补肾复方抗老年大鼠肝肾线粒体老化的实验研究

目的 观察补肾复方抗老年大鼠肝肾线粒体老化的作用 ,为“肝肾同源”提供实验依据。方法 实验大鼠分青年和老年组 ,其中老年组分空白对照组和补肾复方治疗组。采用荧光光度计测定肝肾线粒体内膜流动性 ,比色测磷法测定肝肾线粒体内膜 ATP酶活力 ,生物组织测氧仪测定肝肾线粒体氧化磷酸化效率 (ADP/ O)及呼吸控制率 (RCR) ,透射电镜观察肝肾线粒体形态及形态计量学分析。结果 老年大鼠肝肾线粒体内膜流动性、ATP酶活力、ADP/ O和 RCR均较青年组明显降低 ,而服用补肾复方 2个月后的老年大鼠上述指标均明显增高 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 ) ;透射电镜形态及形态计量学分析结果表明 ,老年组肝肾线粒体肿胀变性 ,补肾复方治疗后 ,肝肾线粒体超微结构变化得到明显改善 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 )。结论 补肾复方对老年大鼠肝肾线粒体老化的结构和功能均有一定的防护 ,线粒体可能是“肝肾同源”的重要物质基础之一。

养心通脉方对大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体功能的影响

目的研究养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体呼吸功能的影响。方法实验大鼠被随机分为3组(每组15只):对照组、模型组、养心通脉方组,实验结束后所有动物采用脱颈椎法处死,通过测定呼吸控制率(RCR)、二磷酸腺苷磷/氧(ADP/O)比值及ATP的浓度来评价线粒体的呼吸功能,并对线粒体内胆固醇、磷脂(PL)、甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFAs)的含量进行测定。结果模型组中大鼠心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均明显低于对照组(P<0.001),而在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均接近于对照组(P>0.05)。与对照组相比,模型组中胆固醇、TG和FFAs的水平均明显升高(P<0.001),同时磷脂(PL)水平明显降低(P<0.001)。但在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内胆固醇、TG、FFAs以及PL的水平均与对照组无明显差异(P>0.05)。结论养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体的呼吸功能及其膜完整性具有保护作用。

肉苁蓉对感染性休克肝线粒体功能影响的实验研究

目的:研究肉苁蓉对感染性休克肝线粒体功能的影响,探讨肉苁蓉在细胞水平治疗感染性休克的机制。方法:40只SD大鼠随机分为5组:假手术组,12h对照组,12h给药组,16h对照组和16h给药组。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制感染性休克模型,比较各组存活率和平均动脉压(MAP),肝线粒体ATP酶活性,呼吸控制率(RCR),ADP/O比值的变化。结果:大鼠在复制感染性休克模型后,肝线粒体ATP酶活性,呼吸控制率和ADP/O比值显著降低,24h存活率明显下降。给药组肝线粒体ATP酶活性,呼吸控制率(RCR)和ADP/O比值较对照组明显改善(P<0.05),与大鼠死亡率的降低呈明显正相关。结论:肉苁蓉能增强线粒体摄氧功能和氧化磷酸化功能,恢复感染性休克线粒体的正常的能量代谢功能。

钼与硒对克山病病区粮喂养大白鼠心肌及肝线粒体的作用

本文以克山病病区粮喂养大白鼠为对照,以病区粮加钼或/和硒作实验观察,对大鼠心肌和肝线粒体膜脂流动性、呼吸控制率(RCR)及氧化磷酸化效率(ADP/O比值)作了研究。实验结果表明,病区粮饲料中加入适量的硒(0.23ppm)可使上述指标明显改善;饲料中加入较大量的钼(40ppm)可以起到与硒相仿的作用,而加入少量钼(2ppm)几无作用。硒钼同时加入饲料,仅在肝线粒体RCR见到明显协同作用,其余指标与单独加硒时基本相当。此外,在该两元素合用组观察到肝线粒体膜脂流动性明显低于其他处理组(加钼_1组除外)而与对照相当,但其RCR及ADP/O比值明显高于对照。对此膜脂流动性与RCR及ADP/O比值不相一致的原因尚不清楚。 作者认为本实验中大量钼的作用应属药理作用,缺硒仍为克山病的主要发病因素,本实验结果不支持缺钼病因。

盟发绿豆子叶衰老期间的呼吸作用与线粒体功能的改变

暗中培养的绿豆幼苗子叶在萌发后3—4天时,外观出现衰老征状,6天后子叶凋落。随子叶日龄的增加,子叶的呼吸强度一直下降,呼吸商始终小于1。当外加L-苹果酸、α-酮戊二酸、琥珀酸和NADH为底物测定离体线粒体氧化活性时,衰老子叶的线粒体对上述四种底物的氧化活性有不同程度的增加;抗氰呼吸也有所升高。子叶衰老时,线粒体的ADP/O和呼吸控制(RC值均降低);线粒体ATPase水解ATP的活性升高。衰老绿豆子叶线粒体氧化磷酸化偶联效率的降低和ATPase水解活性的增强是与线粒体结构改变相联系的一种功能变化,它导致能量亏缺,并进一步加速了衰老的恶化进程。

匹诺塞林对脑线粒体呼吸功能的促进作用

匹诺塞林是一种广泛存在于蜂胶和植物中的黄酮类天然化合物,具有抗菌、抗炎、抗氧化、神经保护等多种药理作用。本实验利用大鼠全脑缺血模型(4-vessel occlusion,4-VO),评价了匹诺塞林在体内对4-VO大鼠脑线粒体功能的保护作用。结果表明,匹诺塞林能显著提高4-VO大鼠脑线粒体的ADP/O比值、V3以及RCI、OPR等参数,保护线粒体结构完整性;体外实验表明,匹诺塞林能显著提高分离的脑线粒体的ADP/O、V3、RCI、OPR,降低V4,保护线粒体结构完整性;同时,匹诺塞林在体外条件下促进脑线粒体ATP的生成;在细胞水平,匹诺塞林能促进SH-SY5Y细胞的ATP生成。本研究发现,匹诺塞林通过保护线粒体结构完整性,降低NADH呼吸链的电子漏流,提高氧化磷酸化效率,促进线粒体呼吸功能,提升线粒体ATP合成能力等起到脑缺血保护作用。

小鼠对异丙肾上腺素处理的品系特异性反应

心肌肥厚是各种心血管疾病共同的病理过程,最终发展为心力衰竭。本文旨在研究不同品系小鼠在肥大刺激后表现出的不同病理学特征。通过动物微量注射泵泵入异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO)诱导A/J和FVB/nJ小鼠心肌肥厚,用超声心动图监测心脏形态和功能。从各组小鼠心脏中分离线粒体,检测其氧化磷酸化功能。结果显示,两种品系小鼠在1周ISO处理后均表现出心脏收缩功能的代偿性增强。A/J小鼠(而非FVB/nJ小鼠)在3周ISO处理后出现明显的心肌肥厚,主要表现为左室后壁厚度、心重/体重比、心肌细胞横截面积和心肌肥大标志物表达均显著增加。与FVB/nJ小鼠相比,A/J小鼠心脏含有更高的线粒体DNA拷贝数;且无论是在复合物I底物还是复合物II底物中,A/J小鼠线粒体在state Ⅲ时的耗氧速率都更高。ISO处理对两种品系小鼠心脏线粒体呼吸控制率没有显著影响,但显著抑制两种品系小鼠自复合物II底物产生的ADP/O比值。在ISO处理后,A/J小鼠线粒体自复合物I底物产生的ADP/O比值下降了约50%,而FVB/nJ小鼠不受影响。以上结果提示,相对于FVB/nJ小鼠,A/J小鼠线粒体呼吸链的完整性较差,这可能是其易受ISO诱导产生心肌肥厚的原因之一。