法:健康大鼠海马区注射β淀粉样蛋白(Aβ1~40)建立AD模型,随机分为AD模型组、RESV低剂量组、RESV中剂量组、RESV高剂量组,RESV低、中、高剂量组大鼠分别腹腔注射10、20、40 mg/kg RESV,另设假手术组,每组10只,观察各组大鼠脑组织免疫组化情况、TUNEL染色情况、Caspase-3、GPR78、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达水平。结果:假手术组大鼠海马神经细胞基本无Aβ1~40阳性表达,与假手术组相比,AD模型组大鼠海马神经细胞Aβ1~40阳性表达细胞显著增多(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),大鼠脑组织中Caspase-3、GPR78、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与AD模型组相比,RESV低、中、高剂量组大鼠海马神经细胞Aβ1~40阳性表达细胞显著减少(P<0.05),凋亡率显著减少(P<0.05),Caspase-3、GPR78、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达水平不同程度降低(P<0.05)。结论:RESV可显著减少AD大鼠脑神经细胞Aβ1~40沉积,抑制海马神经细胞凋亡,调节凋亡关键蛋白Caspase-3表达,可能通过参与PERK-ATF4-CHOP信号通路介导的细胞凋亡抑制内质网应激,发挥脑神经细胞保护作用。

针刺对多因素AD大鼠脑组织内MAO、NO、NOS影响的研究

目的:探讨针刺对多因素AD大鼠脑组织内单胺氧化酶(MAO)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法:40只健康Wistar雄性大鼠随机分成4组:空白组、模型对照组、模型组和电针组。空白组予常规饮水和饲料;模型对照组予常规饮水和饲料,并胃饲及腹腔注射与模型组等容量的生理盐水;模型组AlCl3+东莨菪碱(SCOP)+D-半乳糖造模;电针组造模后给予针刺治疗。结果:治疗后电针组脑组织内MAO活性降低、NO含量升高、NOS活力升高,与模型组比较差异显著。结论:针刺能调节多因素AD大鼠脑组织内神经递质的代谢,对AD具有一定的治疗作用。

调神方对类AD大鼠胆碱能系统和NO含量的影响

目的 :观察调神方对类 AD大鼠胆碱能系统和 NO含量的影响。方法 :在 D-半乳糖皮下注射导致大鼠亚急性中毒而致早衰的基础上 ,再用兴奋性氨基酸受体激动剂喹啉酸 (QA)海马内注射 ,造成类 AD大鼠模型 ,采用 Y-电迷宫、放射免疫法和硝酸还原酶法分别检测大鼠的学习记忆、胆碱能系统和 NO。结果 :调神方能明显提高模型大鼠 Y-电迷宫正确次数 ,明显上调 Ch AT活性、 M-受体 Rt值和降低 NO含量。结论 :调神方可改善类

针刺对AD大鼠海巴区线粒体结构及离子泵ATP酶的影响

目的:观察针刺对AD大鼠海马区线粒体结构及离子泵ATP酶的影响。方法:采用D -半乳糖致衰基础上B -淀粉样蛋白颅内注射所致AD大鼠模型,将健康Wistar雄性大鼠随机分为空白组、假损伤组、模型组、针刺组、脑复康组。通过电镜观察及比色法,观察针刺对AD大鼠海马区线粒体结构及离子泵ATP酶的影响。结果:针刺组AD大鼠的线粒体密度与模型组相比有显著差异,Ca -ATP酶Na、K -ATP酶的活力水平有明显提高。结论:针刺能改善AD大鼠线粒体损伤程度,提高离子泵ATP酶的活力。

β-细辛醚对AD大鼠海马神经元蛋白质组图谱的影响

目的主要研究β-细辛醚对AD大树海马神经元蛋白质组图谱的影响。方法选取2019年1月~3月本地区实验动物中心培养的46只AD大鼠作为观察对象,随机将其分为研究组与对照组,分别实施β-细辛醚干预与常规干预,在提取两组大鼠的海马神经元组织蛋白之后,实施双向电泳处理,判断其中的神经元蛋白质组图谱变大情况。结果本文研究结果显示,观察组大鼠的P-GSK-3β蛋白水平、AKt蛋白水平以及P-AKt蛋白水平等明显区别于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论β-细辛醚对于神经元蛋白质表达的影响十分明显,因此可以促进对受损神经元的保护,这对于未来临床干预相关疾病具有重要的借鉴意义。

移植NEP基因转染的神经干细胞对AD大鼠行为学的影响

阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）病理过程的关键问题是患者脑中β-淀粉样多肽（Aβ）的异常增加和沉积。中性内肽酶（NEP）是脑内最重要的Aβ降解酶,是影响脑内Aβ分解代谢速率的限制因素。神经干细胞（neural stem cell,NSC）是具有向多种细胞系分化又具有自我更新能力的细胞。

调心方对Aβ所致AD大鼠“有害网络”作用的实验研究

目的 :观察调心方对Aβ所致“AD”模型大鼠氧化损伤、能量代谢受抑和钙稳态失衡等多因素构成的“有害网络”作用的影响。方法 :采用Aβ1 40片段左侧脑室注射法建立Aβ沉积型“AD“大鼠模型 ;Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力 ;Clark氧电极法观察线粒体呼吸链琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶和细胞色素氧化酶活性 ;Fura2 /AM 荧光法测定脑神经元胞浆内Ca2 + 含量 ;分光光度法检测脑组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性、过氧化脂质产物—丙二醛 (MDA)和活性氧类 (ROS)含量 ;电子显微镜观察脑皮层和海马线粒体超微结构 ;以及调心方对AD大鼠上述指标变化的影响。结果 :与正常组比较 ,AD模型大鼠上述各项指标呈现不同程度的异常变化 ,调心方具有明显的纠正作用。结论 :调心方可以通过纠正上述各项指标的异常变化 ,防治AD的发生与发展。

银杏内酯对OA诱导拟AD大鼠行为学和海马bcl-2表达的影响

目的研究银杏内酯对冈田酸(OA)诱导拟AD大鼠行为学和海马CA1区bcl-2表达的影响。方法大鼠海马CA1区多次微量注射OA,建立拟AD动物模型。部分模型动物同时用银杏内酯灌胃。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,免疫组化方法观察大鼠海马CA1区bcl-2表达。结果与拟AD模型组相比,银杏内酯组水迷宫定向航行试验平均潜伏期明显缩短(P<0.05或P<0.01);空间探索试验原站点象限活动时间明显延长(P<0.05),站台穿越次数明显增多(P<0.05)。大鼠海马CA1区bcl-2阳性表达明显增多(P<0.05)。结论促进海马CA1区bcl-2表达上调,从而减少神经细胞的凋亡是银杏内酯改善拟AD大鼠学习记忆的可能机制之一。

开心散对双侧海马CA1区注射Aβ_(1-42)致AD大鼠的治疗作用及机制研究

目的考察开心散对双侧海马CA1区注射Aβ_(1-42)致AD大鼠的治疗效果,初步明晰其作用机制。方法以“β-淀粉样蛋白毒性学说”为依据,使用脑立体定位仪在SD大鼠双侧海马CA1区注射Aβ_(1-42)寡聚肽段,从而复制AD大鼠模型。将痴呆大鼠随机分为模型组、石杉碱甲组、开心散低剂量组、中剂量组与高剂量组,每组10只。另取10只大鼠颅内注射等量的生理盐水为假手术组,正常大鼠10只作为空白对照组。连续灌胃给药30 d。通过Morris水迷宫行为学测试观测大鼠学习记忆成绩的变化;HE染色及Nissl染色观察脑组织病理形态;ELISA法检测脑组织中胆碱能神经递质(ACh、AChE、ChAT)、炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)及β-淀粉样蛋白(APP、Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42))的含量;IHC法解析皮层、海马组织中tau蛋白及GSK-3β的表达水平;Western blot法察看脑组织中BAX与BCL-2的表达程度。结果与模型组相比,开心散干预组大鼠逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数增多,在目标象限的停留时间及游泳路程所占百分比均有增加(P<0.05或P<0.01);皮层、海马组织神经元数量增多,形态结构趋于正常,且尼氏小体数量增加,胞浆着色变深;脑组织中AChE活性减弱,ChAT及ACh含量明显升高(P<0.05或P<0.01);TNF-α、IL-6、IL-1β、APP、Aβ_(1-40)及Aβ_(1-42)的含量显著下降(P<0.05或P<0.01);皮层、海马组织中tau蛋白及GSK-3β的阳性表达量皆有下调(P<0.05或P<0.01);BAX蛋白的表达水平趋于下降,且BCL-2/BAX的比值有不同程度的升高趋势(P>0.05)。结论开心散对AD损伤大鼠的痴呆症状与脑组织损伤有较好的治疗效果,其作用机制涉及到胆碱能系统的修复、炎症因子释放的抑制、β-淀粉样蛋白的清除及tau蛋白磷酸化水平的调控。

川芎嗪对AD大鼠氧化应激影响的初步研究

目的:探讨川芎嗪对AD大鼠氧化应激的影响。方法:用DCFH-DA(二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯)荧光包被探针法检测细胞内总ROS;邻苯三酚自氧化法检测大鼠血清及海马组织SOD活性;硫代巴比妥酸法检测大鼠血清及海马MDA含量。结果:与AD模型组相比,川芎嗪组大鼠海马细胞内总ROS含量降低(P<0.05)、血清SOD活性升高(P<0.05)和MDA含量降低(P<0.05)、海马细胞内SOD活性升高(P<0.05)和MDA含量降低(P<0.05)。结论:川芎嗪可提高AD模型大鼠的抗氧化能力,防止神经元细胞损伤。

6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对Aβ诱导的AD大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响

目的探究6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响。方法通过在大鼠双侧大脑的海马体注射Aβ构建AD大鼠模型。大鼠被随机分为6组:对照组、模型组、低剂量6-姜酚组(50 mg/kg)、中剂量6-姜酚组(75 mg/kg)、高剂量6-姜酚组(100 mg/kg)和阳性对照组(盐酸多尼哌齐0.9 mg/kg)。通过神经损伤评分评估大鼠神经损伤程度,干/湿法检测脑含水量,HE染色检测海马体组织学损伤程度。流式细胞术和TUNEL染色检测海马体细胞凋亡。ELISA检测iNOS、IL-6、TNF-α、SOD、GSH-Px和MDA的蛋白水平。其中qRT-PCR和Western blot检测Wnt和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量。结果与模型组相比,在6-姜酚治疗后,神经损伤评分降低,脑含水量减少,细胞凋亡率降低,促炎细胞因子iNOS、IL-6和TNF-α的表达量下调,SOD和GSH-Px的蛋白含量上调,而MDA蛋白含量下调。Wnt和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量均上调。结论6-姜酚通过激活Wnt/β-catenin信号通路缓解AD大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症。

NRTN与GDNF联合神经干细胞移植对AD大鼠CREB和TrkB表达的影响

神经干细胞因可分化为各类神经细胞,为临床很多疾病提供了一个崭新的研究视野[1]。阿尔茨海默病患者脑内神经病理改变的主要原因之一是淀粉样β蛋白使神经干细胞诱导分化为胆碱能神经元的过程受到抑制而不能实现结构修复。

梓醇对AD大鼠血清TRH和GnRH含量的影响

目的。观察梓醇对AD大鼠血清促甲状腺激素释放激素（TRH）和促性腺激素释放激素（GnRH）含量的影响。方法选用健康雄性。Wistar大鼠，体重250-300g,侧脑室定位注射Aβ25-35和腹腔注射D-gal结合制备AD模型，随机分为：模型对照组、梓醇小剂量组（5mg/kg）、梓醇大剂量组（10mg/Kg）和假手术对照组，每组8只。于造模后第7天和第14天取大鼠血清，ELISA法检测血清中TRH和GnRH含量。结果造模后大鼠血清TRH和GnRH．水平均低于正常（P〈0．01），给予梓醇大、小剂量腹腔注射后，大鼠的血清TRH和GnRH水平有明显改善（P〈0．05或P〈0．01）。结论梓醇可升高AD大鼠血清降低的TRH和GnRH水平。

山茱萸多糖对AD大鼠c-fos和早老素1表达的影响

目的探讨阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马区Tau蛋白磷酸化、早老素(PS)1和c-fos的mRNA表达水平、乙酰胆碱酯酶(Ach E)的变化以及山茱萸多糖对其影响。方法 Wistar大鼠75只,分为青年组、假手术组、AD模型组、阳性对照组、山茱萸多糖组和水煎剂组,采用D-半乳糖与Aβ联合注射制作AD模型,选用多奈哌齐为阳性对照药物,采用经胃灌服法给予多奈哌齐、山茱萸多糖和水煎剂;Morris水迷宫法检测学习记忆能力;考马斯亮蓝法检测蛋白质含量;比色分析法测定Ach E活性;免疫组化法检测Tau蛋白磷酸化水平;RT-PCR法检测c-fos和PS1 mRNA的表达。结果与青年组和大鼠手术前比较,造模后大鼠学习记忆能力显著低于青年组(P<0.01)和手术前(P<0.01);山茱萸多糖和水煎剂显著提高AD模型大鼠学习记忆能力(P<0.01),且与阳性对照组无明显差别(P>0.05);与青年组比较,假手术组、Aβ对照组、阳性对照组、多糖组和水煎剂组大鼠海马组织中Ach E活性明显增加(P<0.05或P<0.01);与Aβ对照组比较,阳性对照组、多糖组和水煎剂组Ach E活性明显降低(P<0.01或P<0.05),其中多糖组未达到阳性对照组水平(P<0.05),但多糖组与水煎剂组之间差异不显著(P>0.05);与青年组和假手术组比较,Aβ对照组大鼠海马区P-tau蛋白水平显著增加(P<0.05);与Aβ对照组比较,阳性对照组、多糖组和水煎剂组P-Tau水平明显降低(P<0.05);与青年组和假手术组比较,Aβ对照组c-fos mRNA表达水平明显降低(P<0.01),而PS1表达则明显增加(P<0.01);山茱萸多糖和水煎剂可明显提高AD模型大鼠cfos表达水平,降低PS1的表达。结论 D-半乳糖与Aβ注射联合应用,可提高Tau蛋白磷酸化水平、降低c-fos的表达,提高Ach E活性和PS1的表达;山茱萸多糖和山茱萸水煎剂均可降低Tau磷酸化水平、提高AD模型大鼠学习记忆能力,其作用与多奈哌齐比较无明显差异;山茱萸多糖及水煎剂可降低AD模型大鼠海马PS1表达和Tau蛋白磷酸化水平,上调c-fos表达;山茱萸多糖是山茱萸能够改善AD模型大鼠学习记忆的一种有效成分。