Integrated ribosome and proteome analyses reveal insights into sevoflurane-induced long-term social behavior and cognitive dysfunctions through ADNP inhibition in neonatal mice

A growing number of studies have demonstrated that repeated exposure to sevoflurane during development results in persistent social abnormalities and cognitive impairment.Davunetide,an active fragment of the activity-dependent neuroprotective protein(ADNP),has been implicated in social and cognitive protection.However,the potential of davunetide to attenuate social deficits following sevoflurane exposure and the underlying developmental mechanisms remain poorly understood.In this study,ribosome and proteome profiles were analyzed to investigate the molecular basis of sevoflurane-induced social deficits in neonatal mice.The neuropathological basis was also explored using Golgi staining,morphological analysis,western blotting,electrophysiological analysis,and behavioral analysis.Results indicated that ADNP was significantly down-regulated following developmental exposure to sevoflurane.In adulthood,anterior cingulate cortex(ACC)neurons exposed to sevoflurane exhibited a decrease in dendrite number,total dendrite length,and spine density.Furthermore,the expression levels of Homer,PSD95,synaptophysin,and vglut2 were significantly reduced in the sevoflurane group.Patch-clamp recordings indicated reductions in both the frequency and amplitude of miniature excitatory postsynaptic currents(mEPSCs).Notably,davunetide significantly ameliorated the synaptic defects,social behavior deficits,and cognitive impairments induced by sevoflurane.Mechanistic analysis revealed that loss of ADNP led to dysregulation of Ca^(2+)activity via the Wnt/β-catenin signaling,resulting in decreased expression of synaptic proteins.Suppression of Wnt signaling was restored in the davunetide-treated group.Thus,ADNP was identified as a promising therapeutic target for the prevention and treatment of neurodevelopmental toxicity caused by general anesthetics.This study provides important insights into the mechanisms underlying social and cognitive disturbances caused by sevoflurane exposure in neonatal mice and elucidates the regulatory pathways involved.

基于生物信息学分析ADNP在原发性肝癌中的表达及预后

目的利用生物信息学方法分析ADNP的表达与原发性肝癌患者生存预后的关系,挖掘其对肝癌发生发展可能存在的潜在机制并探讨临床意义。方法首先分析ADNP mRNA在泛癌中的表达差异,然后对ADNP在原发性肝癌中的表达进行配对差异分析和Meta分析,同时使用HPA数据库分析ADNP蛋白在癌旁和肝癌组织之间的表达差异;结合TCGA肝癌各项临床数据资料进行单因素与多因素分析肝癌预后的影响因素,根据生存时间和生存状态数据评估肝癌患者的生存率,初步分析ADNP在肝癌预后的价值;利用GSEA软件对ADNP基因进行KEGG和GO富集分析,通过高富集的通路和生物过程探究ADNP在肿瘤发生发展中可能的作用机制,此外,基于TIMER数据库分析免疫浸润细胞和ADNP表达之间的相关性,接着对TCGA肝癌ADNP表达与肿瘤微环境相关性分析,最后通过CellMiner数据库分析ADNP的表达对不同药物的相关性和敏感性,分析ADNP表达在原发性肝癌治疗中的功能。结果ADNP mRNA在多种肿瘤中呈高表达;并且ADNP mRNA和蛋白在原发性肝癌组织和癌旁组织之间的表达具有差异性(P<0.05);生存分析结果表明ADNP低表达组的肝癌患者预后更佳(P<0.05);单因素和多因素分析均提示ADNP mRNA是原发性肝癌独立预后因子;ANDP mRNA的表达在不同性别,恶性度,分期和肿瘤大小的表达也具有不同程度的差异性(P<0.05);GSEA提示高表达ADNP在多种肿瘤和免疫通路以及细胞周期等生物过程均得到高富集;ADNP表达与6种免疫浸润细胞均为正相关;与ADNP具有较高敏感性和相关性的药物有白屈菜赤碱、寄端霉素、p-xylene316等。结论ADNP在原发性肝癌中的表达高于癌旁组织,ADNP mRNA表达量是独立预后因子,ADNP可能是肝癌的显著生物标志物,检测ADNP的表达水平有助于原发性肝癌患者预后的评估分析。

ADNP在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨神经依赖性活性保护蛋白(ADNP)在膀胱尿路上皮癌中的表达情况及其临床意义。方法:收集中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院2019年6月1日至2019年7月15日手术切除的膀胱癌及其配对的癌旁组织标本各28例,采用qPCR检测20例膀胱癌组织和癌旁组织的ADNP mRNA表达水平,WB检测其余8对标本的ADNP蛋白表达水平。同时,回顾性分析我院2005年1月1日至2007年12月31日收治的膀胱尿路上皮癌患者221例的临床病理资料,免疫组化染色方法检相应患者手术切除的石蜡标本中ADNP的表达情况,并收集同期因其他膀胱疾病而手术患者的非肿瘤膀胱组织切片用作对照。卡方检验分析ADNP表达与不同临床病理因素之间的相关性,Kaplan-Meier法进行生存分析,Cox比例风险回归模型对患者预后影响因素进行单因素及多因素分析。结果:膀胱尿路上皮癌组织中ADNP的转录和翻译水平均高于非肿瘤组织(均P<0.05),且ADNP的表达量与膀胱癌的组织学分级、临床分期及患者存活状态有着相关性(P<0.05)。纳入的221例患者随访中失访32例,ADNP高表达较低表达的膀胱患者有着不良的预后(5年OS:49.5%vs 78.6%,P<0.01;5年PFS:40.0%vs 72.2%,P<0.01;10年OS:26.6%vs 58.6%,P<0.01;10年PFS:25.3%vs 47.9%,P<0.01)。Cox单因素回归模型显示,ADNP表达量与膀胱癌的预后密切相关(P<0.05);同时Cox多因素回归也表明ADNP表达量(95%CI:1.300~2.905,P=0.001)是影响膀胱癌预后的独立危险因素。结论:ADNP在膀胱癌组织中的表达水平比非肿瘤的膀胱组织有显著的升高,组织学分级及临床分期与ADNP的表达水平有相关性,ADNP低表达的膀胱癌患者预后相对较好,ADNP有望成为膀胱癌的特异性治疗候选靶点。

ADNP基因热点变异致Helsmoortel-Van der Aa综合征患儿1例的分析及文献回顾

目的总结和分析ADNP基因变异所致Helsmoortel-Van der Aa综合征(HVDAS)患者的表型和生物学特征,为早期诊断该病提供线索。方法分析1例由ADNP基因热点变异所致HVDAS患儿的病例资料和基因检测结果,并对相关文献进行回顾。结果患儿为2岁女性,以生长落后为主诉,伴有特殊面容、精神运动及语言发育落后、反复呼吸道感染,基因检测发现其携带ADNP基因c.2496_2499delTAAA(p.Asn832Lysfs*81)杂合移码变异,其父母均未携带相同的变异。结论尽管HVDAS以智力发育障碍、孤独症谱系障碍和特殊外貌为主要表现,但生长迟缓和乳牙早萌出也是其临床特征。携带ADNP基因热点变异者的表型差异并不明显。

一例Helsmoortel-van der Aa综合征患儿的ADNP基因变异分析

目的探讨1例特殊面容、智力低下、语言发育迟缓和自闭症谱系障碍患者的分子遗传学病因。方法抽提患者及其家系成员外周血基因组DNA,应用二代测序技术对患者外显子组基因序列进行检测,Sanger测序验证家系可疑致病位点,依据美国医学遗传学与基因组学学会指南对疑似致病性变异位点进行分析。结果全外显子测序提示患者ADNP基因第5外显子存在c.568C>T(p.Q190X)杂合无义变异,导致蛋白质翻译的提前终止,影响蛋白质功能的正常发挥。经Sanger验证患者父母均不携带该变异。结论该患者被诊断为ADNP基因变异导致的Helsmoortel-van der Aa综合征。

一例Helsmoortel-Van der Aa综合征患儿的临床特征与ADNP基因变异分析

目的分析1例Helsmoortel-Van der Aa综合征(Helsmoortel-Van der Aa syndrome,HVDAS)患儿的临床特征与遗传学特征。方法对患儿及其父母进行基因变异分析,通过文献回顾总结归纳HVDAS患者的临床表型与变异类型。结果患儿表现为特殊面容,伴有自闭症谱系障碍、智力障碍和运动发育迟缓,同时双足第二趾向内卷曲,既往未见报道。基因检测提示其存在ADNP基因杂合变异c.2157C>G(p.Tyr719*),其父母均未见此变异,根据美国医学遗传学与基因组学学会指南评估为致病性变异。文献报道的80例HVDAS患者几乎均存在不同程度的行为异常、智力障碍、语言及运动发育滞后等症状,神经系统、胃肠道系统及眼部频繁受累。ADNP基因的变异类型主要为移码变异与无义变异,热点变异包括p.Tyr719*、p.Asn832Lysfs*81及p.Arg730*等。结论患儿的临床表型与ADNP基因杂合新发变异高度相关,进一步拓展了HVDAS的表型谱。由于HVDAS可导致多个系统受累、表型异质性较大,可结合基因检测技术对其进行确诊。

ADNP基因变异所致Helsmoortel-Van der Aa综合征一例报道并文献复习

Helsmoortel-van der Aa综合征又称ADNP综合征,是由ADNP基因变异引起的一种神经发育障碍疾病,多为常染色体显性遗传。临床表现主要为全面发育迟缓(global developmental delay,GDD)、孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)表现、特殊面容,也可有行为问题、肌张力减退、癫痫发作、喂养困难、睡眠障碍、先天性心脏病、眼科疾病、皮肤问题、乳牙早萌及头颅MR异常等表现。ADNP基因编码的蛋白由几个功能重要的结构域组成,包括9个锌指基序、1个部分谷胱甘肽还蛋白活性位点、1个二部分核定位信号和1个DNA结合同源盒结构域,该结构域包含1个从N端到C端富含亮氨酸的核输出序列。ADNP基因编码活性依赖的神经保护蛋白广泛表达,参与染色质重塑、转录和微管/自噬调控,与细胞的生长和分化有关,影响大脑发育和认知能力,而且与癌症发生风险存在一定相关性[1-2]。本文总结1例以"全面发育迟缓"就诊的Helsmoortel-van der Aa综合征患儿的临床资料、基因检测结果及3年的康复治疗效果,现报道如下。

ADNP基因变异导致Helsmoortel-van der Aa综合征1例

目的通过分析1例ADNP基因变异导致Helsmoortel-vanderAa综合征患儿的病史特点,了解该病的临床特征、分子生物学特点及治疗方法,为临床诊治提供参考。方法报道1例Helsmoortel-van der Aa综合征患儿的病例资料,并进行相关文献复习。结果该患儿,男,6周岁4个月,表现智力发育障碍,孤独症谱系障碍,有情绪问题,特殊面容,身材矮小等临床表现,基因检测发现ADNP基因C.1222_1223del变异,为新发变异,其父母均未携带该突变。结论该例患儿有Helsmoortel-van der Aa综合征共同的表现,即智力发育障碍和孤独症谱系障碍,典型的外貌特点。基因有助于诊断,目前尚无特效治疗。

Helsmoortel-Van der Aa综合征的临床诊断和文献复习

目的:总结1例由ADNP基因变异所致的Helsmoortel-Van der Aa综合征(HVDAS)的临床表现及遗传学特点,并进行国内外相关文献复习。方法:对2020年8月于中山大学孙逸仙纪念医院儿科神经专科确诊的1例HVDAS患儿的临床表现、生化检查及基因检测等临床资料进行回顾性分析。同时检索国内外数据库中有关ADNP基因变异所致的HVDAS患儿的文献。结果:本例患儿,男,5岁10个月,因“运动、语言发育迟缓5年余,社交障碍2年余”入院。患儿表现为智力障碍、孤独症谱系、发育迟缓、特殊面容、睾丸鞘膜积液、隐睾及睾丸微石症等。基因检测发现该患儿携带一个ADNP杂合致病突变,即ADNP(NM_015339.3)Exon3:c.56_57del TG:p.(Val19fs)基因突变,父母均未发现该基因突变。文献检索到102例患儿(包含本例患儿),平均年龄6.3岁,男女比例为3:2。相关文献报道所有患儿都有轻到重度智力障碍、严重的语言和运动发育迟缓。孤独症谱系障碍、特征性的面部外观也很常见。结论:HVDAS是一种罕见常染色体显性的神经发育障碍性疾病,临床上对于发育迟缓、孤独症谱系障碍、特殊面容的患儿,应考虑到HVDAS的可能性,应及早进行基因检测,基因检测发现ADNP基因变异可明确诊断。

多硝基吡唑并[5,1-c][1,2,4]三嗪含能化合物合成与表征

为合成高能不敏感含能化合物,以3,4-二硝基吡唑为原料,经异常亲核取代氢(VNS)反应合成5-氨基-3,4-二硝基吡唑(ADNP),ADNP经重氮化后与硝基乙腈的钠盐偶合、分子内环化,合成多硝基氮杂芳香稠环含能化合物4-氨基-3,7,8-三硝基吡唑并[5,1-c]1,2,4-三嗪(PTX);采用红外光谱(IR)、核磁共振(NMR)、元素分析表征了产物结构,优化了ADNP合成、分离条件和PTX环化反应条件;采用差示扫描量热(DSC)研究了PTX的热性能及与HMX、RDX、Al粉、硝化棉(NC)的相容性;采用BAM撞击感度测试仪测试了PTX的撞击感度。结果表明,DNP与偏三甲基肼碘化物、叔丁醇钾(t-BuOK)的物质的量比为1∶2.5∶3.5,反应时间为8h,ADNP收率可达73.7%;利用DNP与ADNP的溶解度差异可以提高ADNP的提纯效率;合成PTX中间体后直接环化可将反应收率从55.6%提高至90.7%;对PTX合成条件的优化将总收率从文献值的29.8%提高至66.8%;PTX的热分解峰温为288.5℃;PTX与Al粉和NC具有良好的相容性,与HMX、RDX不相容;其撞击感度为15J。表明PTX为一种热稳定性较好的高能不敏感含能化合物,有望应用于高能不敏感弹药中。

1-氨基-3,5-二硝基吡唑的合成、晶体结构及热性能

以3，5-二硝基吡唑为原料，三甲基苯磺酰羟胺（ MSH）为胺化剂，合成了1-氨基-3，5-二硝基吡唑（ ADNP），收率60．7％。用 IR、1 H NMR、13 C NMR、MS 和元素分析表征了其结构。在乙醇中培养了单晶。用四圆 X 射线衍射仪测定了它的单晶结构：ADNP属正交晶系，P2（1）/n 空间群，a ＝5．543（2）A，b ＝9．866（4）？，c ＝11．745（5）A，Z ＝4，D c ＝1．79 g·cm -3。DSC 结果表明，两个吸热峰温度分别为110℃和264℃；TG 结果表明，在170～268℃之间为急剧失重过程，失重99．1％。

Helsmoortel-Van der Aa综合征1例并文献复习

目的总结Helsmoortel-Van der Aa综合征的临床特征、分子生物学特点,为该病的早期诊断提供临床依据。方法分析2017年9月该院儿科收治的1例确诊为Helsmoortel-Van der Aa综合征患儿的病例资料,对该患儿及其父母进行遗传学分析并进行相关文献复习。结果患儿男,18个月龄,存在运动、语言、智力发育障碍,孤独症谱系障碍,乳牙萌出早,有行为问题,外貌畸形,身材矮小,听力障碍,便秘,反复呼吸道感染等临床表现,基因检测发现定位于20号染色体上的功能活性依赖神经保护蛋白(ADNP)基因存在移码突变。其父母均未携带该突变。结论该例患儿有Helsmoortel-Van der Aa综合征共同的表现:运动、语言、智力发育障碍和孤独症谱系障碍,典型的外貌特点,标志性的特征乳牙萌出早,同时有以往文献未报道过的胰岛素样生长因子减低。