MicroRNA-145通过ADAM28抑制人肾癌细胞A-498上皮-间充质转化功能

目的:探讨微小RNA(miR-145)对人肾癌细胞A-498上皮-间充质转化(EMT)功能的影响及其相关机制。方法:将A-498肾癌细胞株分别转染miR-145模拟物(M145)和模拟物阴性对照(MNC),分别作为M145组和MNC组,并设立空白对照(MC)组,采用RT-qPCR法检测各组细胞miR-145水平。Transwell实验检测3组细胞侵袭能力的变化。Western blot法检测3组细胞波型蛋白(vimentin)、E-cadherin和ADAM28表达水平。应用生物信息学方法预测miR-145的靶基因。采用Western blot法检测ADAM28过表达对miR-145抑制EMT的拮抗作用。双萤光素酶报告基因实验验证miR-145与ADAM28的关系。结果:与MC组相比,M145组miR-145的表达水平显著上调(P<0.05)。M145组侵袭细胞数量显著低于MC组(P<0.05)。M145组细胞vimentin蛋白表达量显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量显著升高(P<0.05),ADAM28蛋白表达量显著降低(P<0.05)。ADAM28过表达M145组肾癌细胞中vimentin蛋白表达量显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量显著降低(P<0.05)。双萤光素酶报告基因实验结果显示ADAM28为miR-145的下游靶基因。结论:miR-145可能通过降低下游靶基因ADAM28水平影响EMT相关蛋白表达,从而抑制人肾癌细胞A-498的EMT过程。

金属蛋白酶解离素28在牙齿发育中的研究进展

金属蛋白酶解离素28(adisintegrin and metallo2 proteinase28,ADAM28)是ADAM家族最近发现的一种分泌性糖蛋白,它同样具有ADAM家族的生理功能:参与细胞增殖,分化,胞外基质重建,裂解基质蛋白和细胞迁移等。研究显示,ADAM28基因参与了牙胚的发育过程,并在牙源性间充质细胞的增殖?分化和凋亡中发挥重要的调控作用。同时ADAM28基因具有金属蛋白酶活性,因而它对于细胞外基质的形成和蛋白的外功能区脱落有重要的调节作用。本文着重回顾了近年来国内外关于ADAM28生物学功能的研究及其在牙齿发育中的作用机制。