SREBPs调控体脂平衡分子机制研究进展

对SREBPs的分子调控及不同SREBPs同分异构体与体脂平衡的关系及其进展情况进行了综述。

SREBPS及VEGF调节辛伐他汀对血管平滑肌细胞的作用

目的观察辛伐他汀对血管平滑肌细胞作用,是否通过SREBPs及VEGF的调节起作用,SREBPs与VEGF之间相互关系。方法①体外培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),观察辛伐他汀对VSMCs增殖、迁移的影响及SREBPs、VEGF的mRNA表达。②建立大鼠动脉粥样硬化血管损伤模型,分为NC组、AI,组、LS组和HS组。药物干预4周后测定各组血脂、胸主动脉内膜/(内膜+中膜)比值及血管SREBPs、VEGF的mRNA表达。结果实验证明,大剂量辛伐他汀明显抑制VSMCs增殖和迁移,VSMCs的SREBP-1、SREBP-2的mRNA表达显著增加同时VEGF的表达显着减少,SREBPs与VEGF之间有一定的相关性。结论辛伐他汀抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移机制可能是通过增加VSMCs的SREBPs的表达进而减少VEGF表达。

葱白提取物对高脂血症大鼠SREBP2/PCSK9信号通路和线粒体功能的影响

目的探讨葱白提取物(FOB)对高脂血症(HLP)大鼠固醇调节元件结合蛋白(SREBP)2/前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9信号通路和线粒体功能的影响。方法脂肪乳灌胃法构建大鼠HLP模型并进行模型鉴定,将大鼠分为:正常组、模型组、FOB低、中、高剂量组、瑞舒伐他汀组。生化方法检测血清脂质含量,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织形态变化,油红O染色观察脂质沉积情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western印迹分别检测低密度脂蛋白受体(LDLR)、PCSK9和SREBP2 mRNA和蛋白表达水平,透射电镜观察肝组织线粒体,流式检测活性氧(ROS)及线粒体膜电位,qPCR检测线粒体DNA(mtDNA)拷贝数、线粒体融合蛋白(mfn)1、mfn2、神经萎缩蛋白(OPA)1、线粒体动力相关蛋白(Drp)1表达水平。结果与模型组比较,FOB能够显著降低血脂水平,减少脂质沉积,修复肝组织损伤,升高LDLR水平,降低PCSK9和SREBP2水平,缓解肝组织线粒体损伤,降低ROS水平,升高线粒体膜电位,升高mtDNA拷贝数、mfn1、mfn2、OPA1水平,降低Drp1蛋白水平。结论FOB能够降低血脂、改善线粒体功能,其机制可能与FOB调控SREBP2/PCSK9信号通路有关。

茶叶调节SREBPs的降脂作用

茶叶可调节不同组织的脂质代谢,抑制肠道消化吸收脂质,起到降脂减肥作用。茶叶对脂质代谢途径具有显著影响,主要通过调控固醇调节元件结合蛋白(Sterol Regulatory Element Binding Proteins)及其上下游因子表达,影响脂质合成和分解,从而降低脂肪积累。

基于SREBPs靶点中药对非酒精性脂肪性肝病大鼠治疗作用Meta分析

目的本研究旨在通过Meta分析观察中药是否可以通过调控固醇调节元件结合蛋白(Sterol Regulatory Element Binding Proteins,SREBPS)相关靶点治疗非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)。方法本文通过中国知网、万方数据库、维普网、PubMed数据库、Embase数据库检索相关文献进行分析。结果纳入18篇文献,Meta分析结果表明,与模型组大鼠相比,中药治疗组可以明显减少大鼠血清甘油三酯(TG)(P<0.0001),总胆固醇(TC)(P<0.00001),低密度脂蛋白(LDL-C)(P<0.00001),ALT(丙氨酸氨基转移酶)(P<0.00001),AST(天冬氨酸氨基转移酶)(P<0.00001),HOMA-IR(胰岛素抵抗指数)(P<0.00001),抑制SREBP-1c mRNA(P<0.00001),对高密度脂蛋白(HDL-C)(P=0.06)无明显作用。结论本研究通过Meta分析发现中药可以通过调节SREBP-1c相关靶点降低NAFLD大鼠的血脂,改善其肝功能,进而治疗NAFLD,为指导临床用药和中药制剂的研发提供药理学依据。

灵芝酸C2调控S6K/SREBPs信号通路对肝细胞脂代谢的影响及机制研究

目的:研究灵芝酸C2(GAC2)的体外降脂作用,并基于核糖体S6蛋白激酶(S6K)/固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)信号通路探讨其可能机制。方法:以人肝细胞HL-7702为对象,采用MTT法考察低、中、高剂量(5、10、20μmol/L,下同)GAC2作用后细胞的相对活力;以洛伐他汀为阳性对照,采用酶联免疫吸附测定法检测低、中、高剂量GAC2作用后细胞中胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)的含量,并采用尼罗红染色法观察细胞内的脂质堆积情况;转染SREBPs报告基因质粒后,以25-羟基胆固醇(25-HC)为阳性对照,采用荧光素酶报告基因法检测低、中、高剂量GAC2作用后细胞中SREBPs荧光素酶的相对活性;以25-HC为阳性对照,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测中、高剂量GAC2作用后细胞中SREBPs及其下游基因mRNA的表达情况;以SREBPs抑制剂(25-HC)、S6K抑制剂(雷帕霉素)为参照,采用Western blotting法检测细胞中SREBP-1、SREBP-2的表达情况[以成熟SREBPs(n-SREBPs)表示]以及磷酸化S6K与S6K的相对表达量比值(p-S6K/S6K比值);利用AutoDock 4.0等软件对S6K与GAC2进行分子对接。结果:低、中、高剂量GAC2对细胞相对活力无显著影响(P>0.05)。与空白对照组比较,洛伐他汀组和GAC2高剂量组细胞中TC含量以及洛伐他汀组和GAC2中、高剂量组细胞中TG含量均显著降低(P<0.05或P<0.01),各给药组细胞中的脂滴均有所减少。与空白对照组比较,25-HC组和GAC2低、中、高剂量组细胞中的SREBPs荧光素酶相对活性均显著降低;25-HC组和GAC2中、高剂量组细胞中HMGCS1、MVK、SCD、HMGCR基因mRNA,25-HC组细胞中DHCR7基因mRNA,GAC2高剂量组细胞中SREBP-2基因mRNA,25-HC组和GAC2高剂量组细胞中DHCR24、MSMO2基因mRNA的相对表达量均显著降低;25-HC组和GAC2低、中、高剂量组细胞中SREBP-1蛋白的相对表达量,25-HC组和GAC2高剂量组n-SREBP-2蛋白的相对表达量以及霉帕霉素组和GAC2各剂量组p-S6K/S6K比值均显著降低(P<0.05或P<0.01)。分子对接结果显示,GAC2可通过氢键与S6K的氨基酸残基Arg335、Arg330、Ala332结合。结论:GAC2可降低HL-7702细胞的脂质水平,其调控作用可能与抑制S6K/SREBPs信号通路的表达有关。

鸠坑龙井茶对高脂饮食C57BL/6小鼠肝脂肪变性SREBPs通路信号的影响及肠道菌群调节作用研究

探究鸠坑龙井茶水提物(LJT)对小鼠肝组织脂质代谢SREBPs通路信号影响及肠道菌群的调节作用。通过高脂饮食诱导小鼠构建非酒精性脂肪肝(NAFL)模型,并给予LJT(300 mg·kg^(-1))灌胃干预。定期记录小鼠的体质量,检测小鼠血清生化指标和葡萄糖耐受水平,观察并分析Hematoxylin-Eosin(HE)染色、油红O染色肝组织切片特征;应用Real-time qPCR技术检测小鼠肝组织SREBPs通路7个基因(SREBP-1c、FAS、SCD-1、ACC-1、SREBP-2、HMGCR、PPARγ)的相对表达量,采用蛋白免疫印记技术(Western Blot)分析肝组织蛋白质表达水平,同时对小鼠肠道菌群进行高通量测序(16 S rDNA)并分析其结构。结果显示,LJT干预后小鼠体质量、血糖AUC、血清TG、TC、LDL-C和肝脏中TG、TC水平有显著下降,龙井组小鼠肝组织SREBP-1c、FAS、ACC-1、SCD-1和PPARγ蛋白表达水平降低,SREBP-1c、SCD-1、FAS、ACC-1、SREBP-2、HMGCR、PPARγ基因的相对表达量显著下调;16 S rDNA分析发现,小鼠肠道菌群门水平主要为Firmicutes、Bacteroidota、Desulfobacterota和Actinobacteriota 4类,LJT有效延缓了高脂饮食引起的Firmicutes相对丰度升高和Bacteroidota相对丰度下降趋势,并增加了肠道菌群的物种丰度。结果表明,LJT能够干预小鼠肝脂肪变性SREBPs通路信号表达,改善小鼠肠道菌群紊乱,具有降脂减肥作用。

SREBPs在调节骨关节炎关节软骨退变中的作用机制研究进展

骨关节炎是影响人类健康的重要退行性疾病之一,造成了大量的身体残疾和医疗资源支出,但是该病的具体发病机制尚未阐明,从而无法治愈该病。编码固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element binding proteins,SREBPs)的基因是近年来研究较多的基因,在维持机体脂质代谢稳态中起到重要的作用,越来越多的研究证实,该基因与骨关节炎关系密切。该文将会从SREBPs基因介绍、SREBPs基因与骨关节炎的关系及其通过相关因子作用造成机体代谢障碍及骨关节炎的可能机制方面进行相关探讨,就SREBPs基因在骨关节炎中的作用作一综述,从而为相关研究提供便利。

基于miR21/PI3K-Akt/SREBP通路研究泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制

目的 探索经典名方泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制。方法 采用ELISA法检测血清中血脂四项、肝功能指标及胆固醇脂酰转移酶(LCAT)水平。采用HE和油红O染色法判断肝组织病理情况。采用网络药理学预测泽泻汤降脂相关靶点,实现对交集靶点GO功能和KEGG通路富集分析。采用PCR芯片技术检测网络药理学筛选的目的基因,应用qPCR和Western blot检测基因和蛋白表达量。结果 泽泻汤可显著调节高脂血症模型小鼠的血脂四项水平,改善因高脂引起的肝损伤指标升高,对肝脏组织中脂质代谢关键酶HMGR、CYP7A1及脂质转运体ABCA1、Apo-A1具有反向调节作用。HE和油红O染色显示,泽泻汤可改善肝组织病理形态,减轻肝组织的脂质沉积情况,阳性面积比率显著下降(P<0.01)。PCR芯片获取反向调节基因44个,GO功能富集分析获取了266个条目,KEGG通路富集分析筛选得到99条信号通路。qPCR及Western blot结果显示,泽泻汤组显著下调PIK3CG、AKT1、IL-6基因表达量(P<0.05,P<0.01),上调ABCG1基因表达量(P<0.05),下调PI3 Kinase p110β、p-AKT(Ser473)及SREBP-1c蛋白表达水平(P<0.01);泽泻汤能够反向调节miR21-5p(P<0.01)。结论 泽泻汤对高脂血症模型小鼠脂代谢具有显著的调节作用,能改善高脂血症引起的肝损伤,其调脂作用可能与调节胆固醇在体内代谢、转运有关,与miR21/PI3K-Akt/SREBP通路密切相关,且泽泻汤全方调脂效果优于单味药。

晋南牛SREBP1基因调控前体脂肪细胞分化的研究

旨在探究SREBP1基因对晋南牛前体脂肪细胞分化的影响,并通过RNA-Seq技术探究该基因在晋南牛前体脂肪细胞分化过程中的调控机制。本研究利用SREBP1基因的过表达载体和siRNA转染晋南牛前体脂肪细胞,油酸诱导分化后采用油红O染色观察脂滴累积情况,检测甘油三酯(triglyceride,TG)含量以探究SREBP1基因对其分化的影响。利用RT-qPCR和蛋白免疫印迹技术(Western blotting,WB)检测过表达SREBP1基因的前体脂肪细胞中相关基因mRNA和蛋白水平变化。RNA-Seq检测干扰SREBP1基因的脂肪细胞,筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行KEGG通路富集分析,并对差异表达基因进行验证,以探究SREBP1基因参与调控晋南牛前体脂肪细胞分化相关的潜在靶基因。每个处理均设置3个重复。结果表明:1)过表达SREBP1基因能够促进前体脂肪细胞内脂滴的累积、极显著提高细胞内TG含量(P<0.01),干扰SREBP1基因则会抑制脂滴形成。2)过表达SREBP1基因后FABP4的mRNA表达量显著升高(P<0.05),FABP7、LPL的表达量极显著升高(P<0.01),WB结果显示FABP4蛋白表达水平明显升高;3)RNA-Seq共筛选到227个DEGs,其中包括67个上调基因和160个下调基因。京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析结果表明差异基因富集到PPAR信号通路和不饱和脂肪酸生物合成等相关通路,干扰SREBP1基因后,差异表达基因FABP4、LPL和FABP7的mRNA表达量均极显著降低(P<0.01),FABP4的蛋白表达水平也明显降低。由此可知,SREBP1基因对于晋南牛前体脂肪细胞分化具有促进作用,过表达该基因可促进细胞内TG累积,并且极有可能是通过对与脂质分化相关的PPAR信号通路和不饱和脂肪酸生物合成通路的调控实现的。本研究结果为探究SREBP1基因在晋南牛前体脂肪细胞分化过程中的调控机制提供理论参考。

基于SREBPs、PPARs及PCSK9途径调节脂代谢的实验研究进展

脂质代谢紊乱是全球高发的疾病,同时也是引发动脉粥样硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病等一系列心血管疾病的独立危险因素。胆固醇调节元件结合蛋白、过氧化物酶体增殖物激活受体和前蛋白转化酶枯草溶菌素/kexin9途径是研究调节脂质代谢紊乱的三大途径。研究发现,生物碱类、萜类、多酚类、多糖类、黄酮类、皂苷类、菲醌类等天然产物具有调节脂质代谢紊乱的作用。因此,本文综述现阶段中药及天然产物等通过这三条途径调节脂质代谢紊乱的实验研究进展,为研究开发具有调节脂质代谢紊乱药理活性的中药新药及保健品提供思路和方向,也为脂质代谢紊乱的防治提供新的可能性。发现,中药及天然产物有多靶点、多途径、不良反应少的优势,但因其组成成分复杂、药物间的相互作用机理尚不明确。

V-ATPase基因家族调控SREBPs入核及功能的作用机制

目的胆固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控脂类代谢的重要转录因子,其与代谢性疾病密切相关。V-ATPase作为持家基因,通过全酶的聚集和解离调节酶的活性。目前尚未有关于V-ATPase及其所在通路调控SREBP的相关报道。方法构建基因重组质粒,PCR法扩增V-ATPase基因片段,并将其插入表达载体pcDNA3.1质粒,构建基因重组质粒pcDNA3.1-V-ATPase,将目的质粒pcDNA3.1-V-ATPase及对照质粒pcDNA3.1分别转染大鼠肾小球系膜细胞。采用WesternBlotting、q-PCR、荧光显微观察等方法研究V-ATPase和SREBPs的关系。结果发现V-ATPase功能缺失抑制大鼠肾小球系膜细胞脂肪积累,V-ATPase调控SREBP的功能具有保守性,V-ATPase调控SREBP-1的入核不依赖于泛素化降解,V-ATPase调控SREBP-1的核积累依赖于溶酶体的pH值。结论上述结果说明V-ATPase是新的调控SBP-1的基因。这为寻找新的调控SREBP的因子,并研究其调控脂质代谢的作用机制提供了依据。

科尔沁牛不同组织脂肪酸含量与SCD和SREBP-1基因表达相关分析

文章旨在研究科尔沁牛不同组织脂肪酸含量及SCD、SREBP-1基因表达量和参与脂肪酸代谢的调控机制。试验采用气相色谱-质谱联用法和实时荧光定量PCR方法分别检测科尔沁牛的肾周脂肪、肠周脂肪、肩肌和背最长肌等4个不同组织的脂肪酸含量及SCD和SREBP-1基因的表达量。结果表明:(1)SFA中,肾周脂肪C14:0、C16:0、C18:0含量显著高于背最长肌(P<0.05)。MUFA中,背最长肌C16:1和总MUFA含量高于肾周脂肪,但无显著差异(P>0.05)。背最长肌的各PUFA、总PUFA和UFA含量均显著高于肾周脂肪(P<0.05)。(2)SCD基因在科尔沁牛背最长肌中的表达量高于肾周脂肪组织,与SREBP-1基因的表达趋势相似,但无显著差异(P>0.05)。SREBP-1基因在科尔沁牛背最长肌中的表达量显著高于肾周脂肪组织(P<0.05)。以上结果表明,科尔沁牛背最长肌的营养价值与肉质较肾周脂肪更高、更有利于健康。同时,SREBP-1基因在参与SCD基因的脂肪沉积调控过程中,协同调节肌内脂肪代谢,进而影响牛肉脂肪酸组成及风味。

肉桂醛调节AMPK/SREBP1c信号通路对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝损伤的影响

【目的】探讨肉桂醛通过调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/胆固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)信号通路对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝损伤的影响。【方法】实验随机分为正常组,模型组,肉桂醛低、中、高剂量组及肉桂醛高剂量+Compound C(AMPK抑制剂)组,每组15只小鼠。除正常组,其他各组给予高脂饲料喂养构建NASH模型。干预治疗后,观察肝组织病理形态变化,检测血清生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)],肝组织氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)],AMPK/SREBP1c通路蛋白[磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK、SREBP1c、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、磷酸化ACC(p-ACC)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(Scd1)]表达,及CPT1α、长链酯酰辅酶A脱氢酶(Lcad)、ACC1、脂肪酸合成酶(FAS)的mRNA表达水平。【结果】与正常组比较,模型组肝脏脂肪变性,脂质沉积和纤维化间质增多,ALT、AST、TG、TC,MDA含量,SREBP1c、Scd1蛋白表达,ACC1、FAS mRNA表达水平显著升高,SOD、GSH活性,p-AMPK、AMPK、p-ACC、ACC、CPT1蛋白表达,CPT1α、Lcad m RNA表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,肉桂醛低、中、高剂量组脂质沉积和纤维化间质减少,ALT、AST、TG、TC、MDA含量,SREBP1c、Scd1蛋白表达,ACC1、FAS mRNA表达水平显著降低,SOD、GSH活性,p-AMPK、AMPK、p-ACC、ACC、CPT1蛋白表达,CPT1α、Lcad mRNA表达水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;与肉桂醛高剂量组比较,肉桂醛高剂量+Compound C组上述指标均被逆转(P<0.05)。【结论】肉桂醛可能通过调控AMPK/SREBP1c通路,抑制氧化应激,改善肝脏脂肪变性,减轻NASH小鼠肝损伤。

SREBP2 restricts osteoclast differentiation and activity by regulating IRF7 and limits inflammatory bone erosion

Osteoclasts are multinucleated bone-resorbing cells,and their formation is tightly regulated to prevent excessive bone loss.However,the mechanisms by which osteoclast formation is restricted remain incompletely determined.Here,we found that sterol regulatory element binding protein 2(SREBP2)functions as a negative regulator of osteoclast formation and inflammatory bone loss.Cholesterols and SREBP2,a key transcription factor for cholesterol biosynthesis,increased in the late phase of osteoclastogenesis.

鸢尾素通过调控AKT/mTOR/SREBP-1信号通路 改善非酒精性脂肪性肝病脂质代谢

目的探讨鸢尾素调节AKT/mTOR/SREBP-1信号通路对小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞脂质代谢的影响。方法采用棕榈酸/油酸诱导小鼠肝细胞AML12构建NAFLD模型,以200 ng/mL的鸢尾素干预,CCK8法检测肝细胞增殖活性,油红O染色观察脂肪沉积情况,蛋白免疫印迹检测磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、核糖体蛋白S6激酶(p-P70S6K)及甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)的表达,并分别使用AKT抑制剂和激动剂、mTOR抑制剂和激动剂干预,明确鸢尾素的作用位点。同时测定过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)及肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、下游靶基因脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)的表达情况。结果与对照组比较,棕榈酸/油酸诱导后,模型组肝细胞内脂滴[(15.39±1.85)%比(1.98±0.67)%,P<0.01]含量明显增高;与模型组比较,200 ng/mL鸢尾素组细胞内脂滴[(6.93±0.70)%比(15.39±1.85)%,P<0.01]显著降低。与对照组比较,模型组p-AKT[(9.03±0.14)比(2.96±0.12),P<0.01]、p-mTOR[(7.18±0.04)比(1.66±0.18),P<0.01]、p-P70S6K[(4.21±0.00)比(1.26±0.06),P<0.01]、SREBP-1[(3.14±0.06)比(1.02±0.10),P<0.01]蛋白表达显著升高;与模型组比较,鸢尾素组p-AKT[(5.37±0.16)比(9.03±0.14),P<0.01]、p-mTOR[(3.36±0.15)比(7.18±0.04),P<0.01]、p-P70S6K[(2.59±0.05)比(4.21±0.00),P<0.01]、SREBP-1[(2.15±0.05)比(3.14±0.06),P<0.01]蛋白表达明显下降,鸢尾素与AKT抑制剂及mTOR抑制剂有协同作用,并能被AKT激动剂及mTOR激动剂逆转(P<0.05或P<0.01)。此外,与模型组比较,鸢尾素能抑制FAS[(1.83±0.20)比(3.32±0.39),P<0.01]、ACC1[(1.93±0.30)比(3.25±0.43),P<0.01]及SCD1[(2.16±0.27)比(3.65±0.42),P<0.01]mRNA的表达,上调PPARα[(1.40±0.06)比(0.71±0.10),P<0.01],下调PPARγ[(2.42±0.02)比(3.39±0.11),P<0.01]和L-FABP[(0.96±0.05)比(1.87±0.12),P<0.01]蛋白的表达。结论鸢尾素通过抑制AKT/mTOR/SREBP-1信号通路改善NAFLD细胞脂质代谢。

SREBP1c表达水平对肠道糖异生的影响

目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)对肠道糖异生的调控作用。方法饥饿处理C57BL/6小鼠、SREBP1c纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)小鼠,通过qPCR、Western blot检测糖异生途径限速酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase catalytic,G6PC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在肝脏、空肠和回肠组织中的表达水平;在肠上皮细胞CaCo-2中过表达或敲低SREBP1c,检测细胞内G6PC和PCK1表达水平。结果饥饿处理后,C57BL/6小鼠空肠、回肠组织中G6PC、PCK1和SREBP1c表达水平均显著增加(P<0.05)。SREBP1c基因敲除后,小鼠空肠、回肠组织中由饥饿诱导的糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达明显下调(P<0.05)。在肠上皮细胞CaCo-2中过表达SREBP1c,可显著上调糖异生途径关键酶G6PC和PCK1的表达,促进细胞内葡萄糖的产生(P<0.05);反之,敲低SREBP1c的表达,可明显下调G6PC和PCK1,抑制细胞内葡萄糖的产生(P<0.05)。结论饥饿状态下,SREBP1c可调控肠上皮细胞中糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达,进而影响葡萄糖的生成,表明SREBP1c可能参与肠道糖异生的调控,机制有待进一步探索。

USP37稳定SREBP1a促进胆固醇摄取和脂质沉积

目的筛选影响胆固醇调节元件结合蛋白1a(cholesterol regulatory element binding protein,SREBP1a)蛋白稳定性的去泛素化酶,并探索其调控机制。方法通过去泛素化酶库筛选显著影响SREBP1a表达的去泛素化酶,免疫蛋白印记实验和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)评估去泛素化酶对SREBP1a以及升脂基因表达的影响;通过红色荧光蛋白标记人源低密度脂蛋白(human Dil-low density lipoprotein,Human Dil-LDL)摄取和油红O染色等实验技术检测细胞摄取低密度脂蛋白(LDL)和脂质沉积情况。结果去泛素化酶库筛选发现泛素特异肽酶37(ubiquitin specific peptidase 37,USP37)可显著增加肝细胞SREBP1a蛋白表达水平,促进胆固醇摄取及脂质沉积。USP37基因敲除可显著降低SREBP1a蛋白表达水平,抑制升脂基因表达及脂质沉积。结论去泛素化酶USP37通过稳定SREBP1a蛋白表达,促进胆固醇摄取及脂质沉积,揭示了SREBP1a翻译后调控的新模式。

冠心病患者sLOX⁃1、SREBP⁃1及sST2变化及与冠脉病变程度的关系

目的探究冠心病(CHD)患者血清可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体⁃1(sLOX⁃1)、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)、固醇调节元件结合蛋白⁃1(SREBP⁃1)变化及与冠脉病变程度的关系。方法选择2020年4月至2022年4月于内蒙古自治区人民医院就诊的CHD患者156例作为CHD组,其中,稳定心绞痛(SAP)组51例,不稳定心绞痛(UAP)组63例,急性心肌梗死(AMI)组42例,选择同期来本院体检的健康人50名作为健康组。检测所有受试者的sLOX⁃1、sST2、SREBP⁃1表达水平及QRS波时限水平,比较健康者与CHD患者sLOX⁃1、sST2、SREBP⁃1及QRS波时限水平,比较不同Gensini积分患者中sLOX⁃1、sST2、SREBP⁃1及QRS波时限水平,比较不同冠心病病变支数患者中,sLOX⁃1、sST2、SREBP⁃1及QRS波时限水平,采用Spesrman相关系数分析CHD患者的sLOX⁃1、sST2,SREBP⁃1与冠脉病变程度及QRS波时限的关系。结果SAP组、UAP组、AMI组及健康组sLOX⁃1、sST2、SREBP⁃1、QRS波时限比较:AMI组>UAP组>SAP组>健康组,差异均有统计学意义(P<0.05)。0~20分组、20~40分组和≥40分组sLOX⁃1、sST2、SREBP⁃1和QRS波时限水平比较:≥40分组>20~40分组>0~20分组,差异均有统计学意义(P<0.05);冠脉病变三支组、双支组及单支组sLOX⁃1、sST2、SREBP⁃1及QRS波时限水平比较:三支组>双支组>单支组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CHD组患者sLOX⁃1、sST2及SREBP⁃1水平与患者Gensini积分、冠脉病变支数、QRS波时限水平均呈正相关(P<0.05)。结论CHD患者sLOX⁃1、SREBP⁃1、sST2水平均高于健康人群,且与患者的冠脉病变严重程度相关,可作为临床防治CHD的靶点。

贵州黑山羊ADD1基因克隆、生物信息学及组织表达规律研究

为了分析贵州黑山羊ADD1基因编码区序列(coding sequence, CDS)信息及在组织中的表达规律,试验克隆了贵州黑山羊ADD1基因CDS并进行了生物信息学分析,同时分析了该基因在12月龄贵州黑山羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、皮下脂肪、背最长肌和腿肌组织中的表达规律,以及在1,3,6,9,12月龄贵州黑山羊皮下脂肪、背最长肌和腿肌组织中的表达时序情况。结果表明:贵州黑山羊ADD1基因CDS大小为2 304 bp,编码767个氨基酸,与山羊ADD1基因序列相似性较高,与禽类的相似性较低;ADD1蛋白中的主要氨基酸为丝氨酸(Ser)、脯氨酸(Pro)、谷氨酸(Glu)和亮氨酸(Leu),含量分别为9.0%、8.7%、8.5%、8.2%,分子质量为84.05 ku,分子式为C_(3682)H_(5840)N_(1036)S_(24),理论等电点为5.74,为不稳定蛋白和亲水蛋白,主要定位在细胞核中,与ADD蛋白家族(ADD2和ADD3)、加帽蛋白(capping actin protein, CAPG)、肌侵蛋白(myotrophin, MTPN)、X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)、固醇调节元件结合蛋白1(sterol-regulatory element-binding protein 1,SREBP1)等蛋白存在相互作用,二级结构和三级结构中主要含有α螺旋和无规则卷曲;ADD1基因在12月龄贵州黑山羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、皮下脂肪、背最长肌和腿肌组织中均有表达,皮下脂肪中的表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01),其次在心脏、背最长肌、肝脏和腿肌中表达量较高,在脾脏中表达量最低。ADD1基因在1,3月龄贵州黑山羊脂肪、背最长肌和腿肌组织中的表达量均较低。在脂肪组织中6月龄时最高,极显著高于其他月龄(P<0.01);3月龄时最低,极显著低于其他月龄(P<0.01)。在背最长肌中9,12月龄较高,二者差异不显著(P>0.05),但均极显著高于其他月龄(P<0.01);6月龄表达量最低,与1月龄差异不显著(P>0.05),但二者均极显著低于其他月龄(P<0.01)。在腿肌中9月龄时最高,极显著高于其他月龄(P<0.01);12月龄最低,与1月龄差异不显著(P>0.05),但二者均极显著低于其他月龄(P<0.01)。说明ADD1基因在贵州黑山羊各组织中的表达具有广谱性和差异性。