ADAM-15在WHOⅠ级脑膜瘤中的表达及其与侵袭性的相关研究

目的:探究ADAM-15在WHOⅠ级脑膜瘤中的表达情况,进一步分析其在WHOⅠ级脑膜瘤侵袭性生长中的意义。方法:收集63例WHOⅠ级脑膜瘤标本(33例有侵袭性,30例无侵袭性)为试验组,21例正常脑膜组织为对照组。通过免疫组织化SP法检测去整合素-金属蛋白酶15(A Disintegrin and Metalloproteinase 15,ADAM-15)在上述不同脑膜组织中的表达情况。结果:试验组ADAM-15的阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(x^2=17.296,P<0.001)。侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于非侵袭性组,差异有统计学意义(x^2=8.376,P=0.004)。侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(x^2=24.661,P<0.001)。非侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(x^2=6.801,P=0.009)。结论:ADAM-15在WHOⅠ级脑膜瘤侵袭性生长中起一定作用。

ADAMs在中国汉族肺癌人群中的表达模式分析

目的探讨去整合素基质金属蛋白酶(a disintegrin and metalloprotease,ADAMs)家族成员在中国汉族人群肺癌中的表达模式。方法应用免疫组化、real-time PCR和western blotting检测ADAM-12、-15和-17在20例肺腺癌、20例肺鳞癌、10例小细胞肺癌标本以及不同病理类型肺癌细胞株中的表达。结果 ADAM-12在肺腺癌、鳞癌以及小细胞肺癌中的阳性表达率分别为25%、20%和50%;ADAM-15在肺腺癌、鳞癌和小细胞肺癌中的阳性表达率分别为70%、20%和10%;ADAM-17在肺腺癌、鳞癌和小细胞肺癌中的阳性表达率分别为35%/、45%和10%;它们在细胞株中的表达与组织样品相一致。结论 ADAMs家族成员在不同病理类型肺癌中的表达有较大差异,提示ADAMs家族成员在不同病理类型肺癌的发生、发展、浸润转移中的作用不一致。该研究为肺癌浸润转移机制的研究提供实验依据。

抗人ADAMl5抗体与胃癌、肺癌及血管内皮细胞结合的实验研究

目的研究抗人去整合素金属蛋白酶15（adisintegrinandmetalloproteinase15，ADAMl5）多克隆抗体（anti．ADAMl5抗体）与胃癌、肺癌和血管内皮细胞结合的特性。方法制备并纯化anti．ADAMl5抗体，用间接ELISA法检测不同时间、不同抗体滴度的情况下，肺癌A549细胞、胃癌HGC-27细胞及血管内皮HMEC．1细胞与抗体结合后的光密度值。结果抗体浓度为2-8pg／mL的条件下，anti-ADAMl5抗体与三种细胞株的结合程度随抗体浓度的增高而增高；孵育时间为24h或48h的结合程度明显高于2h。结论anti-ADAMl5抗体能与胃癌细胞、肺癌细胞和血管内皮细胞结合，有望用于恶性肿瘤的诊治。

IL-15及其受体在HIV感染中表达及意义

目的研究人免疫缺陷病毒(HIV)感染者外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞介素15(IL-15)、白细胞介素15受体α(IL-15Rα)及解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)mRNA的表达,探讨其在HIV感染疾病进展中的作用。方法应用实时定量PCR(RT-PCR)检测9例HIV早期感染者(感染<1年,EHI组)、30例慢性HIV感染者(感染≥1年,CHI组)及9例健康对照(NC组)PBMC中IL-15、IL-15Rα、ADAM-17 mRNA水平。结果 CHI组PBMC中IL-15 mRNA的表达明显高于NC组(P<0.01);EHI组及CHI组PBMC中IL-15Rα、ADAM17 mRNA的表达明显高于NC组(P<0.05);HIV感染者PBMC中IL-15、IL-15Rα、ADAM17 mRNA的表达与病毒载量(VL)呈正相关(P<0.05); HIV感染者IL-15 mRNA表达与IL-15RαmRNA表达呈正相关(P<0.001), IL-15RαmRNA表达与ADAM17mRNA表达水平呈正相关(P<0.001)。结论 HIV感染后IL-15、IL-15Rα、ADAM17表达上调,皆与HIV病毒复制水平相关。

rhddADAM15抑制肝癌细胞Bel-7402增殖的作用研究

ADAM15属于跨膜蛋白ADAM家族中的一员,在乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌等多种实体瘤中均发现其表达量提高。ADAM15在降解细胞外基质、介导细胞的黏附、细胞间信号转导及在肿瘤发展进程中起到重要作用。因其去整合素区域含有RGD序列,ADAM15可与多种整合素相互作用。在前期工作中,实验组利用大肠杆菌表达系统表达了重组人ADAM15去整合素区域蛋白,记作rhddADAM15。该研究将进一步针对rhddADAM15抑制肝癌细胞Bel-7402增殖的机理进行分析及探讨。SRB法显示,rhddADAM15可抑制Bel-7402细胞增殖并呈剂量依赖性,IC50为1.14μmol/L;利用DAPI核染发现,rhddADAM15可显著诱导Bel-7402细胞凋亡;流式细胞仪分析发现,rhddADAM15浓度为6μmol/L时,(87.44±7.25)%的细胞发生凋亡;PI单染分析细胞周期表明,rhddADAM15作用后,部分Bel-7402细胞周期被阻滞于S期及G2/M期,并呈剂量依赖性,4μmol/L rhddADAM15处理后G0/G1期含量下降约14%;Western blot分析显示,rhddADAM15可下调Bel-7402细胞周期蛋白CDC2的表达,抑制CDC2-Tyr15的去磷酸化,引起G2/M期的阻滞。