Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内毛细血管的体视学研究

目的定量研究Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内毛细血管的改变。方法随机选取10月龄雄性Tg2576小鼠和同窝生相同月龄雄性野生型小鼠(Wild-type)各11只。应用Morris水迷宫检测其空间学习和记忆能力。行为学测试后在每组小鼠内各随机选取7只,应用冰冻切片技术、免疫组织化学技术及体视学方法定量研究大脑白质体积以及白质内毛细血管的总长度、总体积和总表面积。结果 10月龄Tg2576转基因AD小鼠的定位航行测试显示其逃避潜伏期显著长于同月龄野生型小鼠(P<0.05),而空间探索试验结果无显著差异。10月龄Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内毛细血管的总长度、总体积和总表面积(6.90±0.82m,0.0648±0.0167mm3,61.77±13.80mm2)均较同月龄野生型小鼠(12.44±2.64m,0.0891±0.0145mm3,106.81±20.17mm2)显著降低(P<0.01,P<005,P<0.01),而两组小鼠的大脑白质体积无显著性差异。结论出现行为学改变的10月龄Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内存在显著性毛细血管改变,这可能是造成白质损伤和早期学习记忆能力减退的重要原因,而白质内毛细血管可能作为早期预防和治疗AD的靶点。

跑步锻炼减少中老年APP/PS1双转基因AD小鼠海马齿状回内树突棘丢失

目的:运用现代体视学方法定量研究跑步锻炼对APP/PS1双转基因模型小鼠海马齿状回树突棘的作用。方法:12月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠随机分为跑步组和阳性对照组,同窝生野生型小鼠作为阴性对照组,每组各15只。跑步组小鼠进行4个月的跑步锻炼。运用Morris水迷宫方法测试3组小鼠的空间学习记忆能力,现代体视学方法定量研究3组小鼠海马齿状回树突棘密度和总数。结果:定位航行实验中跑步组小鼠逃避潜伏期[(25.0±2.5)s]明显短于阳性对照组小鼠[(35.4±2.5)s](P=0.016)。空间探索试验中跑步组小鼠穿台次数、目标象限游泳时间、目标象限游泳距离百分比[(3.2±1.9)次、(21.5±7.6)s、(0.31±0.12)%]明显多于阳性对照组小鼠[(1.3±0.9)次、(14.0±8.2)s、(0.23±0.14)%](P=0.01,P=0.029,P=0.019);跑步组小鼠海马齿状回内树突棘密度、总数[(0.431 9±0.044 8)/μm3、(4.546 6±1.081 4)×108]明显高于阳性对照组[(0.285 6±0.013 3)/μm3、(2.667 9±0.643 5)×108](P<0.001,P=0.043)。结论:跑步锻炼对AD小鼠海马齿状回树突棘的作用可能是跑步锻炼改善AD小鼠空间学习能力的重要结构基础之一。

大豆异黄酮活性组分对AD小鼠脑海马神经元及血脂水平血清SOD活力的影响

目的:探讨大豆异黄酮活性组分对阿尔茨海默病(AD)小鼠脑海马神经元及血脂水平血清过氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。方法:取10个月龄的小鼠,以D-半乳糖和三氯化铝建立AD模型小鼠,用不同剂量的大豆异黄酮活性组分灌胃治疗15 d,眼球取血测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)水平及SOD活力;观察脑内海马组织切片神经元细胞的形态改变。结果:与模型对照组相比治疗组血清TC、TG含量显著降低(P<0.01)、血清HDL-c含量显著升高(P<0.01)、SOD活力显著提高(P<0.01),显剂量效应关系;海马区神经元细胞数量也显著增多,形态改善。结论:大豆异黄酮活性组分能有效调节AD小鼠的血脂的水平,显著提高血清SOD的活性。

石杉碱甲对AD小鼠学习记忆能力的改善

目的进一步验证石杉碱甲对学习记忆能力的改善.方法用D-半乳糖和亚硝酸钠建立的小鼠模型,通过跳台实验来检验小鼠的学习记忆能力的变化.结果模型组与空白组相比学习记忆能力显著降低,而用药组与模型组相比,学习记忆能力大大恢复.

不同月龄APP/PS1双转基因AD小鼠海马神经元线粒体的动态变化

目的:检测不同月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠海马神经元中线粒体自噬的动态变化,并探讨其意义。方法:选取20只雄性APP/PS1双转基因AD小鼠为研究对象,分为3月龄组、6月龄组、9月龄组和12月龄组,以C57小鼠为对照组。获取海马组织,通过电镜观察海马区神经元中线粒体的形态变化,用Western blot检测自噬相关蛋白LC3和P62的表达水平;线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin和Miro1的表达水平;线粒体外膜蛋白Tom20的表达水平。结果:电镜观察结果显示:随着月龄增大,APP/PS1双转基因AD小鼠海马区神经元中线粒体损伤的病理变化呈逐渐加重的过程,即线粒体明显水肿、透明,嵴排列不规则,断裂,甚至消失。Western blot结果显示,与野生小鼠组比较,LC3、P62、PINK1和Parkin蛋白表达水平在6月龄组、9月龄组和12月龄组小鼠中明显增高(P<0.05),而Miro1蛋白却明显降低(P<0.05),Tom20的表达水平无明显差异(P>0.05)。结论:随着APP/PS1双转基因AD小鼠月龄的增加,其海马区神经元线粒体病理改变呈动态,线粒体自噬呈动态增强但伴随线粒体清除障碍。

琐琐葡萄黄酮对APP/PS-1双转基因AD小鼠的作用研究

目的 探讨琐琐葡萄黄酮(flavones from Vitis vinifera L.,VTF)对APP/PS-1双转基因AD小鼠神经保护作用研究。方法 选用6月龄雄性APP/PS-1双转基因AD小鼠75只,随机分为模型组、阳性对照组(多奈哌齐组,0.7mg/kg)和琐琐葡萄总黄酮(VTF)低、中、高剂量组(70、210、420mg/kg),另取15只同龄雄性C57BL/6小鼠为空白对照组,模型组和空白对照组给予等量0.5%CMC-Na灌胃,8周后采用Morris水迷宫观察小鼠空间认知能力,应用HE染色和免疫组化学染色(IHC)观察小鼠海马CA1区神经元细胞形态以及APP和Aβ_(1~42)蛋白表达情况。结果 与空白对照组比较,模型组小鼠逃逸潜伏期显著延长(P<0.01),有效区域进入次数显著减少(P<0.01);与模型组比较,VTF各剂量组逃逸潜伏期显著缩短(P<0.05),VTF低和中剂量有效区域进入次数显著增多(P<0.05)。镜下观察结果显示,与空白对照组比较,模型组存在大量呈凋亡趋势的神经元细胞,排列不规则,胞质萎缩出现间隙,CA1区APP和Aβ_(1~42)蛋白表达量增加;阳性对照组及VTF各剂量组海马神经元大多数较正常,排列较规整紧密,核仁清晰,核固缩浓染减轻,APP和Aβ_(1~42)蛋白表达量减少。结论 VTF可改善APP/PS-1双转基因AD小鼠学习记忆能力,对小鼠大脑神经元细胞有良好的保护作用,可减少APP和Aβ_(1~42)在小鼠脑内的过表达,对APP/PS-1双转基因AD小鼠具有较好的防治作用。

阿尔茨海默病5XFAD小鼠模型尿液中外泌体microRNA的表达谱分析

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种难治且不可逆的神经退行性疾病,发病机制尚不明确。因此,在淀粉样蛋白-β斑块(Aβ斑块)沉积之前识别候选生物标志物对于早期干预AD具有重要意义。中国医学科学院医学实验动物研究所病理平台课题组的研究人员,通过测定早期AD小鼠模型尿液外泌体中microRNA(miRNA),寻找可以早期诊断AD的标志物。

陈皮提取物对APP/PS-1双转基因阿尔茨海默病小鼠学习记忆功能的影响

目的探讨陈皮提取物对APP/PS-1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆功能的影响.方法选用APP/PS-1双转基因AD小鼠16只,随机分为模型对照组和供试品组,8只/组,另取8只C57小鼠为正常对照组,正常对照组和模型对照组分别灌胃等量的生理盐水,供试品组灌胃陈皮提取物的生理盐水溶解液,灌胃体积为10mL/kg,1次/d,连续18d.第11天到第16天,进行Morris水迷宫的定位航行实验及空间探索实验.第17天到第18天,进行5min避暗实验.结果在Morris水迷宫实验中,与正常对照组比较,模型对照组定位航行第2天、第3天、第5天的潜伏期增加(P<0.05);与模型对照组比较,供试品组第5天的潜伏期降低(P<0.05).空间探索阶段,各组的目标象限路程百分比、时间百分比及站台穿越次数差异无统计学意义(P>0.05).在避暗实验中各组的错误潜伏期、错误次数及错误率差异均无统计学意义(P>0.05).结论陈皮提取物对APP/PS-1双转基因AD小鼠的空间学习、记忆能力有一定的改善作用.

齐墩果酸对APP/PS-1双转基因AD小鼠的神经保护作用研究

目的:研究齐墩果酸(Oleanolic Acid,OA)对APP/PS-1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠模型神经保护作用及机制。方法:选取6月龄APP/PS-1雄性小鼠21只,随机分为模型组(0.5%CMC-Na)、阳性组(多奈哌齐组,0.7 mg·kg^(-1))、齐墩果酸组(10 mg·kg^(-1))每组7只,6月龄同背景SPF级C57BL/6小鼠7只为对照组。灌胃8周之后通过Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力的改变,HE染色观察神经元细胞形态,ELISA检测血清中Aβ_(1-42)含量;免疫组化检测Aβ_(1-42)、APP、Iba1蛋白表达情况;Western blot检测APP、Iba1蛋白表达水平。结果:(1)对照组,模型组,阳性组及齐墩果酸组进入有效区域次数分别为7.00±2.09,1.00±0.89,3.67±1.97,4.33±2.50,与模型组相比,对照组,阳性组,齐墩果酸组均有统计学意义(P<0.05);(2)血清Aβ_(1-42)含量按上述顺序依次为4.98±0.25,2.50±0.66,4.63±0.73,4.36±0.97,与模型组相比,对照组,阳性组,齐墩果酸组均有统计学意义(P<0.05);(3)免疫组化结果显示与模型组相比,对照组,阳性组,齐墩果酸组Aβ_(1-42)、APP、Iba1蛋白阳性细胞数减少;(4)WB结果:对照组,模型组,阳性组,齐墩果酸组APP蛋白相对表达量分别为0.52±0.17,1.38±0.35,0.89±0.25,0.93±0.27;这四组的IBA1蛋白相对表达量分别为0.98±0.34,1.79±0.74,1.06±0.61,0.88±0.49,与模型组相比,野生对照组,阳性组,齐墩果酸组APP、IBA1蛋白相对含量有统计学意义(P<0.05)。结论:齐墩果酸组可以改善APP/PS-1模型小鼠记忆力及认知功能,降低海马神经元的损伤,并通过下调Aβ_(1-42)、APP、Iba1蛋白的表达水平来发挥保护神经作用。

远志皂苷对AD小鼠学习记忆能力及中枢胆碱能系统标志酶活性的影响

目的:建立能模拟人类Alzheimer病(AD)的小鼠病理模型,并观察远志皂苷对AD小鼠学习记忆及胆碱能系统标志酶活性的影响。方法:小鼠单侧海马区注射凝聚态Aβ1-40制备AD小鼠模型,运用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力,采用生化法检测各组小鼠脑组织匀浆中AchE活性变化,采用HE染色观察小鼠脑组织的病理变化,采用免疫组织化学方法观察小鼠脑组织ChAT表达的变化。结果:与模型组相比,中、高剂量(74 mg/kg、148 mg/kg)远志皂苷干预治疗组小鼠逃逸潜伏期明显缩短,穿越平台次数明显增多,海马、皮层神经细胞凋亡减少,同时脑内AchE活性降低,ChAT阳性表达增加。结论:远志皂苷能改善AD小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与保护中枢胆碱能系统功能有关。

怡心健脑颗粒对D-半乳糖合β-AP_(25-35)诱导AD小鼠的药效研究

目的观察怡心健脑颗粒对老年痴呆症(AD)小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响。方法运用D-半乳糖合β-AP25-35诱导小鼠AD模型,水迷宫法观察怡心健脑颗粒对AD小鼠学习记忆成绩的影响,并测定小鼠血清、肝脏与脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)的含量。结果与对照组比较,模型组AD小鼠的学习记忆成绩明显下降,其血清、肝脏及脑组织中MDA含量明显升高,SOD、GSH、GSH-Px含量明显下降;与模型组比较给药组AD小鼠的学习记忆成绩明显提高,血清、肝脏及脑组织中SOD、GSH、GSH-Px含量明显升高,MDA含量降低。结论怡心健脑颗粒对D-半乳糖合β-AP25-35诱导的AD小鼠具有健脑益智药理作用,并能提高其抗氧化能力。

脑尔康对AD模型小鼠脑内NMDA受体亚单位NR2B表达的影响

目的 :观察复方中药脑尔康对慢性铝中毒AD (Alzheimer’sdisease)模型小鼠学习记忆及脑内NMDA受体亚单位NR2B蛋白表达的影响。方法 :采用跳台法检测AD模型小鼠学习记忆成绩 ,用免疫组织化学方法观察脑尔康对AD模型小鼠脑皮层及海马结构区域NM DA受体亚单位NR2B蛋白表达的影响。结果 :模型组与空白组比较 ,学习记忆成绩明显下降 (P <0 0 1 ) ;各用药组分别与模型组比较 ,学习记忆成绩明显提高 (P <0 0 1 ) ;中药组比脑复康组改善效果更好 ;模型组与空白组比较 ,皮层和海马内NR2B的表达明显减少 (P<0 0 1 ) ,各用药组小鼠脑内NR2B的表达均不同程度增加 (P <0 0 5或P <0 0 1 ) ;中药组与脑复康组比较 ,NR2B的表达增加更明显 (P <0 0 1 )。结论

连翘酯苷对拟AD复合动物模型小鼠学习记忆的改善作用及其机制研究

目的以β淀粉样蛋白损伤自然衰老小鼠建立一种新的复合式老年痴呆(AD)小鼠模型,观察连翘酯苷对复合模型学习记忆障碍的改善作用,并对其机制进行初步探讨。方法采用14月龄C57BL/6小鼠侧脑室注射Aβ25-35形成拟AD复合模型;Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力,实验结束取小鼠脑组织用放射免疫分析法检测TNF-α及IL-1的含量;Western blot方法检测GFAP蛋白表达,化学比色法测定ChAT、AchE、SOD酶活性及MDA的含量。结果水迷宫实验中连翘酯苷组可显著改善小鼠的学习记忆能力(P<0.05)。作用机制研究发现:连翘酯苷能降低TNF-α、IL-1的含量(P<0.05),抑制GFAP蛋白表达。提高ChAT、SOD酶活力,降低AchE活性及MDA的含量(P<0.05,P<0.01)。结论连翘酯苷对拟AD复合动物模型学习记忆的改善作用可能与抑制脑内炎症反应,调节胆碱能系统,抗氧化作用等有关。

川芎嗪对AD模型小鼠脑内APP和NEP表达的影响

目的:探讨川芎嗪(TMP)对AD模型小鼠学习记忆及脑内β淀粉样前体蛋白(APP)和脑啡肽酶(NEP)表达的影响。方法:腹腔注射D-半乳糖和灌胃三氯化铝制备AD模型小鼠。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力;免疫组化法检测脑内APP和NEP蛋白的表达。结果:低、高剂量TMP组均能改善AD小鼠的学习记忆能力(P<0.01),下调小鼠海马APP蛋白表达(P<0.01),上调NEP蛋白的表达(P<0.01)。低、高剂量TMP组相比无明显差异。结论:TMP可改善AD小鼠学习记忆能力,可能与降低APP及增加NEP蛋白表达有关。

左旋丁基苯酞改善AD转基因小鼠学习记忆缺失

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD），是一种与年龄相关的不可逆的神经退行性疾病，是老年人中引起痴呆最常见的一种疾病。临床上以记忆力减退、认知功能障碍为特征，病情呈进行性加重。左旋丁基苯酞（1-3-n-butylphathlide，L—NBP）是药物研究所从芹菜籽中分离得到的单体化合物，在脑缺血、血管性痴呆和Aβ侧脑室灌流的动物模型上已经证实有良好的神经保护作用。在本研究中，我们采用三转基因小鼠模型（3xTg．AD）来考察L．NBP对小鼠学习记忆缺失的改善作用。10．7月龄的3xTg．AD小鼠分别口服L-NBP15mg／kg和对照溶剂植物油。18周后，进行Morris水迷宫实验，之后小鼠被处死，留取脑组织进行生化和病理实验。

琐琐葡萄黄酮对APP/PS-1小鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的 探讨琐琐葡萄总黄酮(flavones from vitis vinifera L.,VTF)对APP/PS-1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)小鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法 选用6月龄雄性APP/PS-1双转基因AD小鼠75只,随机分为模型组,阳性对照组(多奈哌齐组,0.7mg/kg),VTF低、中、高剂量组(70、210、420mg/kg),另取15只同龄雄性C57BL/6小鼠作为空白对照组,模型组和空白对照组给予等量0.5%CMC-Na灌胃。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测小鼠血清中Aβ1~42含量;免疫组织化学(immunohistodiemistiy, IHC)观察小鼠海马CA1区caspase-3蛋白表达情况;原位末端标记(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay, TUNEL)法检测小鼠海马神经细胞凋亡情况。结果 ELISA检测结果显示,与模型组比较,阳性对照组和VTF各剂量组小鼠血清中Aβ1~42含量显著升高(P<0.05)。IHC实验结果显示,模型组小鼠海马CA1区caspase-3蛋白表达与空白对照组比较,阳性细胞着色深(P<0.05),VTF各剂量组小鼠较模型组海马caspase-3蛋白阳性表达均有所减少(P<0.05)。TUNEL法检测结果显示,与模型组比较,阳性对照组及VTF各剂量组小鼠海马神经元细胞大多较正常,其凋亡率与模型组比较显著下降(P<0.05)。结论 VTF可以通过下调caspase-3蛋白的表达从而减少APP/PS-1双转基因AD小鼠海马神经元的凋亡,对APP/PS-1双转基因AD小鼠具有较好的防治作用。

琐琐葡萄黄酮对APP/PS-1双转基因阿尔茨海默病小鼠神经炎症的保护作用

目的研究琐琐葡萄黄酮(VTF)对APP/PS-1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠神经炎症保护作用的机制。方法选取6月龄APP/PS-1双转基因雄性小鼠75只,随机分为模型组(0.5%CMC-Na)、阳性组(多奈哌齐0.7 mg/kg体重)、VTF低剂量组(VTF 70 mg/kg体重)、VTF中剂量组(VTF 210 mg/kg体重)、VTF高剂量组(VTF 420 mg/kg体重),每组15只;另选取6月龄同背景SPF级C57BL/6小鼠15只为对照组(0.5%CMC-Na)。灌胃8周后,免疫组织化学检测IBA1蛋白表达;Western blotting检测APP、IBA1蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑组织的白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果对照组、阳性组及VTF各剂量组IBA1蛋白阳性表达率较模型组低(P<0.05);对照组、阳性组及VTF各剂量组APP、IBA1蛋白相对表达量较模型组低(P<0.05);对照组、阳性组及VTF各剂量组IL-1β、IL-6、TNF-α含量较模型组减少(P<0.05)。结论VTF可以减少APP/PS-1双转基因AD小鼠神经炎症的发生,并通过下调APP、IBA1蛋白的表达发挥神经保护作用。

左旋丁基苯酞改善APP／PS1-AD转基因小鼠学习记忆缺失及tau蛋白磷酸化

阿尔茨海默病（Alzheimer’Sdisease，AD），是一种与年龄相关的不可逆的神经退行性疾病，是老年人中引起痴呆最常见的一种疾病。临床上以记忆力减退、认知功能障碍为特征，病情呈进行性加重。左旋丁基苯酞（1-3-n-butylphathlide，L-NBP）是药物研究所从芹菜籽中分离得到的单体化合物，在脑缺血、血管性痴呆和Aβ侧脑室灌流的动物模型上已经证实有良好的神经保护作用。在本研究中。

早期APP/PS1转基因AD模型小鼠海马胆碱能神经元改变的体视学研究

目的应用体视学方法定量研究APP/PS1双转基因AD模型小鼠海马内胆碱能神经元的早期改变情况。方法 Morris水迷宫检测10月龄雌性APP/PS1双转基因AD小鼠(APP/PS1组)和同月龄同窝生雌性野生型小鼠(Wild-type组)的空间学习记忆能力。运用现代体视学方法结合免疫组织化学方法精确定量小鼠海马各亚区的体积和胆碱能神经元的数量。结果 APP/PS1组小鼠定位航行实验中逃避潜伏期长于Wild-type组(P<0.01)。空间探索实验中,APP/PS1组小鼠穿越平台的次数及平台所在象限时间百分比均少于Wild-type组(P=0.007、0.041)。APP/PS1组小鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)的体积较Wild-type组缩小(P=0.001),而APP/PS1组小鼠海马CA1、CA2/3区的体积较Wild-type组差异无统计学意义(P=0.089、0.059)。APP/PS1组小鼠海马DG内胆碱能神经元的数量较Wild-type组显著减少(P=0.017),APP/PS1组小鼠海马CA1区、CA2/3区内胆碱能神经元较Wild-type组差异均无统计学意义(P=0.076、0.074)。结论早期APP/PS1双转基因AD小鼠海马DG内胆碱能神经元丢失,可能是AD早期出现空间学习记忆能力障碍的重要结构基础之一。

大豆异黄酮活性组分对阿尔茨海默病小鼠抗氧化作用的研究

目的:探讨大豆异黄酮活性组分对阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)小鼠的抗氧化作用。方法:取10月龄的小鼠,以D-半乳糖和三氯化铝复制AD模型小鼠,用本实验室制备的大豆异黄酮活性组分灌胃15d后,眼球取血,测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的含量,观察脑内海马组织切片神经元细胞的形态改变。结果:与模型组小鼠相比,实验组小鼠血清SOD活力显著提高(P<0.01)、血清LDH含量显著升高(P<0.05)、血清MDA含量明显降低(P<0.01),海马区神经元细胞数量也显著增多,形态改善。结论:异黄酮活性组分能有效地改善衰老AD小鼠的抗氧化系统的功能。