中外无偿献血招募与宣传理念及方法的比较——参加国际献血者招募专业协会(ADRP)2017年年会有感

本文分享了国际献血者招募专业协会（ADRP）2017年年会上关于无偿献血宣传和招募的经验,特别是介绍了国外灵活多变的宣传和招募方式,以人为本、强调不同人群适用不同的方案;并与国内的各地因地制宜的宣传与招募模式作了比较,旨在学习国外无偿献血招募的创新理念及有效方法,改进国内存在的不足,推进我国无偿献血工作不断改善。

加味苓桂术甘方对酒精性脂肪肝大鼠肝脏组织ADRP、PPAR-γ和Sir 2蛋白表达的影响

目的研究加味苓桂术甘方对酒精性脂肪肝大鼠肝脏组织脂肪分化相关蛋白(ADRP)、过氧化物酶体增殖活化物受体γ(PPAR-γ)和沉默信息调控子2(Sir2)蛋白表达的影响。方法 SD雄性大鼠60只,随机分为6组,每组10只。50只给予含乙醇灌胃,同时饲喂高脂饲料,制备酒精性脂肪肝模型。实验组动物给予不同剂量的加味苓桂术甘灌胃6周。然后采用生化分析仪检测血样中总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、脂肪酸(FFA)的含量;利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)技术,检测酒精性脂肪肝大鼠模型肝脏组织中ADRP、PPAR-γ和Sir2的m RNA和蛋白表达。结果与模型组相比,给药6周后加味苓桂术甘方中剂量和大剂量组大鼠血清中TG、CHOL和FFA水平均有明显下降(P<0.05);加味苓桂术甘方可显著下调肝脏组织中ADRP、PPAR-γ的表达,而上调Sir2的表达。结论加味苓桂术甘方可通过改变肝脏组织ADRP、PPAR-γ和Sir2的表达,从而抑制酒精性脂肪肝的发生。

葛根素对2型糖尿病大鼠脂肪组织ADRP基因表达的影响

目的:观察葛根素(Pue)对实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠脂肪组织中脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法:Wistar大鼠喂以高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25 mg.kg-1复制2-DM大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组(腹腔注射丙二醇)和3个Pue治疗组(腹腔注射40,80,160 mg.kg-1),另选10只大鼠为正常组。各组大鼠连续腹腔注射6周后,空腹取材,测定空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素抵抗指数(IR);同时以RT-PCR法检测脂肪组织ADRP基因mRNA的表达。结果:与2-DM模型组比较,Pue高、中剂量组大鼠脂肪组织ADRP基因mRNA表达显著降低(P<0.05);Pue高、中、低剂量组大鼠FBG,IR及Pue高、中剂量组大鼠FINS显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:Pue可通过降低2-DM大鼠ADRP基因mRNA表达,降低胰岛素抵抗水平,从而降低2-DM大鼠血糖。

ADRP在脂滴形成中的作用

脂肪分化相关蛋白ADRP位于多种细胞的脂滴表面,是脂滴的主要成分之一,对促进细胞内脂滴形成起着重要作用。ADRP是体外脂肪分化过程中出现的第一个脂滴蛋白,在激活和贮存脂滴过程中发挥重要作用。本文针对胰岛β细胞、脂肪肝细胞和泡沫细胞中ADRP的脂滴沉积功能及促进脂滴沉积的机制进行了综述。

非酒精性脂肪性肝病发生中Perilipin和ADRP表达变化实验研究

目的:探讨高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)形成过程中,肝组织Perilipin(脂滴包被蛋白)和ADRP(脂肪分化相关蛋白)的表达变化及意义。方法:建立大鼠高脂饮食NAFLD模型并设正常对照组,观察时间点为建模后4w、8w和12w,观察大鼠肝组织病理变化,检测血浆游离脂肪酸及甘油三酯水平,免疫组织化学染色法检测肝组织中Perilipin和ADRP蛋白水平。结果:成功制作大鼠NAFLD实验模型,与正常组相比,NAFLD组大鼠血浆FFA水平和TG水平从第4w起显著升高(P<0.01),NAFLD组大鼠肝组织Perilipin蛋白表达水平显著低于正常组(P<0.01),ADRP蛋白表达水平显著高于同期正常组(P<0.01)。Perilipin及ADRP表达与FFA及TG具有显著相关性。结论:高脂饮食可制作NAFLD大鼠模型,Perilipin和ADRP与NAFLD的形成有关。

西农萨能羊脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因的原核表达、纯化及多克隆抗体制备

在大肠杆菌中表达西农萨能羊脂肪分化相关蛋白(ADRP),并制备其多克隆抗体。以实验室保存的pMD19-T-ADRP质粒为模板,扩增ADRP的CDS区,将其克隆到pET32a(+)载体,阳性克隆转化到大肠杆菌菌株E.coli BL21(DE3)中诱导表达,优化融合蛋白表达条件,使用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白,纯化的ADRP蛋白经复性后免疫兔子制备多克隆抗体,ELISA和Western blot检测血清效价和特异性。结果表明:成功构建pET32a(+)-ADRP原核表达载体并诱导其表达,获得最佳表达条件,即37℃、0.5 mmol/L IPTG诱导6 h;ELISA检测显示抗体效价达1∶64 000;经Western blot鉴定,制备的多克隆抗体能特异性结合原核表达以及乳腺上皮细胞表达的ADRP蛋白。本实验成功表达、纯化了ADRP融合蛋白,获得具高特异性、高效价的兔抗ADRP多克隆抗体。

宗地花猪和从江香猪ADRP基因多态性及生物信息学分析

为研究宗地花猪和从江香猪ADRP基因的单核苷酸多态性,为选种选育提供理论参考,试验以宗地花猪和从江香猪为对象,构建DNA池,采用PCR产物测序法对ADRP基因8个外显子进行单核苷酸多态性检测,并利用生物信息学方法对ADRP基因编码产物进行结构功能预测。结果显示,在两个猪种ADRP基因中筛查到5个SNPs,分别是T37C、T140C、G777A、A1061G、A1117G,其中T37C位于非编码区内,T140C和A1061G为同义突变,G777A(Val→Ile)和A1117G(Asn→Ser)为错义突变;突变前后ADRP基因m RNA二级结构、编码蛋白二级结构及三级结构均发生了变化。研究结果表明,宗地花猪和从江香猪ADRP基因具有较高的遗传多样性,可为猪种的选育和创新提供参考。

奶牛ADRP基因超表达细胞株的建立及对细胞脂滴的影响

通过PCR方法扩增奶牛脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation-related protein,ADRP)基因的编码区,构建Lenti-ADRP慢病毒重组载体,包装成病毒后感染奶牛乳腺上皮细胞,通过嘌呤霉素筛选获得超表达ADRP细胞株,采用Real-time PCR和Western blot分析细胞株中ADRP基因和蛋白的表达情况;采用尼罗红对脂滴染色,分析ADRP超表达对细胞脂滴的影响。结果显示,克隆的ADRP基因CDS区序列大约1 353 bp,成功构建重组的ADRP慢病毒载体,用5 mg/L嘌呤霉素筛选得到ADRP超表达乳腺上皮细胞株;与对照组细胞相比,超表达细胞株的ADRP基因mRNA水平增加632倍(P<0.001),蛋白表达也有所增加;检测脂滴的荧光值发现,ADRP超表达显著增加了细胞脂滴含量(P<0.01)。结果表明,超表达ADRP可促进乳腺上皮细胞的脂滴合成。

ADRP基因在宗地花猪及其杂交猪不同组织中的表达分析

为研究ADRP基因在宗地花猪及其二元杂交猪不同组织中的表达规律,探讨该基因与脂肪含量的关系,试验以宗地花猪及其二元杂交猪为材料,采用实时荧光定量PCR技术,检测ADRP基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、背最长肌及脂肪中的相对表达量。结果表明,ADRP基因在宗地花猪及其杂交猪各组织中均有表达,不同组织之间及不同猪种之间的表达存在差异,表达丰度关系宗地花猪的为小肠>脂肪>肺脏>肝脏>心脏>背最长肌>脾脏>肾脏,宗江二元猪的为脂肪>小肠>脾脏>肺脏>肾脏>肝脏>背最长肌>心脏;显著性检验结果显示,宗江二元猪肝脏、脾脏、肺、小肠、背最长肌中ADRP基因的相对表达量显著高于宗地花猪的(p<0.01),心脏、肾脏和脂肪组织中的表达量显著低于宗地花猪的(p<0.01)。结果提示,ADRP基因在宗地花猪及其二元杂交猪不同组织中的差异表达可能与脂肪沉积有关。

ADRP基因在2型糖尿病大鼠脂肪组织中的表达及意义

目的观察实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠脂肪组织中脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的情况,探讨ADRP在2-DM发病机制中的作用。方法20只Wistar大鼠随机选取10只为正常对照组,另外10只大鼠高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25mg/kg复制2-DM大鼠模型,6周后空腹取材,放免法测定血清胰岛素(Ins)并计算胰岛素敏感指数(ISI),铜显色法测定游离脂肪酸(FFA),RT-PCR法检测脂肪组织ADRP基因mRNA表达水平。结果2-DM大鼠脂肪组织中ADRP基因mRNA表达明显增高;空腹血糖、Ins、FFA水平升高,ISI降低。结论ADRP基因mRNA的表达在2-DM胰岛素抵抗和β细胞功能减退中起重要作用。

PAT家族蛋白在细胞内脂滴代谢过程中的作用

哺乳动物细胞内的甘油三酯是以脂滴的形式贮存的,现在有很多证据表明,脂滴参与多种代谢过程,因而被看作胞内有功能的细胞器。脂滴含有甘油三酯构成的脂质核心,脂核表面覆盖有单层磷脂,在单层磷脂内镶嵌着在结构上具有相关性的PAT家族蛋白,包括perilipin、ADRP、TIP47和S3-12。本文就这些蛋白在甘油三酯水解和脂滴合成中的调节作用加以综述。

Leptin通过JAK-STAT3通路抑制原代大鼠脂肪细胞perilipin mRNA的表达

【目的】探讨瘦素(Leptin)影响大鼠脂肪细胞perilipin、ADRP和TIP47 mRNA表达的分子机理。【方法】以体外培养的原代大鼠脂肪细胞为研究对象,用50 ng/mL Leptin及Leptin与JAK-STAT3通路抑制剂(AG490)、MEK通路抑制剂(U0126)、PPARgamma激活剂(罗格列酮(Ros))联合处理原代大鼠脂肪细胞3 h,提取总RNA,半定量(Semi-quantitative,SQ)RT-PCR法检测PPAR gamma、perilipin、ADRP和TIP47 mRNA的表达情况。【结果】阻断JAK-STAT3通路,可以减弱50 ng/mL Leptin对原代大鼠脂肪细胞perilipin mRNA表达的抑制作用(P<0.05),但加剧了Leptin对大鼠脂肪细胞ADRP和TIP47 mRNA表达的抑制(P<0.05);阻断MEK通路可以加剧Leptin对大鼠脂肪细胞perilipin、ADRP和PPAR gamma mRNA表达的抑制作用(P<0.05)。【结论】Leptin通过JAK-STAT3通路抑制原代大鼠脂肪细胞perilipin mRNA的表达。

国际献血者招募专业协会年会参会报告

重点围绕年会的开幕式、新媒体宣传、采供血从业团队管理、重大突发应急事件的应对及献血者热线电话中心的建设等会议的主要亮点和做法展开详细介绍。大会揭示,以用血者及献血者的真实故事打动公众是重要的宣传手段,体现献血者的价值和用血者的真实诉求,激发公众的爱心;另外,传统宣传模式影响力在逐渐下降,新媒体宣传发挥着越来越重要的作用。展示了本中心借鉴各国经验开展的实践活动,旨在介绍各国经验的同时抛砖引玉,以达到激发更多无偿献血工作的开创性思维,共同推进我国无偿献血工作的目的。

常染色体显性遗传视网膜色素变性的相关基因研究概况

视网膜色素变性(retinitispigmentosa,RP)是一种发病机制尚未完全明确的遗传性疾病,其在遗传和表型上具有较大的异质性。其中常染色体显性遗传视网膜色素变性(autosomadominantretinitpigmentosa,ADRP)占RP的20%～25%,目前发现至少有19个致病基因,其中11个已被克隆。本文将就ADRP的相关致病基因的研究进展作一综述。

脂肪分化相关蛋白的研究进展

细胞内脂滴是一种代谢活跃的细胞器,脂滴表面蛋白在脂滴的代谢调节中起到了重要作用。ADRP是一种重要的脂滴表面蛋白,在机体组织和细胞内广泛表达。脂肪肝、动脉粥样硬化、糖尿病等均伴随脂质的异常蓄积,近年来的研究表明ADRP参与这些疾病的发生发展。本文就ADRP在各组织和器官正常的生理功能以及对疾病状态的调控加以综述。

无线传感器网络相对定位算法研究

针对无线传感器网络由于消息冲突和能量受限等原因导致的节点失效问题,提出一种节点协作分布式相对定位算法(ADRP).算法在节点分簇定位的基础上,使用二次分簇与三边定位相结合的方法获取相对坐标,减少了节点簇对单个边界节点的依赖性.通过NS-2网络仿真工具将该算法与聚类SPA相对定位算法相比较,结果表明该算法在降低通信量的同时,减少了失效节点数量,并且对不规则网络拓扑结构有更强的适应性.

二甲双胍抑制脂多糖诱导的THP-1细胞源性泡沫细胞形成

目的探讨二甲双胍(Met)对脂多糖(LPS)诱导的THP-1来源泡沫细胞的形成、脂滴形态以及脂滴表面蛋白分子表达的影响。方法采用100 ng/m L佛波酯(PMA)处理THP-1细胞48 h后,诱导其分化成为巨噬细胞;再利用50μg/m L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和1μg/m L LPS促进THP-1细胞来源的巨噬细胞形成泡沫细胞,在此过程中用(0、100、200)μmol/L Met进行处理,采用油红O染色分析Met对泡沫细胞形成的影响;采用BODIPY493/503染色,荧光显微镜观察泡沫细胞内脂滴的形态和数量;抽提细胞内脂类,通过定量试剂盒测定细胞甘油三酯(TG)的含量;采用Western blot分析脂滴表面蛋白中脂肪分化相关蛋白(ADRP)、47 k Da的尾连蛋白(TIP47)的表达水平。结果与ox-LDL和LPS组相比,采用100μmol/L、200μmol/L Met处理后能够降低泡沫细胞内的脂滴大小和数量,定量分析显示细胞内TG含量明显降低,并存在剂量依赖关系,其中200μmol/L Met能够降低泡沫细胞中约25%的TG储积。Western blot结果显示,Met能够降低泡沫细胞中ADRP的表达水平,但对TIP47的表达水平无影响。结论 Met能够抑制LPS诱导的THP-1细胞源性泡沫细胞形成,并抑制脂质蓄积,同时下调细胞内ADRP的表达水平。

葛根素对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及脂肪分化相关蛋白基因表达的影响

目的观察葛根素对实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠胰岛素抵抗及脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法采用高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)复制2-DM大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照组、2-DM模型组和高、中、低剂量药物组(分别腹腔注射葛根素注射液160,80,40 mg.kg-1.d-1)。6周后,测定空腹血糖(FPG)、血脂、血清胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI),同时以逆转录-聚合本酶链反应(RT-PCR)法检测脂肪组织ADRP基因mRNA水平。结果与2-DM模型组比较,高、中、低剂量药物组FPG、FINS、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量显著降低,ISI明显升高(P<0.05或P<0.01);高和中剂量药物组大鼠脂肪组织ADRP基因mRNA表达显著降低。结论葛根素可通过下调2-DM大鼠脂肪组织ADRP基因mRNA表达,降低胰岛素抵抗水平,改善脂代谢紊乱。

白介素6上调糖尿病肾小管上皮细胞脂肪分化相关蛋白

目的明确白介素6(interleukin-6,IL-6)升高对肾小管上皮细胞脂质代谢因子脂肪分化相关蛋白(adipose differentiationrelated protein,ADRP)的影响。方法酶联免疫吸附实验(ELISA)检测糖尿病患者血清IL-6的表达,体外培养人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubularcells,HKCs),给予IL-6刺激48h,免疫荧光和Western blot检测ADRP的表达。结果对糖尿病患者血清的检测显示:相对于健康体检者,糖尿病患者血清IL-6水平显著升高;IL-6刺激人肾小管上皮细胞48h后,免疫荧光检测发现ADRP主要表达在细胞质,荧光强度明显升高,Western blot结果也证实给予IL-6刺激后ADRP升高。结论 IL-6可上调肾小管上皮细胞的脂质标记因子ADRP,可能是引起糖尿病患者肾脏脂质代谢异常的因素之-。

PPARγ基因转染对兔骨髓间充质干细胞向脂肪细胞早期分化的影响

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因表达在骨髓间充质干细胞(MSC)向脂肪细胞早期分化中的调控作用及对脂肪分化相关蛋白(ADRP)表达的影响.方法:原代培养新西兰大白兔MSC,应用脂质体转染法将pEGFP-N1-PPARγ表达载体转入MSC中,G418筛选.成脂诱导剂诱导向脂肪细胞分化,RT-PCR检测PPARγ,ADRPmR-NA表达,Western Blot检测ADRP蛋白表达,细胞形态学、油红O染色法行脂肪细胞计数和定量.结果:未分化的MSC中PPARγ,ADRP mRNA不表达,经pEGFP-N1-PPARγ转染后,调控成脂肪细胞方向分化的转录因子和早期标志PPARγ mRNA(0.87±0.08vs0.28±0.01,P<0.01),ADRP mRNA(0.52±0.03vs0.21±0.02,P<0.01)表达增强;MSC向成脂肪细胞方向分化,成脂率及脂质量提高,分别为(78.5±4.2)%vs(51.4±3.0)%和(0.46±0.05)vs(0.21±0.02),P<0.05;分化成脂的细胞ADRP蛋白表达呈阳性,转染组较空转染组表达增强.结论:PPARγ在MSC向脂肪细胞分化的早期中起重要的正向调节作用,并促进ADRP基因和蛋白的表达;PPARγ基因过表达可增强MSC向脂肪细胞分化的能力,缩短分化进程,提高分化效率,可能与增强ADRP的表达有关.