AEG-1对裸鼠肝癌模型中肝癌细胞生长及肺转移的影响

目的研究过表达和沉默AEG-1基因对肝癌细胞生长的影响,以及AEG-1基因在调节肝癌细胞定向肺转移中的作用。方法分别以携带过表达AEG-1序列及对照基因序列的慢病毒(lentivirus)转染SMMC-7721肝癌细胞株(SMMC-7721-AEG-1-L;SMMC-7721-control-L);以携带shRNA AEG-1及对照shRNA质粒(plasmid)转染SMMC-7721细胞株(SMMC-7721-shAEG-1-P;SMMC-7721-control-P);使用实时定量PCR和Westen blot检测AEG-1的表达;随后使用荧光素酶基因慢病毒包装颗粒转染上述4种稳定转染细胞株。使用上述细胞株分别建立3种裸鼠肝癌模型:皮下移植瘤模型,原位移植瘤模型和血行播散模型;每种细胞株每一模型5只Balb-c裸鼠,共60只。建立皮下移植瘤模型,观测肿瘤的生长情况并绘制肝细胞肿瘤生长曲线;建立肝癌原位移植瘤和血行播散模型,采用生物发光活体成像技术及组织病理学方法监测造模成功率及肿瘤在肝内、肝外转移情况。结果通过肝癌皮下移植瘤模型可观察到AEG-1过表达组肿瘤体积显著高于对照组,且裸鼠肝脏组织出现弥漫性侵袭转移灶;在肝癌原位移植瘤和血行播散模型中可观察到AEG-1过表达/沉默可以导致肝癌细胞肝内转移、肺转移率和转移灶数量显著增高/降低。结论过表达AEG-1基因可促进肝癌细胞生长以及定向肺转移,沉默AEG-1基因抑制肝癌细胞生长及定向肺转移。

AEG-1基因敲除对幼年小鼠认知功能的影响

目的:探究海马神经元的星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)敲除(AEG-1 KO)对幼年小鼠认知功能的影响及分子机制。方法:Intellicage一体智能行为学系统检测AEG-1 KO幼年小鼠认知功能的变化;免疫荧光染色检测AEG-1 KO幼年小鼠海马区AEG-1蛋白的表达水平;尼氏染色检测AEG-1 KO幼年小鼠海马厚度的变化;高尔基染色检测AEG-1 KO幼年小鼠海马神经元树突和树突棘的变化;Western Blot检测AEG-1 KO幼年小鼠海马神经元tau蛋白、微管相关蛋白2(MAP2)和血清糖皮质激素诱导的激酶1(SGK1)的变化。结果:与对照组相比,AEG-1 KO幼年小鼠访问正确角落且喝到水的百分比下降(P<0.05);AEG-1 KO幼年小鼠海马CA1、CA3和DG区AEG-1蛋白的表达量降低(P<0.05);AEG-1 KO幼年小鼠海马厚度无差异(P>0.05);AEG-1 KO幼年小鼠海马CA1、CA3和DG区神经元树突总长度变短和树突棘密度降低(P<0.05);AEG-1 KO幼年小鼠海马神经元tau蛋白表达量无差异(P>0.05),但MAP2蛋白表达量降低(P<0.05)和SGK1蛋白表达量增加(P<0.05)。结论:AEG-1基因敲除的幼年小鼠认识功能受损,其机制可能与下调海马神经元MAP2蛋白表达及上调SGK1蛋白表达并进而影响神经元树突发育有关。

子宫颈癌组织中AEG-1表达与微血管生成的关系

目的观察AEG-1在子宫颈癌组织中的表达及与微血管生成的关系。方法采用免疫组化MaxVision法检测40例子宫颈癌、10例慢性子宫颈炎组织中AEG-1、NF-κB p65、VEGF蛋白的表达,采用Image-Pro6.0软件检测蛋白表达的平均光密度(mean density,MD)。采用肿瘤微血管内皮标志物(CD34)结合Weinner计数法检测子宫颈癌组织新生的微血管密度(microvascular density,MVD)。结果子宫颈癌组织中AEG-1呈高表达,其与子宫颈癌的淋巴结转移和脉管浸润密切相关(P<0.05),与子宫颈癌的组织学类型、肿瘤大小、分化程度、宫旁浸润及患者年龄无关。AEG-1表达与NF-κB p65、VEGF蛋白表达呈正相关。结论 AEG-1在子宫颈癌组织中的表达与肿瘤MVD呈正相关,其可能促进子宫颈癌的微血管生成。

AEG-1在多系统肿瘤中的表达

目的检测星形细胞上调基因-1(AEG-1)在多系统肿瘤中的表达。方法将48例肿瘤组织及48例癌旁组织制成96个点的组织芯片,采用免疫组化的方法检测AEG-1在肿瘤及癌旁组织中的表达。结果 AEG-1在肿瘤组织及癌旁组织的表达差异有统计学意义(P<0.001),全部肿瘤组织均可见AEG-1表达,中强阳性率占91.67%(44/48),癌旁组织以阴性和弱阳性表达为主,占58.33%(28/48)。结论 AEG-1在肿瘤组织中普遍高表达,是一个鉴别肿瘤及正常组织有重要价值的生物标志物。

miR-22-3p靶向AEG-1抑制非小细胞肺癌细胞增殖

目的揭示miR-22-3p在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及作用机制。方法 q RT-PCR检测76例NSCLC组织及癌旁组织中miR-22-3p的表达,统计分析其与患者年龄、性别、肿瘤大小、病理分型、分级及淋巴结转移等临床参数的关系;生长曲线实验检测miR-22-3p对NSCLC细胞增殖的影响;在线软件Targetscan预测miR-22-3p的靶基因,荧光素酶活性分析及q RT-PCR进行验证。结果 miR-22-3p在NSCLC组织中的表达高于癌旁组织,与淋巴结转移相关,增加其在A549细胞中的表达可抑制细胞增殖;Targetscan预测到AEG-1为miR-22-3p的靶基因,荧光素酶活性分析与q RT-PCR证实miR-22-3p可与AEG-1 3′UTR结合,并可抑制A549细胞中AEG-1的表达。结论 miR-22-3p可能通过靶向AEG-1抑制NSCLC细胞增殖。

AEG-1与P53、Ki67在胶质瘤中表达的相关性及临床意义

目的探讨星形细胞上调基因-1(AEG-1)与P53、Ki67在胶质瘤中的表达,及其表达的相关性和临床意义。方法采用免疫组化检测39例胶质瘤组织和10例正常脑组织AEG-1、P53、Ki67蛋白的表达,分析AEG-1、P53、Ki67表达与胶质瘤病理级别的关系。PCR检测AEG-1 mRNA在不同级别胶质瘤组织的表达水平。结果 AEG-1、P53、Ki67在正常脑组织中均未检测到,在胶质瘤组织的表达率随胶质瘤级别的增高而增高(P<0.001);AEG-1阳性组P53、Ki67的表达高于AEG-1阴性组,AEG-1的表达与P53、Ki67表达呈正相关(r=0.349,P<0.05;r=0.659,P<0.001)。AEG-1 mRNA在高级别胶质瘤组织的表达水平明显高于低级别胶质瘤(均P<0.05)。结论 AEG-1与P53、Ki67在高级别胶质瘤组织中的表达率增高,AEG-1与P53、Ki67的表达呈正相关,可作为肿瘤发生、发展过程中较敏感的生物学指标。

AEG-1和MMP-9在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床相关性和病理特征

目的研究星形胶质细胞上调基因-1（AEG-1）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在上皮性卵巢组织中的表达情况、病理特征及其临床意义，为卵巢恶性肿瘤的发病原因、转移机制提供一定的理论依据。方法本研究主要通过免疫组化SP法检测病变卵巢组织，其中包括19例上皮性卵巢良性肿瘤、25例上皮性卵巢交界性肿瘤和112例上皮性卵巢恶性肿瘤中AEG-1和MMP-9的表达情况，进一步分析上皮性卵巢病变组织的相关临床和病理特征与AEG-1和MMP-9阳性表达率之间的关系。结果在卵巢癌和卵巢交界性肿瘤中AEG—1和MMP-9的阳性表达率要显著高于卵巢良性肿瘤（P〈0．01）。其中AEG—1在上皮性卵巢肿瘤组织中的阳性表达率与患者的年龄和病理类型无统计学差异（P〉0．05），而与组织分级、临床分期、淋巴结转移等有统计学差异（P〈0．05），其中卵巢肿瘤组织的分化程度低、分期晚和淋巴结转移者，AEG-1和MMP-9阳性表达率高。在卵巢恶性肿瘤中，AEG-1与MMP-9阳性表达呈显著正相关。结论AEG-1和MMP-9在上皮性卵巢癌的发生、发展中起重要的作用，可作为判断卵巢癌恶性程度、病情进展的重要指标，联合检测用于指导临床诊断有重要的意义。

AEG-1、P16、KI-67蛋白在宫颈癌前病变中的表达与临床意义

目的:探讨AEG-1、P16、KI-67蛋白在宫颈癌前病变中的表达与临床意义。方法:2008年2月至2015年9月选择在我院诊治的宫颈癌前病变患者98例作为癌前病变组,同期选择宫颈癌患者98例作为宫颈癌组和98例健康体检人作为对照组,取三组的宫颈样本都进行AEG-1、P16、KI-67蛋白表达的免疫组化分析,并调查了临床资料进行相关性分析。结果:AEG-1、P16、KI-67蛋白在宫颈癌组的阳性表达率分别为80.0%、93.9%和92.9%,而癌前病变组为57.1%、50.0%和57.1%,在对照组为3.1%、2.0%和4.1%,三组间对比差异有统计学意义(P<0.05)。AEG-1、P16、KI-67蛋白的阳性表达与宫颈癌前病变的年龄、疾病类型、HPV感染等病理参数对比差异有统计学意义(P<0.05)。直线相关性显示AEG-1、P16、KI-67蛋白表达都呈现两两正向相关性(P<0.05)。结论:AEG-1、P16、KI-67蛋白在宫颈癌前病变中都呈现高表达状况,且与临床病理特征存在相关性,三者可互相作用影响宫颈癌前病变的发展状况。

AEG-1和CHD5在胃癌中的表达及其临床意义

目的检测AEG-1和CHD5在胃癌组织及癌旁组织中的表达,探讨两者的表达与胃癌临床病理特征和预后之间的关系。方法采用免疫组化方法检测58例胃癌组织及其癌旁组织中AEG-1和CHD5的表达情况。结果 AEG-1在胃癌组织中高表达(43/58,74.14%),CHD5在癌旁组织中高表达(41/58,70.69%)。AEG-1的表达与患者的TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移和Lauren分型密切相关(P<0.05);CHD5的表达与患者的肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。AEG-1与CHD5蛋白表达水平呈现显著的负相关(r=-0.595,P<0.001)。生存分析显示,AEG-1高表达组5年生存率显著低于低表达组,而CHD5高表达组5年生存率显著高于低表达组。多因素分析显示,TNM分期、肿瘤分化程度、AEG-1与CHD5表达情况是影响胃癌患者预后的独立危险因素。结论 AEG-1和CHD5与胃癌的侵袭和转移关系密切,可能为胃癌患者提供新的预测指标和治疗靶点。

AEG-1和Caspase-3在三阴基底样乳腺癌中的表达及其临床病理相关性的研究

目的着重探讨AEG-1和Caspase-3在三阴基底样癌组织中的表达及其相关性。方法HE染色对66例检测对象的病理学诊断进行验证；免疫组化检测66例三阴基底样癌中AEG-1和Caspase-3的表达，分析其与临床病理参数的关系及二者的相关性。结果66例检测对象均为三阴基底样癌；AEG-1和Caspase-3蛋白在三阴基底样癌组织中的阳性表达率分别为73％和60％；AEG-1在三阴基底样癌中的表达随着肿瘤分化程度的降低而增强，在血清学CA153阳性中的表达率显著高于阴性中的表达率，表达差异具有统计学意义（P〈0．05）；Caspase-3在三阴基底样癌中的表达随着肿瘤分化程度的降低而减弱，在血清学CA153阳性中的表达率显著低于阴性中的表达率，表达差异具有统计学意义（P〈0．05）；AEG-1和Caspase-3在三阴基底样癌组织中表达无相关性。结论AEG-1和Caspase-3参与三阴基底样癌的发生和发展。但是AEG-1不能单独直接抑制Caspase-3的表达，可能与CA153相互作用，共同抑制Caspase-3的表达。

AEG-1基因在肿瘤研究中的进展

星形细胞上调基因1(astrocyte elevatedgene-1,AEG-1)是近年来发现的新的癌基因,该基因位于与多种恶性肿瘤发生密切相关的人类8号染色体(8q22)上,进一步研究表明其是促进肿瘤发生发展的一个关键因子。现已证实AEG-1是Ras/PI3K/Akt/c-Myc信号转导通路的下游靶分子,可以通过调控PI3K/Akt、NF-κB、Wnt/-βcatenin、MAPK等多条信号途径参与正常细胞转化,肿瘤细胞增殖、侵袭、转移,血管生成等肿瘤发生发展的多个环节,并能介导肿瘤细胞自噬活性和化疗耐药。该基因对多种恶性肿瘤的诊断和预后具有重要的临床意义,可能成为肿瘤治疗和抗癌药物研发的新靶点。本文对近年来AEG-1在肿瘤研究中的进展作一综述。

AEG-1基因促进乳腺癌细胞株MCF-7转移

目的观察AEG-1基因在细胞水平对乳腺癌细胞MCF-7转移的影响。方法通过将siRNA转染进MCF-7细胞,沉默细胞中AEG-1表达量,以转染阴性siRNA作为对照组。分别采用Transwell小室检测细胞迁移侵袭能力、CCK8实验检测细胞增殖能力。同时通过检测细胞中VEGF的变化及HUVEC细胞体外管腔形成实验考察AEG-1对于血管新生的影响。结果沉默AEG-1,MCF-7细胞的迁移能力、侵袭能力和增殖能力明显受到抑制。沉默AEG-1,MCF-7细胞的VEGF表达明显降低。上清处理HUVEC细胞,沉默AEG-1组的血管新生能力明显受到抑制。结论沉默AEG-1基因能显著抑制MCF-7细胞转移的多个层面,包括细胞迁移、侵袭、增殖以及血管新生。表明AEG-1基因在乳腺癌转移过程中起着重要作用,也为将来乳腺癌治疗开拓了新思路。

山慈菇提取物通过下调AEG-1表达抑制人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭

目的本研究旨在观察山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨其分子机制。方法取人结直肠癌SW480细胞作为研究对象,采用划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,采用短发夹RNA(Short hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默SW480细胞中星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)基因的表达,利用Western blot法检测基质金属蛋白酶-2,9(matrix metalloproteinase-2,9,MMP-2,9)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)和AEG-1等蛋白的表达变化。结果山慈菇提取物可使人结直肠癌SW480细胞愈合率、迁移率和侵袭率均显著下降(P<0.05),下调MMP2、MMP9和AEG-1蛋白表达水平(P<0.05)以及上调E-cadherin蛋白表达水平(P<0.05),上述作用均具有浓度依赖性。经shRNA干扰AEG-1基因表达后,SW480细胞中AEG-1蛋白表达水平显著下降(P<0.05);同时AEG-1干扰SW480细胞中E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),MMP2和MMP9蛋白表达水平均显著下降,同时单独或者联合山慈菇提取物组的细胞迁移率、侵袭率也降低(P<0.05)。结论山慈菇提取物能浓度依赖性地抑制人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭,这可能与山慈菇提取物抑制AEG-1蛋白表达,继而下调MMP2、MMP9蛋白表达和上调E-cadherin蛋白表达有关。

AEG-1、DLL4在子宫内膜癌中的表达及临床病理相关性的研究

目的探讨AEG-1、DLL4在子宫内膜癌中的表达及临床病理因素的关系。方法通过免疫组化的方法检测40例正常子宫内膜组织、152例子宫内膜癌中AEG-1、DLL4的蛋白表达水平并观察其表达与子宫内膜癌的临床病理因素之间的相关性。结果在子宫内膜癌中AEG-1、DLIA的阳性表达率要显著高于正常子宫内膜组织（P〈0，01）。其中AEG-1在子宫内膜癌组织中的阳性表达率与患者的年龄和病理类型无统计学意义（P〉O．05），而与组织分级、临床分期、淋巴结转移、肌层浸润有统计学意义（P〈0．05），DLIA在子宫内膜癌组织中的阳性表达率与患者的年龄和病理类型无统计学意义（P〉0．05），而与组织分级、临床分期、淋巴结转移、肌层浸润有统计学意义（P〈0．05）。子宫内膜癌组织的分化程度低、深肌层浸润、分期晚和淋巴结转移者，AEG-1、DLL4阳性表达率高。在子宫内膜癌中，AEG-1、DLL4阳性表达呈显著正相关。结论AEG—1、DLL4在子宫内膜癌的发生、发展中起到重要的作用，可作为判断子宫内膜癌恶性程度、病情进展的重要指标，联合检测用于指导临床诊断有重要的意义。

Kiss-1和AEG-1在胃癌中的表达及其相关性

目的探讨Kiss-1和AEG-1在胃癌组织中的表达及其相关性。方法采用RT-PCR和免疫组织化学法检测77例胃癌组织和20例正常胃组织中Kiss-1和AEG-1的表达,进一步用Western blot方法检测Kiss-1和AEG-1在胃癌组织和正常胃组织中表达。结果 RT-PCR结果发现胃癌组织中Kiss-1 mRNA表达水平显著低于正常胃组织(P<0.05),AEG-1mRNA表达水平显著高于正常胃组织(P <0. 05);免疫组化和Western blot发现胃癌组织中Kiss-1蛋白表达水平显著低于正常胃组织(P <0.05),AEG-1蛋白表达水平显著高于正常胃组织(P <0.05);Kiss-1 mRNA及蛋白阳性表达与胃癌组织的浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05);AEG-1 mRNA及蛋白阳性表达与胃癌组织的分化程度有关(P <0.05);胃癌组织中Kiss-1和AEG-1的表达呈负相关。结论 Kiss-1在胃癌组织中表达降低,AEG-1在胃癌组织中表达升高,Kiss-1、AEG-1可能参与胃癌的发生、发展以及浸润并有望成为诊断胃癌的生物学标记。

AEG-1抑制miR-137对非小细胞肺癌增殖调控作用

目的探讨AEG-1在miR-137抑制非小细胞肺癌（NSCLC）增殖中的作用及机制。方法 收集2013年2月-2014年5月在本院手术治疗的65例NSCLC患者肿瘤标本,提取RNA,qRT-PCR检测NSCLC组织、A549、H460及16HBE细胞中miR-137与AEG-1的表达,统计分析NSCLC组织中miR-137与胶质细胞上调基因1（AEG-1）表达的相关性;将A549细胞根据不同转染试剂分成4组：转染miR-137 mimics及空载体组,转染miR-137mimics及AEG-1表达载体组,转染miR-137 inhibitor及siRNA无关序列组,转染miR-137 inhibitor及AEG-1 siRNA组。用Lipofectamine 2000进行转染,生长曲线实验检测转染后细胞增殖情况。结果 在NSCLC组织中miR-137与AEG-1的表达呈负相关;miR-137表达高的NSCLC细胞中AEG-1表达降低;共同转染miR-137 mimics与AEG-1过表达载体的A549细胞在48 h的细胞数高于对照组,而共同转染miR-137 inhibitor与AEG-1 siRNA的A549细胞在48 h、72 h的细胞数低于对照组。结论 miR-137与AEG-1在NSCLC组织及细胞中表达呈负相关;AEG-1逆转miR-137对NSCLC细胞增殖的作用。

沉默与过表达AEG-1重组载体的构建及其对细胞迁移的影响

目的:设计靶向AEG-1序列的人鼠通用的siRNA,并构建沉默AEG-1表达的shRNA和过表达AEG-1的重组表达载体,以改变肿瘤细胞中AEG-1的表达,探讨AEG-1对肿瘤细胞迁移的影响。方法:首先设计靶向AEG-1的siRNA并转染细胞后检测其转染效率和沉默活性;然后将筛选出的siRNA序列插入pS cilence4.1载体中构建靶向沉默AEG-1的重组载体AEG-1-shRNA。利用巢式PCR克隆AEG-1序列,将其与pE GFPC3载体进行酶切、纯化、连接,并对转化子进行筛选和鉴定,构建过表达AEG-1重组质粒pE GFPC3-AEG-1。最后将重组载体AEG-1-shRNA与pE GFPC3-AEG-1转染肺癌A549细胞,利用细胞平板划痕实验和Transwel小室实验评价AEG-1表达变化对肿瘤细胞迁移能力的影响。结果:成功设计具有较高沉默活性的靶向AEG-1的siRNA,并成功构建了AEG-1-shRNA和pE GFPC3-AEG-1重组质粒,细胞划痕实验和Transwel小室实验结果表明AEG-1具有促进肿瘤细胞迁移能力的作用。结论:AEG-1具有促进肿瘤细胞迁移能力的作用,为后续进一步研究AEG-1与肿瘤发生发展的相关性及其分子机制奠定实验基础。

AEG-1与消化系统肿瘤关系的研究进展

星形细胞上调基因1(AEG-1)是一种癌基因,研究表明它在多种肿瘤的发生发展中发挥着重要的功能。本文就AEG-1在消化系统肿瘤的细胞增殖、侵袭转移、血管生成及化疗耐药等方面的研究进展做一综述。

AEG-1和Endoglin在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的探讨星形细胞上调基因-1(Astrocyte elevated gene-1,AEG-1)和Endoglin标记的微血管密度计数(MVD在子宫内膜癌组织中的表达及两者与临床病理特征间的关系。方法收集惠州市中心人民医院和广东医科大学附属医院2014年1月～2018年3月20例正常子宫内膜组织、43例子宫内膜癌组织标本,应用免疫组化法检测AEG-1和Endoglin标记的MVD表达情况。结果在正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织中,AEG-1的阳性表达率呈逐渐上升趋势(P<0.01),AEG-1在子宫内膜癌组织中的表达水平与子宫内膜癌肌层浸润深度、组织学分化程度、FIGO分期、淋巴结转移明显相关(P<0.05);在正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织中,Endoglin标记的MVD表达强度呈逐渐上升趋势(P<0.01),Endoglin标记的MVD在子宫内膜癌组织中的表达强度与子宫内膜癌肌层浸润深度、FIGO分期、淋巴结转移明显相关(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中AEG-1和Endoglin呈高表达,提示AEG-1和Endoglin在子宫内膜癌的发生发展中有着重要的作用,AEG-1和Endoglin表达水平的检测可用于子宫内膜癌的辅助诊断和病情估计。

AEG-1表达下调对非小细胞肺癌A549细胞增殖和对顺铂敏感性的影响

目的探讨下调AEG-1表达对非小细胞肺癌A549细胞增殖以及其对顺铂敏感性的影响。方法采用siRNA技术,下调非小细胞肺癌A549细胞AEG-1基因的表达,反转录PCR和免疫细胞化学检测AEG-1表达抑制程度。通过MTT增殖实验、平板克隆形成实验检测AEG-1表达下调对细胞增殖的影响。将转染后的细胞暴露于不同浓度的顺铂中作用48h,通过MTT实验检测AEG-1表达下调后细胞对顺铂敏感性变化。结果 AEG-1表达下调后,细胞增殖受到抑制,48h和72h的抑制率分别达到54.6%和59.7%;细胞克隆形成能力下降,AEG-1表达下调组克隆形成数较阴性对照组降低60.2%;实验组和对照组的IC50分别为4.8μmol/L和20.4μmol/L。结论下调AEG-1基因表达可明显抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖并增强其对顺铂的敏感性。