ADIG诱导牛成肌细胞转分化及相关基因的表达分析

旨在通过在牛成肌细胞中过表达ADIG基因,诱导成肌细胞向成脂转分化,探讨该牛脂肪分化转录因子ADIG基因在脂类代谢过程中的功能,为阐明牛脂肪细胞分化转录因子ADIG基因在牛脂肪组织生长发育过程中发挥的作用提供证据。本研究用AD-ADIG腺病毒原液诱导转分化初生荷斯坦牛的成肌细胞,并在诱导分化后第2、4、6、8、10、12、14天进行油红O染色观察诱导成脂情况,同时收集细胞提取总RNA,利用实时荧光定量PCR分别检测ADIG、PPARγ、C/EBPα、SREBPF1、FABP4、FAS、MyoD基因的表达量变化。实时荧光定量PCR检测结果表明,ADIG基因在第2、4、6、8、10、12、14天均有高水平表达,且随着诱导天数增加脂滴明显增多。成脂相关的基因PPARγ、SREBPF1和FAS在后期AD-ADIG组中表达量均高于空白组,成肌相关的基因MyoD相对表达量在初期就显著下降,且AD-ADIG组明显低于对照组。综合脂滴染色和相关基因表达量方面的研究结果,说明ADIG基因在诱导牛成肌细胞分化向成脂转分化过程中发挥着重要作用,而且牛成肌细胞有向脂肪细胞分化的倾向。