单抗捕捉ELISA检测AEV抗体方法的研究

本研究初步建立了检测ＡＥＶ抗体的单抗捕捉ＥＬＩＳＡ 方法。ＡＥＶ腹水单抗（腹水效价为１ ∶１×１０６）最佳稀释度为１∶２００，ＡＥＶ抗原工作浓度为１６．０８ μｇ／ｍＬ，血清稀释度为１∶１ ００， 兔抗鸡酶标抗体工作浓度为１∶５００。经阻断试验、交叉试验、重复试验，以及与进口试剂 盒 进行平行检测４０份血清，总符合率为９２．５％，表明该方法特异性强、重复性好、敏感性高， 是一种有应用前景的方法。

基于嵌入式WEB的AEV调频发射机远程监控系统

本文针对AEV调频发射机没有基于网络的远程监控系统的问题,使用了SOC、CPLD及网卡芯片等相关技术,设计了基于嵌入式WEB技术的远程监控系统,在保证原发射机电路和指标不改变的基础上,巧妙获取需要监控的各种参数,通过传统计算机网络作为传输介质,实现了监测各发射机的激励器和功放的功率、电压、温度、频率等多达十几种参数,并可以实现对激励器的远程控制。

基于VMD和MPC的电动汽车-火电机组联合调频控制

合理的调频指令分配策略以及有效的指令跟踪控制方法是利用集群电动汽车(aggregate electric vehicle,AEV)联合火电机组开展调频控制、改善调频质量、提高调频经济性的关键。基于此,文中提出基于变分模态分解(variational mode decomposition,VMD)和双层模型预测控制(model predictive control,MPC)的AEV参与系统调频控制策略。首先,设计AEV联合传统火电机组的频率协调优化控制结构,建立火电机组及负荷频率控制模型,同时将AEV转化为虚拟调频单元,构建在AEV参与下系统单区域多机组负荷频率控制模型;然后,利用VMD将电网调频指令信号分解为含不同频率成分的本征模态函数,整合高频分量作为AEV的调频指令,低频分量作为火电机组群的调频指令,并通过双层MPC分别在AEV和火电机组群内部实现调频指令的优化再分配及跟踪控制;最后,对所提控制策略进行仿真验证。结果表明所提控制策略可实现对系统频率的有效调节,且兼顾了调频的经济性和动态性能。

禽脑脊髓炎病毒Luminex xTAG检测方法的建立

为了建立一种灵敏快速检测禽脑脊髓炎病毒(AEV)的Luminex xTAG技术方法,本试验针对AEV高度保守的VP 1基因设计了1对特异性引物,在上游引物的5′端通过Spacer18间隔添加Tag序列,下游引物的5′端标记生物素,进行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,构建质粒标准品,通过优化反应体系建立Luminex xTAG检测方法。用所建立的Luminex xTAG方法进行特异性、敏感性和重复性试验,并与SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR方法同时对45份脑组织临床样品进行检测。结果显示,所建立AEV Luminex xTAG检测方法与传染性法氏囊病毒、禽传染性贫血病病毒、新城疫病毒、禽流感病毒、传染性喉气管炎病毒、禽白血病病毒、马立克病毒和禽传染性支气管炎病毒无交叉反应;灵敏度可达1×10^(2)copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于4.0%;对45份临床样品的Luminex xTAG检测结果与SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测结果一致。结果表明,所建立的AEV Luminex xTAG检测方法特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好,可用于AEV的快速检测。

具有一般非线性项的拟线性Choquard方程的基态解

研究了一类广义拟线性Choquard方程基态解的存在性问题,利用变量替换与变分方法,证明了该方程基态解的存在性定理.所得结果推广并补充了原有结论.

R^(4)中一类Kirchhoff方程的高能量径向解的存在性

为解决物理领域中用来描述弹性弦在横向振动过程中弦长变化模型的求解问题,基于变分方法,研究了一类具有一般非线性项的a+b型Kirchhoff方程高能量径向解的存在性问题。通过选择合适的变分框架,首先,一方面给出了一般非线性项f满足的一般性条件且给出了满足条件的具体例子,另一方面通过放缩构造了与该Kirchhoff方程有关的两个能量泛函;其次,借助Pohožaev恒等式来构造具有特殊性质的序列以解决Palais-Smale序列的有界性问题;最后,利用对称山路引理建立该类Kirchhoff方程高能量径向解的存在性结果。

A Nonexistence Result for Choquard-Type Hamiltonian System

In this article, we establish a nonexistence result of nontrivial non-negative solutions for the following Choquard-type Hamiltonian system by the Pohožaev identity , when , , , , , and , where and denotes the convolution in .

禽脑脊髓炎病毒YL株的分离鉴定

为弄清陕西杨凌某鸡场种鸡产蛋量突然下降,种蛋孵化率降低,死雏、弱雏增多的原因,通过采集发病鸡脑组织进行SPF鸡胚连续传代、琼脂扩散试验（AGP）、人工感染试验、VP1基因的克隆及序列分析等对病原进行鉴定.结果显示,分离毒YL株与AEV标准阳性血清之间出现特异的沉淀线;在人工感染试验中可见雏鸡有震颤、共济失调等症状,剖检大脑有轻微的水肿和软化;成功克隆出AEV YL株的VP1基因,全长810 bp,编码270个氨基酸残基;与AEV参考毒株VP1基因核苷酸同源性92.0％～99.8％,氨基酸同源性为89.3％～99.3％;进化树分析表明,YL株与1143株、L2Z株和SX株亲缘关系较近,与VR株、HB株、SD株和NH937株亲缘关系较远.结果表明,分离毒株为禽脑脊髓炎病毒,与AEV已知毒株在进化方面存在一定程度的差异.

品牌个性的结构性研究

市场竞争的加剧以及产品同质化的现象的增强使得企业和消费者的品牌观念日益增强,建立鲜明独特的品牌个性是企业满足顾客需求、达到顾客满意建立核心竞争优势的关键因素。然而到目前为止,理论界对于品牌个性的研究仅限于品牌个性的人格化构成维度,针对这种情况本文以顾客的视角,从品牌个性带给顾客的属性利益、情感性利益和自我价值利益的角度出发,研究品牌个性核心价值的层次结构,为企业的发展与实践有所启发与帮助。

禽脑脊髓炎的病理学研究

禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ，ＡＥ）是由禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）引起的一种主要侵害雏鸡的传染病，本病已遍及全国各地〔１〕，尤其在山东时有本病发生的报道〔２～５〕，本病已成为危害养鸡业的主要传染病之一。但有关本病发病机理及组...

用斑点杂交及原位杂交技术检测鸡白细胞介素1β产生细胞

根据已报道的 6种哺乳动物白细胞介素 1β(IL - 1β)的 c DNA序列保守区设计合成一段互补 DNA。制备[γ- 32 P]ATP标记的 DNA探针 ,采用斑点杂交及原位杂交技术对感染了禽脑脊髓炎病毒 (AEV)的鸡脑组织中 IL- 1βm RNA进行检测。结果表明杂交反应均呈阳性。

禽脑脊髓炎病毒VP1基因的克隆与序列分析

为了揭示禽脑脊髓炎病毒（AEV）的分子特性，使用RT-PCR方法扩增出AEVsD和HB分离株和1株标准鸡胚适应株VR株的VP1基因，克隆到载体pBluescriptSK（-）上，然后进行序列测定，并对这3株AEV的VP1基因与已发表的AEV活疫苗株1143株和强毒株L2Z株进行比较。结果，发现它们之间核苷酸和氨基酸的同源性分别为94．2％～99．9％和98．9％～100．0％。SD株和HB株与鸡胚适应毒VR株的VP1蛋白氨基酸序列完全相同。与1143株和L2Z株比较，VP1蛋白仅存在2～3个氨基酸的差异。结果表明，在不同AEV毒株中，VP1蛋白高度保守，存在极低的抗原性差异，不同AEV毒株的毒力和组织亲嗜性可能与VP1基因无关，VP1蛋白可作为防制AEV潜在的亚单位疫苗和诊断抗原。

禽脑脊髓炎病毒结构蛋白VP3基因真核表达载体的构建及其免疫

根据已发表的禽脑脊髓炎病毒(AEV)1 143株结构蛋白VP 3基因的序列,设计1对特异性引物,经PCR从原核表达载体pET-VP 3中扩增出VP 3基因片段,克隆入T载体经测序证明所扩增的序列正确。从T载体切下目的片段,定向克隆入pcDNA 3.1(+)载体,转化大肠杆菌DH 5α,鉴定后大量提取质粒,转染CO S-1细胞,用间接免疫荧光检测到目的基因的表达。将重组载体对BALB/c小鼠进行免疫,结果2次免疫后就检测到特异性抗体,表明该载体在动物体内有较高的表达水平,可用于动物体内免疫,为进一步研究AEV的核酸疫苗打下了基础。

稻草补饲百脉根瘤胃体外发酵及微生物蛋白合成的组合效应研究

研究稻草(RS)添补百脉根(LC)的瘤胃体外发酵及微生物蛋白(MCP)合成的组合效应(AEV)。采用单因子试验设计,体外批次培养48 h,研究RS分别添补0%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%与100%LC(LC0、LC10、LC20、LC30、LC40、LC50、LC60、LC70、LC80、LC90与LC100)在3、6、12、24、36与48 h的瘤胃体外发酵参数,并计算出MCP的AEV。各组各时间点的pH 6.64～6.99,每100 mL瘤胃液中NH3-N 2.98～28.74 mg,MCP 1.18～5.87 mg/mL,AEV 0.642 7%～7.568 3%。各组所测定时间点的平均AEV自高到低的排序为:LC30(3.584 4)、LC40(3.396 4)、LC50(2.890 2)、LC60(2.092 7)、LC20(1.886 9)、LC10(1.023 2)、LC70(0.902 4)、LC80(0.252 6)与LC90(-0.074 4),括号中的数字为AEV,单位为%。本研究表明RS补饲30%LC瘤胃体外发酵MCP的组合效应最大。

我国禽脑脊髓炎病毒分离株全基因组的测定

测定了我国禽脑脊髓炎病毒(avianencephalomyelitisvirus,AEV)分离株L2Z株的全基因组核苷酸序列。该病毒株的3′和5′非编码区核苷酸序列用3′和5′RACE(cDNA末端快速扩增)法获得。基因组全长为7059个核苷酸残基,包括494个核苷酸残基的5′非编码区、6402个核苷酸残基的开放阅读框和136个核苷酸残基的3′非编码区及poly(A)尾巴。与已发表的AEV疫苗株1143的基因组序列比较发现,它们之间核苷酸和氨基酸的同源性分别为98%和97 6%。结构蛋白(VP1～VP4)中,主要宿主保护性免疫原蛋白VP1氨基酸之间差异较小。与小RNA病毒科其它病毒属相比,在非结构蛋白3D中,预测的8个RNA依赖性RNA聚合酶主要结构域中的4个高度保守。从而进一步确认了AEV的分子特性。

压气条件下泥膜进气值测量试验研究

在压气条件下,进气是泥膜透气失效的起始点。为测量并研究泥膜在气压下的进气压力值(进气值),通过自制的试验装置,在不同压气条件下对3种泥膜进行进气值测量试验。试验结果表明:1)由闭气排水与固结排水的差值可以辨别泥膜是否进气,得到泥膜进气值; 2)采用泥膜特征孔径D_(90)/2代入推导公式可近似计算泥膜进气值; 3)泥膜在不同压气条件下进气值不同,增压速率越低,泥膜进气值越大; 4)在较快和较慢的增压速率下存在进气值变化趋于稳定的现象,最大进气值为最小值的2倍以上。

单抗直接Dot-ELISA检测禽脑脊髓炎病毒抗原

本研究在已制备的 AEV单抗基础上建立了检测 AEV抗原的直接 Dot- ELISA方法。该方法对 AEV最低检出量为 8.0 3μg.m L-1。人工感染 1日龄 SPF鸡 ,取临床发病鸡 (6～ 1 3日龄 )相应病料 ,各病料样本病原阳性检出率分别为 :脑 98% ,胰 94% ,十二指肠 80 % ,腺胃 85%。对 1 0 0份临床自然发病鸡病料检测 ,阳性检出率为 90 %。对 1 0份 AEV病原分离阳性样品检测阳性率为 1 0 0 %。

禽脑脊髓炎病毒的鉴定

对分离到的AEV毒株进行氯仿、乙醚、温度敏感性试验等理化性质及血凝性质的鉴定,表明该毒株理化性质稳定,无血凝性;电镜下观察接毒鸡胚的超薄切片可看到AEV病毒颗粒,大小在25-30 nm。参照 AEV的基因序列设计了一对引物,对该病毒进行了特异性扩增,得到了目的片段。证明该分离病毒为AEV毒株,暂定名为AEV-HI)。

禽脑脊髓炎病毒在BGM-70传代细胞系上培养特性的初步研究

进行了 禽脑脊 髓炎病 毒 Ｌ２ Ｚ 株在 Ｂ Ｇ Ｍ７０ 传 代 细胞 系上 培 养特 性的 研 究。该 毒 株 在细胞上盲 传３ 代后 能产生明 显的细 胞病变，并 且传代 过程中 细胞 病变 稳定 地出 现。利 用琼 脂扩 散试验、免疫 荧光试 验、免疫酶 试验及 负染电镜 观察 研究 表 明， Ｌ２ Ｚ 株 接种 Ｂ Ｇ Ｍ７０ 细 胞具 有良 好 的增殖特性 ，并且病 毒是在细 胞浆中 进行复制 。该研究 报道禽 脑脊髓 炎病 毒能 成功 地在 传代 细胞 系上培养增 殖。

禽脑脊髓炎病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

利用禽脑脊髓炎病毒(Avian encephalomyelitis virus,AEV)YBF02株VPI基因序列设计一对特异性引物,通过对反应体系条件的确定和阳性质粒标准曲线的建立,建立了用于快速检测AEV含量的SYBR Green I荧光定量RT-PCR。结果显示:该方法能特异性地检测AEV YBF02株,且与其他禽类病毒无交叉反应;敏感性试验表明,该方法最低能检出10拷贝的AEV RNA模板,为普通PCR的100倍;使用该方法和鸡胚半数感染量(EID50)法对样品进行检测,二者具有良好的线性关系,且重复性试验的变异系数均小于4%。研究表明,建立的SYBR Green I荧光定量RT-PCR敏感性高、特异性强、重复性好,为AEV含量的快速检测提供了一种新的技术手段。