基于生物信息学数据库分析ADM基因在肝癌中的表达及意义

目的:探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)基因在肝癌中的表达及对肝癌患者生存预后的影响。方法:利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析ADM的表达对肝癌患者总生存期及无进展生存期的影响。结果:BioGPS数据库中ADM在人体正常肝组织中低表达(16.90±0.00);Oncomine数据库检索出ADM基因的研究共有425项,表达差异有统计学意义的研究有43项,其中高表达有22项,低表达有21项;Kaplan-Meier Plotter数据库结果表明ADM高表达组的患者总体生存时间(overall survival,OS)及无进展生存时间(progression-freesurvival,PFS)较低表达组明显缩短(P<0.001)。结论:ADM基因在肝癌组织中呈高表达,且与肝癌患者预后有关,有望为肝癌治疗及预后判断提供重要依据。

槲皮素逆转白血病细胞株K562/ADM多药耐药的研究

目的 探讨槲皮素逆转白血病细胞多药耐药在膜转运蛋白方面的机制。方法 通过MTT体外药敏法证明槲皮素对柔红霉素的增敏作用并确定逆转的浓度范围 ,作用于K5 6 2 /ADM耐药株及相应敏感株K5 6 2 /S ,运用逆转录多聚酶链式反应(RT PCR)和流式细胞术检测多药耐药基因 (Mdr1)及其膜蛋白产物P 170糖蛋白 (P gp)的表达情况 ,在激光共聚焦显微镜观察柔红霉素在亚细胞水平的分布变化。结果 2 0～ 4 0 μmol/L终浓度槲皮素在体外能明显提高柔红霉素对K5 6 2 /ADM耐药株的敏感性 ,并能下调Mdr1基因及其膜蛋白产物P gp的表达 ,恢复柔红霉素在亚细胞水平的异常分布 ,回归其作用靶点———细胞核 ,从而逆转多药耐药 ,且有效浓度范围的药物对细胞本身无毒性作用。

MnSOD模拟化合物通过线粒体途径诱导K562/ADM细胞凋亡

目的:观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物(Mn-SODm)对人白血病K562/ADM耐药细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制.方法:采用AnnexinV/PI双标记和细胞形态学法检测K562/ADM细胞凋亡;流式细胞术(FCM)检测细胞Bcl-2,Bax蛋白表达水平、线粒体跨膜电位(Δψm),细胞色素C(Cytc)含量和释放Caspase-3活性变化.结果:10,50mg/LMnSODm处理K562/ADM细胞后,AnnexinV/PI染色显示凋亡细胞明显增多,凋亡率分别为85.1%,96.8%;光学显微镜和透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变;FCM检测发现Bcl-2蛋白表达下调32%～73%,Bax蛋白表达增高4～10倍;线粒体Δψm释放降低35%～52%;Cytc含量增高28%～75%;Caspase-3活性增强5.1～6.4倍.结论:MnSODmke可抑制Bcl-2蛋白表达,促进Bax蛋白表达,并通过线粒体途径诱发K562/ADM耐药细胞凋亡.

靶向Bel-7402/ADM细胞MDR1基因高效siRNA的构建与鉴定

目的构建并鉴定靶向人肝癌多药耐药细胞亚系Bel-7402/ADM细胞MDRl基因的高效siRNA,为逆转肝癌多药耐药提供新的分子靶点。方法设计并化学合成4条靶向MDRl的siRNAs(mdrlsi-1、mdrlsi-2、mdrlsi-3和mdrlsi-4),通过Li-pofectamineTM2000介导转染Bel-7402/ADM细胞株,用RT-PCR检测Bel-7402/ADM细胞MDRl mRNA表达、western blot检测P-gp的表达,综合评价这4条siRNAs的沉默效果。结果经siRNA干扰后,4条siRNAs均能不同程度逆转Bel-7402/ADM细胞MDR1介导的多药耐药,mdrlsi-1组mRNA和蛋白表达与其他组比较有显著性差异(P<0.05)。结论相比较其他3条siRNAs,mdr1si-1对人肝癌Bel-7402/ADM细胞MDRl介导的耐药逆转效果最好,其靶序列有望成为逆转肝癌多药耐药新的靶点。

SiRNA逆转T24/ADM细胞耐药性的研究

目的探讨siRNA(small interfering RNA)对膀胱癌多药耐药性的逆转作用。方法设计针对MDR1基因的siRNA,转染膀胱癌T24/ADM细胞,应用RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,免疫印迹检测MDR1蛋白表达,流式细胞仪检测细胞内阿霉素积累量。MTT法检测阿霉素对T24/ADM细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果 3条siRNA均能不同程度地逆转T24/ADM细胞的多药耐药性,使MDR1基因的mRNA及蛋白表达水平下调,细胞内阿霉素积累量显著增加(P<0.05)。结论 siRNA可逆转膀胱癌的多药耐药性。

3-MA对阿霉素诱导K562、K562/ADM细胞凋亡及其相关基因mRNA表达的影响

目的:通过自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对阿霉素(ADM)诱导白血病K562细胞及K562/ADM细胞的细胞效应和自噬基因Beclin1、凋亡抑制基因Survivin mRNA表达的变化观察,探讨自噬在细胞凋亡中的作用和机制.方法:体外培养K562和K562/ADM细胞,采用MTT法分别检测ADM及3-MA预处理对K562、K562/ADM细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时RT-PCR法检测细胞自噬及凋亡相关基因(Beclin1、Survivin)mRNA表达的变化.结果:ADM可抑制K562与K562/ADM细胞增殖,且抑制作用呈现浓度与时间依赖性.ADM诱导组K562与K562/ADM细胞在24 h、48 h、72 h细胞凋亡率均较空白对照组明显提高(P<0.05).在ADM诱导前,经3-MA预处理可使ADM诱导的K562与K562/ADM细胞抑制率和细胞凋亡率均较单用ADM显著提高(P<0.05),Beclin 1、Survivin mRNA相对表达量均较单用ADM明显下降(P<0.05),呈正相关(r=0.827,P<0.01).结论:ADM可抑制K562、K562/ADM细胞的生长,并诱导细胞凋亡.3-MA通过抑制细胞的自噬可增强ADM诱导白血病细胞K562、K562/ADM的凋亡,其机制可能与下调Beclin1 mRNA表达,而使Survivin表达受抑制有关.

基于生物信息分析方法探究ADME基因在肝癌的表达及潜在调控机制

目的基于生物信息学分析方法,了解肝癌状态下肝脏中与药物吸收、分布、代谢及排泄(ADME)相关的基因表达及调控情况。方法首先通过GEO数据获取240个肿瘤组织和193个正常组织的基因芯片数据,利用鉴定显著差异的ADME基因。并进一步使用JASPER数据库获取转录因子基因集,使用WGCNA分析转录因子与差异ADME基因调控关联性。结果与正常肝组织相比,肿瘤组织中有66个ADME基因表达水平发生显著改变,其中6个上调60个下调。通过构建WGCNA共表达网络,并对blue模块和turqu oise模块分析,其中SLC39A1、NAT2、CYP39A1和CYP1A2主要分布在blue模块,与转录因子CA T、VEZF1、FOS和CEBPG高度相关;SLC12A9和SLC25A39主要分布在turquoise模块,与转录因子IRF3、GMEB2、PRDM4、SOX13高度相关。结论我们通过生物信息学分析发现多个ADME基因在肝癌中患者中异常表达,并通过WGCNA分析发现与之表达高度相关转录因子,为肝癌组织中ADME基因异常表达及其调控研究提供理论基础。

沉默UVRAG对白血病K562/ADM细胞自噬及耐药性的影响

目的探讨沉默紫外线抵抗相关基因(UVRAG)对人白血病K562/ADM细胞自噬及耐药性的影响。方法 Western Blotting检测UVRAG蛋白在K562及K562/ADM细胞中表达差异。特异性干扰UVRAG基因的UVRAG siRNA及Scramble siRNA在Lipofectamine TM2000介导下转染K562/ADM细胞,CCK-8法、MDC荧光染色及Western Blotting分别检测UVRAG siRNA转染前后K562/ADM细胞耐药性、自噬水平以及P-糖蛋白(P-gp)表达的变化。结果 Western Blotting检测显示K562/ADM细胞中UVRAG蛋白表达明显高于K562细胞(P<0.05);与K562/ADM组及Scramble siRNA转染组相比,UVRAG siRNA转染组UVRAG蛋白表达显著下降(P<0.05),以48 h效果最佳,提示UVRAG siRNA能高效沉默K562/ADM细胞UVRAG;CCK-8法显示与K562/ADM组及Scramble siRNA转染组相比,UVRAGsiRNA组对阿霉素敏感性显著增高,IC50值明显下降(P<0.05);MDC染色荧光显微镜观察到UVRAG siRNA转染后K562/ADM细胞胞浆中自噬泡明显减少;Western Blotting显示K562/ADM细胞中Beclin-1、P-gp表达及P62降解明显高于K562细胞,与K562/ADM细胞及Scramble siRNA转染组相比,UVRAG siRNA转染组Beclin-1、P-gp表达及P62降解显著降低(P均<0.05)。结论 UVRAG蛋白在K562/ADM细胞中高表达,与白血病MDR密切相关;UVRAG siRNA下调UVRAG表达可降低K562/ADM细胞耐药性,其机制可能与降低自噬水平及下调P-gp表达有关。

沉默DLL3基因增强白血病K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性

目的探讨沉默Delta-like ligand 3(DLL3)基因对白血病K562/ADM细胞对阿霉素(ADM)耐药性的影响及其分子机制。方法将干扰人DLL3基因表达的shRNA质粒和无义对照质粒转染K562/ADM细胞,采用RT-PCR法检测DLL3的mRNA表达水平,采用CCK-8法检测ADM对K562和K562/ADM细胞的毒性作用,采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞内ADM浓度,采用Western blotting方法检测DLL3、谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)和P-糖蛋白(P-gp)的蛋白表达水平。结果 K562/ADM细胞DLL3的mRNA和蛋白表达水平均显著高于其亲代K562细胞(P <0. 05); ADM对K562和K562/ADM细胞的IC50分别为1. 08 mg/L和34. 93 mg/L;沉默DLL3基因后,K562/ADM细胞的耐药倍数下降至13. 12,反转倍数为2. 47;尽管抑制DLL3基因表达未对K562/ADM细胞凋亡产生影响,但可下调P-gp和GST-π的蛋白表达水平(P <0. 05),增加K562/ADM细胞内ADM的蓄积量(P <0. 05),从而增强ADM诱导的K562/ADM细胞凋亡(P <0. 05)。结论沉默DLL3基因可反转K562/ADM细胞对ADM的耐药性,这可能与下调P-gp和GST-π蛋白水平、从而减少K562/ADM细胞内阿霉素蓄积量有关。

阿霉素对不同转移能力肝癌细胞及肝癌干细胞相关基因表达的影响

目的探讨阿霉素(adriamycin,ADM)对不同转移能力肝癌细胞及肝癌干细胞相关基因表达的影响。方法利用MTT法检测ADM对人肝癌细胞系MHCC97-L、HCCLM3的抑制作用,计算各自的半数致死浓度(median lethal dose,LD50);Western blot法检测ADM作用下人肝癌细胞系MHCC97-L、HCCLM3中干细胞基因Nanog、Oct-4、Sox2、ARID1A、Wnt5b的表达,并分析干细胞基因在两种细胞中表达变化的差异。结果 ADM浓度越高,对人肝癌细胞的抑制作用越明显,其对MHCC97-L和HCCLM3的半数致死浓度分别为0.4212μmol/L和0.5249μmol/L;随着ADM(LD50)作用时间的延长,MHCC97-L和HCCLM3中Wnt5b的表达水平先升高后降低,Nanog蛋白的表达先降低后升高,Sox2在HCCLM3中表达水平逐渐升高。Wnt5b和Nanog 4 h内在低转移能力肝癌细胞系MHCC97-L中的表达变化均值均小于其在高转移能力肝癌细胞系HCCLM3时的表达变化均值,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ADM可促进MHCC97-L和HCCLM3细胞的凋亡,且对MHCC97-L的作用强于HCCLM3;干细胞相关基因Wnt5b与肝癌细胞的恶性程度呈负相关;Nanog和Sox2均与肿瘤的转移密切相关,且Nanog和Sox2可能与肝癌耐药密切相关。

三羟异黄酮对人乳腺癌耐药细胞mdr-1、HER2/neu表达的影响

目的研究三羟异黄酮(Genistein,GEN)对体外培养人乳腺癌MCF-7/ADM耐药细胞中mdr-1、HER2/neu基因及蛋白表达的影响,探讨其逆转多药耐药机制。方法采用MTT法检测GEN作用MCF-7/ADM细胞后的细胞增殖抑制率(IR)和半数抑制浓度(IC50);RT-PCR法检测MCF-7/ADM细胞经不同浓度阿霉素(ADM)、GEN及GEN联合ADM处理后,其mdr-1、HER2/neu mRNA表达的变化;Western blot检测其对c-erbB2蛋白及P-糖蛋白(P-gp)的影响。结果 GEN对MCF-7/ADM细胞生长抑制作用明显,其抑制效应呈时间-剂量依赖性,特别是GEN浓度增加到60μg/mL时,对细胞抑制作用急剧升高(P<0.01)。MCF-7/ADM细胞中有mdr-1、HER2/neu过量表达,经GEN单独及联合ADM作用后,HER2/neu mRNA表达明显下调,c-erbB2蛋白出现一致性的表达下调,但对mdr-1mRNA及P-gp无影响。结论人乳腺癌MCF-7/ADM细胞耐药性与耐药基因及原癌基因的高表达相关,GEN能下调MCF-7/ADM细胞HER-2/neu基因及蛋白表达,可能是其逆转MCF-7/ADM细胞多药耐药性的机制之一,但对由P-gp介导的多药耐药无效。

腺病毒载体介导凋亡素基因联合阿霉素与顺铂对种植性肝癌的治疗研究

目的探讨腺病毒介导凋亡素基因联合阿霉素(ADM)与顺铂(CDDP)对种植性肝癌的治疗。方法建立c57BL/6小鼠皮下荷肝细胞癌模型(n=64),计算成瘤率,观察肿瘤内注射含凋亡素基因的重组腺病毒、ADM及CDDP后种植瘤的体积变化、毒副作用和组织学变化,同时计算抑瘤率。结果在治疗7d后腺病毒AdAFPvp3联合ADM与CDDP治疗组的种植瘤体积、重量均显著低于对照组,比较差异均具有统计学意义,在治疗期间没有观察到毒副作用。结论携带凋亡素基因的重组腺病毒联合ADM与CDDP对肝细胞癌具有治疗作用。

沉默AEG-1基因逆转乳腺癌MCF-7/ADM细胞耐药性

本研究旨在分析星形细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)对乳腺癌MCF-7/ADM细胞化疗药物耐药性的影响,并探讨其作用机制。将MCF-7/ADM细胞在含1.0 mg/L阿霉素(adriamycin,ADM)的培养液中培养以维持细胞的耐药性;应用shRNA技术沉默乳腺癌MCF-7/ADM细胞中AEG-1基因表达;采用MTT比色法检测ADM对MCF-7/ADM的细胞耐毒作用,据以计算ADM的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测AEG-1、p53和多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)蛋白的表达水平以及Akt、MDM2和Bad的磷酸化水平。结果显示,乳腺癌MCF-7/ADM细胞的AEG-1蛋白水平显著高于MCF-7细胞(P<0.05),经shRNA干扰后AEG-1蛋白水平显著降低(P<0.05);沉默AEG-1基因能显著降低ADM对MCF-7/ADM细胞的IC50(P<0.05),促进MCF-7/ADM细胞凋亡(P<0.05),并增强ADM对MCF-7/ADM细胞的促凋亡作用,抑制Akt、MDM2和Bad的磷酸化(P<0.05),促进p53蛋白表达(P<0.05),降低MDR1蛋白表达水平(P<0.05)。结果表明,沉默AEG-1基因可通过促进MCF-7/ADM细胞凋亡和下调MDR1蛋白表达,以逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性。

mdr1基因shRNA表达载体逆转白血病耐药细胞系K562/ADM多药耐药的实验研究

目的探讨 mdr1短发夹 RNA(mdr1 shRNA)对人红白血病耐阿霉素细胞系 K562/ADM的耐药逆转作用。方法编码设计合成靶位 mdr1基因 mRNA 具有19个碱基发夹结构互补的寡核苷酸模板,构建2个 shRNA 表达载体 pSilencer^(TM)3.1-H1 neo mdr1-A和 mdr1-B,将其稳定转染 K562/ADM细胞。用 RT-PCR 法检测转染后 K562/ADM 细胞 mdr1 mRNA 表达,Western blot 检测 P-糖蛋白(P-gp)表达,流式细胞术和 MTT 法分别检测 K562/ADM 细胞凋亡和对阿霉素的敏感性,用激光共聚焦荧光显微镜观察并测定细胞内柔红霉素的积累。结果在 pSilencer^(TM)3.1-H11 neo mdr1-A 和 mdr1-B shRNA表达载体稳定转染的 K562/ADM 细胞,mdr1 mRNA 表达分别减少到转染前的35.9%(P<0.05)和27.5%(P<0.01);同时 Western blot 结果显示 P-gp 表达被明显而特异地抑制,对阿霉素的耐药性由79倍分别减低到38倍和30倍;并且,细胞内荧光强度与对照组相比显著增加(P<0.05),与阿霉素联合应用凋亡细胞百分率分别增加至18.1%(P<0.05)和54.4%(P<0.01)。结论靶向 mdr1基因shRNA 表达载体可有效逆转耐药,使耐药的肿瘤细胞恢复对化疗药物的敏感性。

上调PTEN基因表达对白血病耐药细胞系K562／ADM细胞化疗增敏作用的实验研究

目的探讨上调PTEN表达对白血病耐药细胞化疗增敏的作用及其机制。方法将PTEN真核表达质粒导入耐阿霉素（ADM）的K562细胞（K562／ADM细胞）中，采用Westernblot和RT-PCR方法检测PTEN基因在转染前后细胞的表达，MTF法检测ADM对转染前后K562／ADM细胞存活率的影响，应用流式细胞术检测细胞凋亡百分率，采用重组人半胱天冬酶-3（caspase-3）活性定量试剂盒分析caspase-3的活性，Westernblot检测自噬微管相关蛋白轻链3（LC3）-Ⅰ／Ⅱ、自噬相关蛋白Bec-linl、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）和磷酸化40S核糖体蛋白6s激酶（p-p70S6K）的表达，单丹磺酰戊二胺（MDC）染色和透视电镜观察自噬泡的情况。结果①与未经处理和转染空载体的K562／ADM细胞相比，转染PTEN基因的K562／ADM细胞组PTENmRNA和蛋白表达水平均增高；②转染PTEN基因使K562／ADM细胞对ADM的敏感性增强，与转染空载体细胞比较，其细胞存活率从（94．07±2．60）％降低到（53．83±4．20）％，细胞凋亡率从（11．89±1．70）％增加到（43．69±2．30）％；经caspase-3抑制剂（Z-DEVE-FMK）预处理后，未能完全阻止ADM对细胞的毒性作用；③ADM处理细胞12和24h后，转染PTEN基因的K562／ADM细胞casepase-3活性（2．27±0．13和3．15±0．08）均明显高于转染空载体组（1．19±0．14和1．48±0．06）（P值均〈0．05）；④与转染空载体组比较，转染PTEN基因的K562／ADM细胞LC3-Ⅱ和Beclinl的蛋白表达水平分别增加83％和18％，p-Akt和p-p70S6K的蛋白表达水平分别降低96％和87％；⑤增加PTEN的表达，细胞内自噬泡较转染空载体组明显增多。结论上调PTEN基因表达能明显增加K562／ADM细胞对ADM的敏感性，该作用可能与上调PTEN基因表达、抑制P13K／Ak∥mTOR通路活性从而促进细胞凋亡和自噬的发生有关。

共载体AAV-PR39-ADM治疗缺血性心脏病

目的:探讨共载体AAV-PR39-ADM分泌表达血管生成肽(PR39)与血管扩张肽(ADM)对SD大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法:选健康成年雄性SD大鼠36只,体重平均为280 g±20 g,随机分为假手术组(SO)、治疗组(TR)与对照组(I/R),每组各12只。治疗组大鼠心肌注射共载体AAV-PR39-ADM感染心肌7天后行B超检查,测量记录左室壁厚度及射血分数(EF%),左室收缩末压(LVSP),左室内压最大上升下降速率(±dp/dt max)评价作为心脏功能指标。对照组建立缺血再灌注损伤模型,假手术组只穿线不结扎且两组行相同检测。速取处死大鼠心肌行masson染色测量心肌梗死面积。结果:治疗组明显高于对照组,其射血分数、左室内收缩末压、最大上升速率,最大下降速率、梗死面积分别为:EF%(50.4±6.3),(29.8±10.5),P<0.05;LVSP:(116±4.2),(101±3.7),P<0.05;+dp/dt max:(2859±365),(2137±191),P<0.05;-dp/dtmax:(2186±107),(1886±124),P<0.05;IS%:(29.3±4.6),(24.6±2.2),P<0.05。结论:共载体AAV-PR39-ADM能够显著恢复心肌缺血损伤引起的左室内压下降,提高心肌收缩能力,提高射血分数并明显缩小心肌梗死范围。

人肝癌HepG2多药耐药细胞系的部分生物学性状研究

目的 研究人肝癌多药耐药 (MDR)的机制 ,建立HepG2多药耐药细胞系并研究其部分生物学性状。方法 应用HepG2细胞系 ,通过培养液中阿霉素 (ADM )的浓度梯度增加法 ,得到肝癌多药耐药株HepG2 /ADM。Westernblot增强化学发光法 (ECL)检测细胞株表面多药耐药基因(MDR1)的表达产物P 糖蛋白 (P 170 )、多药耐药相关蛋白 (MRP)及肺耐药蛋白 (LRP)的表达水平。结果 耐药细胞的倍增时间延长 2 .0 5倍。该耐药模型的P 170表达水平较亲本细胞升高3 .90倍 (P <0 .0 1) ,但MRP及LRP无明显变化。结论 HepG2 /ADM同其亲本细胞相比 ,其耐药性、倍增时间有明显改变 ;多药耐药性主要与MDR1的高表达有关。

+G_z暴露后大鼠相关血管活性物质的变化

目的 探讨 +Gz 暴露后大鼠血浆一氧化氮 (NO)、内皮素 (ET 1)、肾上腺髓质素 (ADM )的变化 ,为 +Gz 防护研究提供实验依据。 方法 30只雄性Wistar大鼠随机分成对照组、+ 5Gz 及+ 10Gz 暴露后 30min及 6h五组 ,每组 6只。分别于暴露后 30min和 6h后处死大鼠取血及心脏、肺组织 ,测定血浆NO、ET 1、ADM含量及反转录聚合酶链反应 (RT PCR)定量检测方法检测心脏、肺组织eNOSmRNA表达水平。 结果 +Gz 暴露后大鼠血浆中NO、ADM含量及心脏和肺组织eNOSmRNA表达水平显著增高 ,血浆中ET 1含量显著减低。 结论 +Gz 暴露后大鼠NO、ET 1、ADM出现抗损伤代偿性改变。

亚致死量陡脉冲调节人卵巢癌细胞多药耐药的实验研究

目的研究亚致死量陡脉冲对人卵巢癌多药耐药细胞亚株的杀伤及对多药耐药性的调节,并探讨其可能的作用机制。方法以人卵巢癌细胞亲本株(SKOV3)及多药耐药亚株(SKOV3/ADM)为研究对象,采用60Hz陡脉冲电击处理,甲基噻唑基四唑(MTT)法检测两株细胞的电敏感性及化疗敏感性;逆转录多聚酶链反应(RTPCR)法检测耐药亚株中的多药耐药基因(MDR1)mRNA水平,免疫细胞化学法检测其P糖蛋白(Pgp)表达,用透射电镜观察超微结构的改变。结果SKOV3亲本及耐药亚株对陡脉冲电场的电敏感性相近(P=0.642);亚致死量脉冲处理后的耐药亚株出现:化疗敏感性增强,半效抑制浓度(IC50)值及耐药指数(RI)均减低,MDR1mRNA水平无显著改变(P=0.947),Pgp蛋白表达强度显著减弱(P=0.001),细胞出现凋亡改变。结论陡脉冲对SKOV3多药耐药亚株亦可有效杀伤;亚致死量陡脉冲可逆转多药耐药,其可能的机制为增加膜渗透性的同时亦可能诱导并持久改变了耐药相关蛋白的正常构象与功能。