调心方对氧化损伤型类AD模型大鼠“有害网络”作用的研究

研究调心方 (主药 :党参、桂枝、茯苓、菖蒲、远志 )防治阿尔茨海默病 (AD)的作用机理。SD雄性大鼠采用二羟延胡索酸 (DHF) +FeCl3+ADP左侧脑室注射法建立氧化损伤型类AD模型。造模前 1周开始以调心方灌胃 ,连续 4周 ,并与西药Donepezil比较。治疗期间及之后 ,观察大鼠空间学习记忆能力、大脑皮质细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基 (COⅡ )mRNA表达、大脑皮质和海马APPmRNA表达、大脑皮质Aβ沉积及脑组织Ca2 + 含量等指标的变化。结果 :与正常组比较 ,氧化损伤型类AD模型大鼠上述各项指标呈现不同程度的异常变化 ,调心方具有明显的纠正作用 ,且效果优于西药。结论 :调心方可以阻断AD鼠的“有害网络”的形成 。

临床医用1.5T磁共振对AD模型大鼠的颅脑MR成像研究

目的使用临床医用1.5TMR成像仪对阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)大鼠模型的颅脑行MR成像研究。材料和方法随机选择健康雌性SD大鼠10只(7-8周),通过多影响因素建立SD大鼠的AD模型,然后使用临床医用1.5TMR成像仪对AD模型大鼠进行T1WI、T2WI、T2*WI、SWI成像。结果 AD模型大鼠大脑的颞顶叶皮质、腹侧海马下皮质区和海马区可以发现一些散在的类圆形的低信号区,并与脑实质Aβ免疫组化、Thioflavine S及铁染色阳性结果相重叠。结论在未有超高场小动物专用磁共振成像仪的情况下,临床医用磁共振对AD模型大鼠颅脑MR成像的研究是可行的。

葛根异黄酮对AD模型大鼠抗衰老作用研究

目的研究葛根异黄酮对D-半乳糖致衰老大鼠的抗衰老作用。方法 wistar大鼠68只,随机分为对照组、模型组、药物组低、高剂量组,每组17只。造模成功后,第二天开始灌胃给药,药物低、高剂量组每天分别给予40 mg/kg、160 mg/kg葛根异黄酮灌胃,模型组、对照组每天给予80 mg/kg生理盐水灌胃,连续8周后取血液,并将大鼠断头处死后取肝脏及脑组织,制作海马10%组织匀浆,分别检测丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、单胺氧化酶(MAO)水平的变化情况。结果模型组大鼠血液、肝脏、海马中SOD、GSH-Px的活性明显降低,MDA的含量明显增加,与对照组相比有明显差异(P<0.01);与模型组相比,药物低、高剂量组大鼠,除MAO外各项指标明显好转(P<0.05),且高剂量组比低剂量组的作用更明显(P<0.01);血液、肝脏组织中MAO的活力用药后,低、高剂量组均未见显著性改变,而在海马组织中有显著性降低(P<0.05)。结论葛根异黄酮能增加血液和肝脏中SOD、GSH-Px活力,降低血液、肝脏和脑组织中MDA的含量,具有一定的抗衰老作用。

钩藤散对AD模型大鼠海马CA1区相关指标的影响

目的:观察钩藤散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马CA1区相关指标的影响。方法:用β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)海马注射建立AD大鼠模型,然后分成钩藤散高、中、低剂量、模型、正常对照5个组,钩藤散分别用5,2.5,1.25 g.kg-1ig AD大鼠,每天1次,连续给药15 d,14 d时迷宫法测定其行为学指标,未次给药后1 h将动物麻醉、心脏灌注、取脑、制作海马CA1区病理切片,用免疫组化法测定神经细胞数,Aβ,突触后密度蛋白-95(PSD-95)阳性细胞数和平均吸光度(A)。结果:行为学测试成绩:对照组、各给药组均好于模型组(P<0.01),说明模型制作成功并提示钩藤散有益智作用;CA1区的神经细胞数、PSD-95阳性细胞数和平均A:各给药组均高于模型组(P<0.001);Aβ阳性细胞数和平均A:各给药组均低于模型组(P<0.01),说明钩藤散能有效降低脑组织Aβ含量、提高PSD-95水平,保护神经细胞。结论:钩藤散对AD模型大鼠海马组织有一定保护作用。

葛根素在正常和β-淀粉样蛋白所致痴呆模型大鼠体内药代动力学比较

目的:探讨葛根素在正常和β-淀粉样蛋白所致痴呆模型大鼠(AD模型大鼠)体内的动力学过程。方法:AD模型组大鼠基底核定位注射A,β7天后灌胃500mg/kg葛根素注射液,正常组灌胃等剂量葛根素注射液。采用反相高效液相色谱法测定给药后不同时间点血浆样品中葛根素的药物浓度,3P87软件拟合药动学参数。结果:葛根素口服给药在正常和AD大鼠体内的药动学过程均为开放性一室模型。AD大鼠的半衰期(t1/2,m in)、药时曲线下面积(AUC,μg.m in-1.mL-1)、平均驻留时间(MRT,m in)、表观分布容积(Vd/F,L)分别为19.2、301.5、42.8、45.8;相对应的正常大鼠则为40.8、453.0、56.9、65.1。结论:葛根素在AD大鼠体内消除更快,半衰期与平均驻留时间缩短;从血浆中向其他组织的分布速率减慢。提示葛根素在AD病理状态下代谢、排泄速度更快。同时,葛根素在AD病理状态下更多地积蓄在血浆中。

调心方有效部位TX0201对Aβ25-35所致类“AD”大鼠氧化损伤及能量代谢的影响

目的研究调心方有效部位TX0201对杏仁核注射Aβ2535所致类AD模型大鼠氧化损伤及能量代谢的影响。方法通过杏仁核双侧注射Aβ2535片段造成类AD大鼠模型;采用分光光度法检测大脑皮层超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性、活性氧(ROS)的含量以及丙二醛(MDA)含量;原位杂交法检测皮层及海马细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基(COⅡ)mRNA的表达。结果AD模型大鼠脑组织SOD、GSHPX活力明显下降,MDA及ROS含量显著上升,同时COIImRNA的表达也明显降低;治疗TX0201组和治疗E2020组大鼠脑组织SOD活力相对于模型组明显提高,MDA和ROS的含量则明显降低,GSHPX活力有升高的趋势;同时治疗TX0201组COIImRNA的表达较模型组有显著提高,而治疗E2020组COIImRNA的表达有上升趋势。结论调心方有效部位TX0201可以明显改善AD大鼠脑内氧化损伤以及能量代谢异常,防治AD的发生与发展。

山茱萸多糖对AD大鼠c-fos和早老素1表达的影响

目的探讨阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马区Tau蛋白磷酸化、早老素(PS)1和c-fos的mRNA表达水平、乙酰胆碱酯酶(Ach E)的变化以及山茱萸多糖对其影响。方法 Wistar大鼠75只,分为青年组、假手术组、AD模型组、阳性对照组、山茱萸多糖组和水煎剂组,采用D-半乳糖与Aβ联合注射制作AD模型,选用多奈哌齐为阳性对照药物,采用经胃灌服法给予多奈哌齐、山茱萸多糖和水煎剂;Morris水迷宫法检测学习记忆能力;考马斯亮蓝法检测蛋白质含量;比色分析法测定Ach E活性;免疫组化法检测Tau蛋白磷酸化水平;RT-PCR法检测c-fos和PS1 mRNA的表达。结果与青年组和大鼠手术前比较,造模后大鼠学习记忆能力显著低于青年组(P<0.01)和手术前(P<0.01);山茱萸多糖和水煎剂显著提高AD模型大鼠学习记忆能力(P<0.01),且与阳性对照组无明显差别(P>0.05);与青年组比较,假手术组、Aβ对照组、阳性对照组、多糖组和水煎剂组大鼠海马组织中Ach E活性明显增加(P<0.05或P<0.01);与Aβ对照组比较,阳性对照组、多糖组和水煎剂组Ach E活性明显降低(P<0.01或P<0.05),其中多糖组未达到阳性对照组水平(P<0.05),但多糖组与水煎剂组之间差异不显著(P>0.05);与青年组和假手术组比较,Aβ对照组大鼠海马区P-tau蛋白水平显著增加(P<0.05);与Aβ对照组比较,阳性对照组、多糖组和水煎剂组P-Tau水平明显降低(P<0.05);与青年组和假手术组比较,Aβ对照组c-fos mRNA表达水平明显降低(P<0.01),而PS1表达则明显增加(P<0.01);山茱萸多糖和水煎剂可明显提高AD模型大鼠cfos表达水平,降低PS1的表达。结论 D-半乳糖与Aβ注射联合应用,可提高Tau蛋白磷酸化水平、降低c-fos的表达,提高Ach E活性和PS1的表达;山茱萸多糖和山茱萸水煎剂均可降低Tau磷酸化水平、提高AD模型大鼠学习记忆能力,其作用与多奈哌齐比较无明显差异;山茱萸多糖及水煎剂可降低AD模型大鼠海马PS1表达和Tau蛋白磷酸化水平,上调c-fos表达;山茱萸多糖是山茱萸能够改善AD模型大鼠学习记忆的一种有效成分。

独活对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响

目的:研究独活颗粒剂对Aβ1–40蛋白所诱发的AD模型大鼠学习记忆能力的影响。方法:采用Aβ1–40灌注法建立AD大鼠模型,分别用中药独活颗粒剂、西药吲哚美辛、0.9%的氯化钠溶液灌胃,4周后,通过水迷宫实验观察药物对AD模型大鼠学习记忆能力的影响。结果与结论:独活颗粒剂能够改善AD模型大鼠的学习记忆能力。

11^C-PIB PET用于阿尔茨海默病大鼠模型评价研究

为研究Aβ蛋白显像剂11C-PIBPET成像技术用于评价阿尔茨海默病大鼠模型中的作用,以9只Aβ1～40注射模型大鼠和10只生理盐水对照大鼠采用HE染色及Aβ蛋白免疫荧光染色来检测大鼠脑内病理改变。11C-PIB及18F-FDGPET显像在体观察两组大鼠脑内Aβ蛋白分布及葡萄糖代谢情况。结果发现:模型组海马区出现神经元减少及淀粉样斑块的形成。同时模型组PET显像可见注射侧葡萄糖代谢减低及11C-PIB摄取增加。对照组仅见轻微神经元损伤及PET所显示的葡萄糖代谢轻度减低。11C-PIB及18F-FDGPET显像结合行为学及病理学观察可以作为评价AD模型检验方法,该方法为基础研究及临床诊断AD提供了一种分子成像工具。

阿尔茨海默病大鼠模型PET在体成像研究

目的研究18F-FDG及Aβ蛋白显像剂(4’-schiff-O[11CH3])PET成像技术在判别阿尔茨海默病大鼠模型中的作用。方法对10只注射Aβ1～40复制阿尔茨海默模型大鼠及10只注射生理盐水对照大鼠行HE染色及刚果红染色,检测大鼠脑内病理学改变。用18F-FDG及4’-schiff-O[11CH3]PET显像技术在体观察2组大鼠脑内Aβ蛋白分布及葡萄糖代谢情况。结果模型组大鼠海马出现神经元减少并形成淀粉样斑块。模型组PET显像可见注射侧海马葡萄糖代谢减低及4’-schiff-O[11CH3]摄取增加。对照组仅见轻微神经元损伤,PET显示葡萄糖代谢轻度减低。结论18F-FDG及4’-schiff-O[11CH3]PET显像结合行为学及病理学观察可作为检测模型成功与否的方法之一。

6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对Aβ诱导的AD大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响

目的探究6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响。方法通过在大鼠双侧大脑的海马体注射Aβ构建AD大鼠模型。大鼠被随机分为6组:对照组、模型组、低剂量6-姜酚组(50 mg/kg)、中剂量6-姜酚组(75 mg/kg)、高剂量6-姜酚组(100 mg/kg)和阳性对照组(盐酸多尼哌齐0.9 mg/kg)。通过神经损伤评分评估大鼠神经损伤程度,干/湿法检测脑含水量,HE染色检测海马体组织学损伤程度。流式细胞术和TUNEL染色检测海马体细胞凋亡。ELISA检测iNOS、IL-6、TNF-α、SOD、GSH-Px和MDA的蛋白水平。其中qRT-PCR和Western blot检测Wnt和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量。结果与模型组相比,在6-姜酚治疗后,神经损伤评分降低,脑含水量减少,细胞凋亡率降低,促炎细胞因子iNOS、IL-6和TNF-α的表达量下调,SOD和GSH-Px的蛋白含量上调,而MDA蛋白含量下调。Wnt和β-catenin的mRNA和蛋白相对表达量均上调。结论6-姜酚通过激活Wnt/β-catenin信号通路缓解AD大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症。

EGCG改善D-gal诱导阿尔茨海默病模型大鼠认知障碍机制研究

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)通过抑制p75NTR介导的凋亡通路相关因子改善D-gal诱导阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆障碍的作用及其机制。方法以Morris水迷宫观察动物行为学变化,TUNEL法检测神经细胞凋亡情况,同时采用免疫组化及Western blot法检测其脑内Cleaved-Caspase-3表达水平,并用Western blot法检测p75NTR介导的凋亡通路相关蛋白表达水平。结果 EGCG明显改善D-gal诱导AD模型大鼠学习记忆障碍,抑制其脑内TUNEL阳性细胞表达,降低凋亡特征性蛋白Cleaved-Caspase-3的表达水平。同时,EGCG可通过抑制p75NTR介导的凋亡相关通路,显著降低p75ICD表达水平及其下游JNK2、c-Jun磷酸化水平,降低下游凋亡相关蛋白p53的表达水平,从而发挥抗凋亡、改善学习记忆障碍的抗AD作用。结论 EGCG可能通过抑制p75NTR介导的JNK/c-Jun/p53凋亡相关信号通路,抑制D-gal诱导AD模型大鼠脑内神经细胞凋亡,从而改善其认知障碍。

多奈哌齐治疗类阿尔茨海默病模型大鼠的实验研究

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease AD）主要临床表现为进行性记忆力减退，智能障碍以及人格改变。中枢胆碱能神经系统与学习和记忆有关，乙酰胆碱酯酶（AchE）在AD大脑中活性的增高致使乙酰胆碱（Ach）缺失，而且已证实Ach缺失的严重程度与痴呆程度密切相关，因此安理申（盐酸多奈哌齐）作为乙酰胆碱酯酶抑制剂（CHEIs）治疗AD已广泛应用于临床。在临床上，多奈哌齐作为治疗AD是主要强调了其抑制AchE的作用，而对其是否有抗氧化作用、抑制Aβ聚集及减少细胞调亡等其他的作用尚不清楚。我们将通过多奈哌齐治疗Aβ25-35。所致类AD模型大鼠，进一步探讨多奈哌齐治疗AD大鼠的其它作用机制，从而为临床治疗提供科学依据。

山茶籽茶麸醇提物对去卵巢阿尔茨海默病大鼠学习记忆和脑源性神经营养因子的影响

目的观察山茶籽茶麸醇提物对去卵巢阿尔茨海默病(Alzheimer'sDisease,AD)大鼠学习记忆、脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BNTF)的影响,为临床应用山茶籽茶麸醇提物防治雌激素缺乏女性AD提供实验依据。方法 5个月龄健康雌性大鼠96只,分成对照组、AD模型组、山茶籽+AD模型组、雌二醇(E2)+AD模型组,每组24只。山茶籽+AD模型组用药:山茶籽醇提取物的水溶灌胃,10ml·kg-1·d-1;E2+AD模型组用药:E2+AD模型组,皮下注射E2200μg/kg,2次/周。正常对照组和去卵巢AD模型组与给山茶籽用药组等体积生理盐水灌胃,10ml·kg-1·d-1。各实验组第4、8、12周分别取8只大鼠,称重后进行水迷宫实验,再麻醉大鼠取左心血5ml,处死取大脑。免疫组织化学染色的大脑组织切片用显微镜观察;右侧大脑用低温匀浆提取液BNTF分析。结果 AD模型组经水迷宫实验证明其学习记忆能力明显下降(P<0.01),脑组织海马CA1免疫组化染色BNTF阳性细胞计数明显减少,脑组织BNTF电泳带光密度值明显变小(P<0.01),山茶籽+AD模型组和E2+AD模型组的学习记忆能力明显提高(P<0.01),脑组织海马CA1免疫组化染色BNTF阳性细胞计数明显增加(P<0.01),脑组织BNTF电泳带光密度值明显增大(P<0.01)。结论山茶籽茶麸醇提物有雌激素样作用,可以增加AD模型大鼠脑组织BNTF含量,提高其学习记忆能力,对去卵巢AD模型大鼠有防治作用。

沙棘黄酮联合规律运动通过FOXO信号通路改善记忆与学习能力

沙棘是一种药食同源的植物,营养物质丰富,包括维生素类、黄酮类、挥发油类、甾醇类、多糖以及微量元素等,其中沙棘黄酮可以通过抗氧化,清除机体内多余活性氧。为了探讨沙棘黄酮联合规律运动通过FOXO信号通路改善AD模型大鼠学习与记忆能力。本研究选取60只健康雄性SD大鼠,体重在(220±10)g,设置5个组别,除了正常对照组(Con组)外,其他各组大鼠均进行D-半乳糖衰老造模。正常对照组和模型组(M组)大鼠正常饲养,规律运动组(G组)大鼠进行有氧跑台训练,沙棘黄酮组(S组)大鼠灌胃沙棘黄酮组,沙棘黄酮联合规律运动(GS组)大鼠同时进行有氧跑台训练和灌胃沙棘黄酮组治疗。有氧运动跑台训练每天训练15 min,每周5次;沙棘黄酮每天灌胃4.0 g/kg,每天灌服1次,整个训练周期持续12周。研究结果表明,沙棘黄酮联合规律运动能显著改善大鼠学习记忆能力;Real-Time PCR和Western blotting检测发现,沙棘黄酮联合规律运动能显著影响Bcl-2、Bax、Caspase-3以及FOXO-3α mRNA和蛋白水平表达情况,且与模型组相比,差异显著(P<0.05)。本研究结果初步表明,沙棘黄酮联合规律运动通过FOXO信号通路改善AD大鼠记忆与学习能力。

葡萄提取物白藜芦醇的生物医学功能研究

白藜芦醇(Resveratrol),是一种非黄酮类多酚有机化合物,是葡萄酒和葡萄汁中的生物活性成分。白藜芦醇被认为可以改善AD机体认知功能、恢复机体记忆力、延缓机体病程的发展。本研究通过白藜芦醇对改善衰老大鼠心肺功能及学习记忆的影响,试图深入了解葡萄提取物白藜芦醇的医学生物学功能,为白藜芦醇的生化特性和应用提供理论基础。结果发现,白藜芦醇对VO_(2)max的提升有显著帮助(P<0.05),能改变大鼠血脂浓度和心肺功能(P<0.05),对AD模型大鼠学习记忆能力有明显改善作用(P<0.05),而且上述情况与有氧运动联合效果更显著(P<0.05)。总之,白藜芦醇能够显著改善衰老大鼠心肺功能和学习记忆能力。

续断-牛膝药对治疗阿尔兹海默病体内药效研究

目的观察续断-牛膝体内治疗阿尔兹海默病(AD)药效。方法72只大鼠被分为假手术组、模型组、多奈哌齐组、银杏叶提取物组、续断-牛膝高剂量组和低剂量组,每组12只。除假手术组脑室注射生理盐水外,其余各组脑室注射Aβ_(25-35)建立AD大鼠模型。采用Morris水迷宫和十字架迷宫测试大鼠空间学习记忆能力以及焦虑状况,同时检测大鼠海马中A沉积情况、炎症因子和氧化应激相关的生化指标,验证续断-牛膝在体内的抗AD活性。结果脑室定位注射Aβ_(25-35)成功模拟出AD大鼠模型(<0.01);行为学测试结果表明续断-牛膝能够有效改善AD大鼠认知障碍以及焦虑的病症(<0.05);生化指标研究结果表明续断-牛膝能够降低AD模型大鼠海马中Aβ_(1-42)的沉积,能够降低炎症因子水平以及氧化应激水平(<0.05)。结论续断-牛膝具有显著抗AD活性效果。