FADS1/FADS2基因多态性与冠心病发病的关联性分析

目的:探讨多不饱和脂肪酸代谢限速酶基因FADS1和FADS2单核苷酸多态性与冠心病的关系,阐明FADS1/FADS2在冠心病发生中的作用机制。方法:在我国北方汉族人群中选择237例冠心病患者和224例健康体检者作为研究对象,采用问卷调查表收集基本信息,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测FADS1基因的rs174556位点和FADS2基因的rs174617位点,采用遗传学软件UNPHASED3.012和统计学软件SPSS 13.0分析2位点的联合作用及等位基因和基因型频数分布。结果:病例组和对照组的各位点基因型频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。病例组和对照组rs174556位点的等位基因和基因型频数分布差异有统计学意义,病例组次等位基因T及基因型TT的携带者频数显著高于对照组(P=0.009,P=0.038)。rs174556-rs174617基因型系统与冠心病的发生无关联(P>0.05)结论:在中国北方汉族人群中FADS1基因的rs174556位点基因多态性可能与冠心病发病有关联。

苏云金芽胞杆菌cry2Ad基因的克隆及其表达产物的活性分析

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)SBT2是我国新分离出的一株野生菌株。扫描电镜显示该菌株产生双锥体形晶体。琼脂糖凝胶电泳发现其质粒图谱含有5个条带。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示此菌株产生130kD晶体蛋白。利用PCR-RFLP法进行杀虫基因类型鉴定,发现其含有cry1Aa、cry1Da、cry1Hb、cry1Jb、cry1Ka、cry1Ib、基因。Cry2Ad蛋白的活性至今未见研究报道,本研究克隆和测序了该基因。并对其进行了表达。生物活性测定结果表明其表达产物对舞毒蛾(Lymant-ria dispar)、棉铃虫(Helicoverpa armigera)、亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)、小菜蛾(Plutella xylostella)有低活性;对大猿叶甲(Colaphellus bowringi)无活性。

遗传上位效应的教学实验设计与实践

遗传上位效应是遗传学中的基本概念,描述了基因间相互作用对表型性状的决定作用。为提高本科生对遗传上位效应这一概念的理解与实践能力,本教学实验以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)腺嘌呤合成途径的基因突变为基础进行设计与实践。酿酒酵母是开展遗传教学实验的经典模式生物,其腺嘌呤合成途径中ADE2基因的突变,会导致中间产物5'-磷酸核糖氨基咪唑(5'-phosphoribosylaminoimidazole,AIR)积累,使细胞呈现红色;而在腺嘌呤合成途径中处于ADE2上游的基因(如ADE8)发生缺陷,则酵母的红色表型性状会消失;处于ADE2下游途径的基因(如ADE1)发生缺陷,酵母红色表型性状不会改变。因此,ADE8相对ADE2是上位效应基因。本实验利用CRISPR-Cas9基因组编辑技术,让学生在酿酒酵母中构建ade2Δ单敲除突变体,以及ade2Δade8Δ和ade2Δade1Δ双敲除突变体,通过观察酵母突变体从白色到红色再到白色的表型变化,深刻理解基因决定表型和基因相互作用中的上位效应这一遗传学基本理论,掌握酵母遗传学操作的基本技术,极大提升了学生在实际科研环境中设计和实施实验的能力,对于学生未来的科研工作和学术发展也具有重要意义。