聚ADP-核糖聚合酶家族的生物学活性及与糖尿病关系的研究进展

聚ADP-核糖聚合酶（PARP）是存在于大多数真核细胞中的蛋白质翻译后修饰酶，其功能主要为催化聚ADP核糖基化，对维持基因组完整性和细胞生存有重要作用。现对PARP家族成员的结构和功能，以及PARP与糖尿病的关系作一综述。

胸段硬膜外阻滞对急性心肌梗塞大鼠心肌多聚ADP核糖聚合酶表达的影响

目的 研究胸段硬膜外阻滞（TEB）对急性心肌梗塞（AMI）大鼠心肌多聚ADP核糖聚合酶（PARP）（一种DNA修复蛋白）表达的影响。方法 65只健康雄性Wistar大鼠，随机分为3组：正常对照组（C组，n=5）、AMI组（n=30）、TEB组（n=30）。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备AMI模型。TEB组行T4，5硬膜外置管，在制备AMI模型成功后，白天硬膜外注射1％利多卡因50μl，1次／2 h。AMI组和TEB组分别于结扎左冠状动脉后2 h（T1）、4 h（T2）、6 h（T3）、1周（T4）、4周（T5）、8周（T6）随机处死5只大鼠，测定坏死心肌组织PARP和DNA片段化水平。结果 AMI组、TEB组T2，3时检测到85 kD PARP，与C组比较，AMI组、TEB组T2，3时85 kD PARP水平增强（P〈0．05）;与AMI组比较，TEB组T2，3时85 kD PARP水平降低（P〈0．05），AMI组和TEB组T4-6时均未检测到85 kD PARP。AMI组T2时检测到DNA片段化，T3时其水平明显增强，TEB组T3时检测到DNA片段化，AMI和TEB组T4-6时均未检测到DNA片段化。结论 TEB可在一定程度上抑制AMI大鼠早期心肌PARP的降解，促进心肌细胞DNA的修复。

PARP抑制剂对糖尿病大鼠早期神经病变的影响

目的:探讨腺苷二磷酸-核酸聚合酶(PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3-AB)对实验性糖尿病大鼠神经病变的影响及可能机制。方法:实验动物分为糖尿病对照组(DC组)及糖尿病3-AB治疗组(DT组)及正常对照组(NC组),4周后测定坐骨神经传导速度(NCV),血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量以及坐骨神经内ATP、磷酸肌酸(Pcr)、肌酸(Cr)含量。结果:和DC组相比,3-AB明显提高了DT组大鼠血清SOD活性和坐骨神经Pcr含量(P<0.05),阻止了NCV的下降(P<0.05),降低了MDA含量(P<0.01),而坐骨神经ATP、Cr含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:短期应用3-AB改善了糖尿病早期神经病变的神经能量状态,提高了神经传导速度,为糖尿病神经病变(DPN)的防治提供了一个新的思路。

RNAi-chk1在抑制小鼠Lewis肺癌细胞生长作用的实验研究

目的观察chk1-RNAi联合放疗对Lewis肺癌细胞的抑制及凋亡情况。方法以脂质体Lipofectimine-2000介导,将chk1-536的siRNA表达载体转染小鼠Lewis肺癌细胞株,将其分为空白对照组、错义序列组、siRNA组,2Gy照射组、2Gy照射+错义序列组、2Gy照射+siRNA组。应用MTT法检测转染细胞抑制率、流式细胞术分析转染siRNA后细胞的凋亡,并应用RT-PCR检测转染细胞chk1-mRNA表达水平。结果 chk1-siRNA转染联合辐射组的Lewis肺癌细胞,与对照组相比较生长增殖受抑制、细胞凋亡增加;MTT法检测和流式细胞术分析示:chk1-siRNA转染联合辐射组的Lewis肺癌细胞生长增殖受抑制,细胞凋亡增加(P<0.05);同时,RT-PCR法检测该组细胞中chk1mRNA表达量下降(P<0.05)。并且siRNA转染可增加2Gy照射引起的Lewis肺癌细胞凋亡。结论针对chk-1的RNAi可以提高Lewis肺癌细胞的抑制率及放疗引起的肿瘤细胞的凋亡,对肿瘤有治疗作用,与放疗有协同作用。

Aβ25-35诱导大鼠心肌细胞内质网应激和细胞凋亡的研究

目的 研究β淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35）对培养大鼠心肌细胞的凋亡及内质网应激相关蛋白的影响,探讨内质网应激在A β25-35所致心肌损伤中的作用.方法 体外培养大鼠心肌细胞,给予不同浓度Aβ25-35刺激,用MTT方法观察心肌细胞的存活率,采用Hoechst33258染色观察心肌细胞的形态,流式细胞术检查细胞凋亡率,采用Western blot方法检测内质网应激蛋白X盒结合蛋白-1（XBP-1）、葡萄糖调节蛋白78 （GRP78）和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的水平,以及凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved PARP的水平.结果 Aβ25-35可以降低体外培养大鼠心肌细胞的存活率,促进凋亡,且呈现浓度依赖的方式.给予Aβ25-35后内质网应激蛋白XBP-1、GRP78和CHOP表达增加,同时凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）表达也增加.结论 Aβ25-35可以导致体外培养的大鼠心肌细胞发生凋亡,而内质网应激可能参与了心肌细胞发生凋亡过程,为有效防治AD相关性心肌损伤提供新思路.