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AFB1抑制NrF2信号通路诱导牛乳腺上皮细胞抗氧化应激
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作者 任晓丽 皇甫和平 +3 位作者 杨东辉 宋予震 王俊东 石冬梅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2287-2292,共6页
利用不同浓度的黄曲霉毒素B1(aflatoxinB1,AFB1)作用于牛乳腺上皮细胞(MAC-T)培养24 h后,通过相关检测试剂盒检测细胞内氧化损伤标志物活性氧(reacive oxygen species,ROS)、总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧... 利用不同浓度的黄曲霉毒素B1(aflatoxinB1,AFB1)作用于牛乳腺上皮细胞(MAC-T)培养24 h后,通过相关检测试剂盒检测细胞内氧化损伤标志物活性氧(reacive oxygen species,ROS)、总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、总抗氧化能力(total antioxidation capability,T-AOC)的活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerasechain reaction,RT-qPCR)方法检测核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,NrF2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和NAD(P)H醌氧化还原酶(NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO-1)的mRNA相对表达水平;利用蛋白免疫印迹(Western blot)试验检测NrF-2、HO-1和NQO-1的蛋白相对表达水平。结果显示,与0μmol/L相比,10,20μmol/L AFB1处理组显著升高MAC-T细胞内ROS和MDA的含量,降低SOD、T-AOC和GSH-Px的活性。RT-qPCR结果显示,与0μmol/L组相比,不同浓度AFB1组显著下调MAC-T细胞中NrF2、HO-1、NQO-1的mRNA表达水平。Western blot结果显示,10μmol/L AFB1组MAC-T细胞中NrF2、HO-1、NQO-1的蛋白表达水平显著低于0μmol/L组。结果表明,AFB1通过抑制NrF2信号通路诱导牛乳腺上皮(MAC-T)细胞发生氧化应激性损伤。 展开更多
关键词 afb1 MAC-T 抗氧化功能 NrF-2信号通路
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Molecularly Imprinted Polymers for the Detection of Food Toxins: A Minireview
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作者 Shivender Singh Saini Anupreet Kaur 《Advances in Nanoparticles》 2013年第1期60-65,共6页
Food contamination from natural or anthropogenic sources poses severe risks to human health. It is now largely accepted that continuous exposure to low doses of food Toxins such as mycotoxins, phycotoxins can be relat... Food contamination from natural or anthropogenic sources poses severe risks to human health. It is now largely accepted that continuous exposure to low doses of food Toxins such as mycotoxins, phycotoxins can be related to several chronic diseases, including some type of cancer and serious hormonal dysfunctions. Contemporary analytical methods have the sensitivity required for contamination detection and quantification, but direct application of these methods on real samples can be rarely performed because of matrix complexity. Thus, selective analytical methods, relying on intelligent functional materials are needed. Recent years have seen the increasing use of molecular imprinted polymers in contaminant analysis in food because these materials seem to be particularly suitable for applications where analyte selectivity is essential. It offers several advantages to the agrofood industry in areas such as analysis, sensoring, extraction, or preconcentration of components. It has the potential of becoming a tool for acquiring truly simple, rapid, and robust direct measurements. 展开更多
关键词 afb1 afb2 AFM1 WHO EPA SPE HPLC
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硒对黄曲霉毒素B_1暴露肉鸡肝脏氧化损伤的保护作用 被引量:12
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作者 芮小丽 陈思潭 李春梅 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期2281-2288,共8页
本试验旨在研究硒(Se)对黄曲霉毒素B1(AFB1)毒性的缓解作用及其可能机制。选取1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡90只,随机分为3组(每组3个重复,每个重复10只):基础饲粮组(对照组)、基础饲粮+100μg/kg AFB1组(AFB1组)、基础饲粮+100μg/kg AFB1+... 本试验旨在研究硒(Se)对黄曲霉毒素B1(AFB1)毒性的缓解作用及其可能机制。选取1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡90只,随机分为3组(每组3个重复,每个重复10只):基础饲粮组(对照组)、基础饲粮+100μg/kg AFB1组(AFB1组)、基础饲粮+100μg/kg AFB1+0.3 mg/kg Se组(Se组),试验期为42 d。结果表明:1)与对照组相比,AFB1组肉鸡肝脏重显著降低(P<0.05);血清谷丙转氨酶活性显著升高(P<0.05);肝脏丙二醛和过氧化氢含量显著升高(P<0.05),总超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽含量和谷胱甘肽过氧物酶活性则显著降低(P<0.05);肝脏组织病理切片观察到多处出血位点及肝细胞坏死和萎缩;免疫组织化学和蛋白质印迹分析发现核转录因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白在肝细胞核内表达显著增加(P<0.05),凋亡因子含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)在AFB1组胞核内表达。2)在100μg/kg AFB1饲粮中加入Se能在一定程度上缓解AFB1引起的肉鸡肝功能紊乱和肝脏氧化应激损伤,并使肝细胞胞核Nrf2表达水平显著下降(P<0.05)。由此可见,Se能够缓解AFB1引起的肉鸡肝脏功能紊乱和氧化损伤,增加肉鸡抗氧化能力。 展开更多
关键词 afb1 肝脏 氧化应激 NRF2 肉鸡
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高效液相色谱法同时检测粮食中常见8种真菌毒素的含量 被引量:57
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作者 黎睿 谢刚 王松雪 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期206-210,共5页
建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法同时测定粮食中黄曲霉毒素B1(aflatoxins,AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)、玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)、呕吐毒素(deoxyniv... 建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法同时测定粮食中黄曲霉毒素B1(aflatoxins,AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)、玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)、呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的检测方法。样品经乙腈-水提取后,用免疫亲和柱净化,Agilent Elipse Plus C18(100 mm×4 mm,3.5μm)色谱柱分离,以甲醇-乙腈-水-乙酸为流动相,流速1 m L/min,柱温35℃,进样量20μL,检测系统为可变波长检测器串联光化学衍生器串联荧光检测器。根据信噪比为3的峰响应值,确定各真菌毒素的检出限为:AFB1 0.446 ng/m L、AFB2 0.152 ng/m L、AFG1 0.523 ng/m L、AFG2 0.334 ng/m L、ZEN 7 ng/m L、OTA 0.7 ng/m L、DON 200 ng/m L、T-2毒素100 ng/m L。样品中各真菌毒素的平均加标回收率,玉米为80.0%~104.5%,小麦为83.2%~102.8%,方法精密度为2.6%~10.2%。从样品前处理到分析整个过程耗时约2 h。本方法简便、快速、灵敏度高,适用于粮食中多种真菌毒素的快速测定。 展开更多
关键词 粮食 黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 玉米赤霉烯酮 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 T-2毒素 赭曲霉毒素A
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LED激发荧光光谱法快速测定玉米粉中的黄曲霉毒素B1 被引量:2
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作者 杨卓燃 李龙 +4 位作者 李超逸 吴琼 王芳 王文明 杜一平 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1779-1783,共5页
以LED灯为激发光源,小型光纤光谱仪为检测设备,构建了LED激发的荧光光谱检测装置,并基于Hg^(2+)对黄曲霉毒素B1(AFB1)的荧光增强效应,建立了AFB1的荧光光谱快速定量分析方法。研究确定了激发波长为370 nm,荧光检测波长为443.2 nm,对Hg^(... 以LED灯为激发光源,小型光纤光谱仪为检测设备,构建了LED激发的荧光光谱检测装置,并基于Hg^(2+)对黄曲霉毒素B1(AFB1)的荧光增强效应,建立了AFB1的荧光光谱快速定量分析方法。研究确定了激发波长为370 nm,荧光检测波长为443.2 nm,对Hg^(2+)与AFB1反应的pH值、溶剂配比、反应时间等条件进行优化,同时探究了方法的干扰因素。在优化条件下,AFB1-Hg^(2+)体系的荧光发射强度与AFB1的质量浓度在3~90μg/L范围内呈线性关系,相关系数r^(2)=0.996,检出限为0.913μg/L。将该方法用于两种玉米粉中AFB1的检测,其加标回收率为84.1%~107%,相对标准偏差(RSD)为1.1%~7.1%。该研究为AFB1的快速检测提供了一种新的具有较高灵敏度、精密度的快速检测方法,有望在现场快速检测中得到应用。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1(afb1) LED激发荧光光谱法 Hg^(2+) 快速检测
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Al_2O_3-柱撑蒙脱石纳米微粒对AFB_1致Caco-2细胞毒性的保护作用研究 被引量:2
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作者 冯一秦 许梓荣 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2010年第3期45-48,共4页
本研究采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法研究了AFB1和AMN在不同添加剂量和暴露时间下对Caco-2细胞增殖的影响,同时对Caco-2细胞用作研究AFB1转运和吸收模型的可行性进行初步评估。结果表明:在AFB1添加剂量为250、500、750、1000μg/L和暴露... 本研究采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法研究了AFB1和AMN在不同添加剂量和暴露时间下对Caco-2细胞增殖的影响,同时对Caco-2细胞用作研究AFB1转运和吸收模型的可行性进行初步评估。结果表明:在AFB1添加剂量为250、500、750、1000μg/L和暴露时间为12、24、36、48h的情况下,与阴性对照组(培养基)相比,AFB1均显著降低了Caco-2细胞的相对存活率(P<0.05),且呈一定的剂量和时间效应关系。在AMN添加剂量为0.25%、0.5%、0.75%、1.0%和暴露时间为24、48、72h的情况下,与阴性对照组(培养基)相比,AMN材料本身虽然也显著降低了Caco-2细胞的相对存活率(P<0.05),但Caco-2细胞的相对存活率均在88.76%以上,毒性级别仅为1级。在AMN不同添加剂量和暴露时间为48h的情况下,与阳性对照组(900μg/LAFB1)相比,AMN均显著提高了Caco-2细胞的相对存活率(P<0.05)。结果提示,AMN能有效吸附AFB1并显著降低其对Caco-2细胞的毒害;AFB1对Caco-2细胞具有显著的增殖毒性,Caco-2细胞不宜直接用作研究AFB1转运和吸收的体外模型。 展开更多
关键词 afb1 CACO-2 Al2O3-柱撑蒙脱石 纳米微粒
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HPLC法同时测定食品中的4种黄曲霉毒素 被引量:13
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作者 高志杰 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第10期1803-1804,共2页
目的:建立测定食品中的4种黄曲霉毒素含量的HPLC方法。方法:采用高效液相色谱仪(附荧光检测器),Zor-bax Zebax-C18色谱柱(250 mm*4.6 mm,5μm),流动相为水和乙腈,流速1.0 ml/min,激发波长:360 nm,发射波长:440 nm作为分析条件,以正己烷... 目的:建立测定食品中的4种黄曲霉毒素含量的HPLC方法。方法:采用高效液相色谱仪(附荧光检测器),Zor-bax Zebax-C18色谱柱(250 mm*4.6 mm,5μm),流动相为水和乙腈,流速1.0 ml/min,激发波长:360 nm,发射波长:440 nm作为分析条件,以正己烷和三氟乙酸为衍生剂来测定食品中的4种黄曲霉毒素含量。结果:黄曲霉毒素AFB1、AFG1在0~100μg/kg范围内线性关系良好,AFB2、AFG2在0~25μg/kg范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999;4种黄曲霉毒素回收率均在75%~104%之间;按取样量20 g计算,则AFB1、AFB2、AFG1、AFG2在样品中的检出限分别为0.20、0.05、0.20、0.05μg/kg。结论:该法具有准确、灵敏、重复性好等优点,适合食品中的4种黄曲霉毒素含量的检测。 展开更多
关键词 食品 黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2 高效液相色谱法(HPLC)
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基于肠道微生物解析红鱼干中黄曲霉B1和T-2毒素对小鼠的毒效应差异
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作者 叶林 张玮芸 +3 位作者 王雅玲 孙力军 房志家 励建荣 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第4期131-140,共10页
为探明霉变红鱼干中黄曲霉B1(AFB1)和T-2毒素(T-2)污染的潜在危害与肠道微生物的关联性,采用灌胃法对小鼠染毒,采用Illumina-MiSeq高通量测序技术分析微生物群落结构和组成变化,采用血液分析仪测定小鼠红细胞与白细胞数量以及血红蛋白浓... 为探明霉变红鱼干中黄曲霉B1(AFB1)和T-2毒素(T-2)污染的潜在危害与肠道微生物的关联性,采用灌胃法对小鼠染毒,采用Illumina-MiSeq高通量测序技术分析微生物群落结构和组成变化,采用血液分析仪测定小鼠红细胞与白细胞数量以及血红蛋白浓度,采用酶标法测定小鼠2种肝功能酶活(谷草转氨酶、谷丙转氨酶),并分析肠道菌群变化与这些潜在危害的关联性。结果表明,AFB1能显著提高拟杆菌门的普雷沃氏菌科、鼠杆菌科、厚壁菌门的梭菌科的相对丰度,降低厚壁菌门的乳杆菌科与变形菌门的产碱杆菌科的相对丰度;而T-2显著增加厚壁菌门的乳杆菌科丰度,显著降低鼠杆菌科、产碱杆菌科丰度,这些菌群的丰度变化均被证实与肝炎、血液与免疫疾病相关联。AFB1毒素组显著降低小鼠白细胞数量(P<0.05),而红细胞数量与血红蛋白变化不显著(P>0.05),说明AFB1具有免疫毒性;T-2引起小鼠3项血液指标全部显著降低(P<0.05),说明T-2具有较强的免疫毒性与血液毒性。AFB1毒素组的小鼠肝脏内谷草转氨酶(AST)/谷丙转氨酶(ALT)的比值大于1,表现明显的肝炎症状;而T-2毒素组小鼠肝脏的AST/ALT比值小于1,肝损伤不明显。红鱼干中AFB1和T-2毒素引起肠道菌群丰度变化与其表现出的肝炎、血液毒性与免疫毒性相关,说明鱼干中AFB1与T-2残留危害还可能与诱变肠道微生物有关。 展开更多
关键词 红鱼干 afb1 T-2毒素 特殊毒性 肠道菌群
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生长素调控极性运输载体PIN2质膜丰度与降解 被引量:1
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作者 付伟 严旭 +1 位作者 王超 潘建伟 《浙江师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第3期325-330,共6页
主要观察了外源生长素长时间(8 h)处理对拟南芥生长素极性输出载体PIN2-GFP质膜丰度的影响,低温、KCN处理和生长素受体突变对生长素调控质膜PIN2-GFP丰度的影响,以及液泡H+-ATPase抑制剂ConA对野生型和生长素受体四突变体tir1afb1,2,3... 主要观察了外源生长素长时间(8 h)处理对拟南芥生长素极性输出载体PIN2-GFP质膜丰度的影响,低温、KCN处理和生长素受体突变对生长素调控质膜PIN2-GFP丰度的影响,以及液泡H+-ATPase抑制剂ConA对野生型和生长素受体四突变体tir1afb1,2,3液泡中PIN2-GFP积累的影响.结果表明:外源生长素通过其受体TIR1/AFB介导的信号途径下调质膜PIN2-GFP的丰度,促进PIN2-GFP的内吞、胞内运输和液泡降解.暗示生长素通过TIR1/AFB介导的信号途径反馈调控质膜PIN2-GFP的水平,从而阻止了胞内生长素的过多输出. 展开更多
关键词 拟南芥 生长素 TIR1/AFB PIN2 内吞 降解
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HPLC-FLD法同时测定直服丹参粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2
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作者 阳文武 王文婷 +1 位作者 张华 熊有明 《中国民族民间医药》 2021年第20期48-52,共5页
目的:建立HPLC-FLD同时测定直服丹参粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的方法。方法:样品70%甲醇提取液的分析采用Inertsustain C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温:35℃,以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)为流动相,流速为1.0 mL/min,激... 目的:建立HPLC-FLD同时测定直服丹参粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的方法。方法:样品70%甲醇提取液的分析采用Inertsustain C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温:35℃,以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)为流动相,流速为1.0 mL/min,激发波长为360 nm,发射波长450 nm。结果:黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2线性范围分别为9.3~46.5 pg、3.0~15.0 pg、9.3~46.5 pg、3.5~17.5 pg,平均回收率分别为95.1%、90.2%、95.4%、93.3%,RSD分别为1.7%、2.2%、1.6%、1.3%,检测限分别为2.0、1.0、2.0、1.0 ng/kg。50批样品中有9批次检出黄曲霉毒素,检出率为18.0%,均符合相关参考限量标准。结论:该方法简便准确、重复性好,可用于丹参粉的质量控制。 展开更多
关键词 丹参粉 黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 高效液相色谱-荧光法
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PC-B2对AFB_1致肝细胞DNA损伤及修复影响 被引量:3
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作者 马玲玲 范秋玉 +5 位作者 肖德强 刘丹丹 邓祥发 贾亮 黄东萍 鲁力 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期925-927,共3页
目的探讨原花青素B2(PC-B2)对黄曲霉毒素B1(AFB1)所致人胚胎肝细胞(L-02)DNA损伤及修复基因表达影响。方法取对数期生长良好的L-02细胞随机分为空白对照组、溶剂对照组、PC-B2处理组(3、10、30μg/m L)、AFB1染毒组(10、20、30、40μg/m... 目的探讨原花青素B2(PC-B2)对黄曲霉毒素B1(AFB1)所致人胚胎肝细胞(L-02)DNA损伤及修复基因表达影响。方法取对数期生长良好的L-02细胞随机分为空白对照组、溶剂对照组、PC-B2处理组(3、10、30μg/m L)、AFB1染毒组(10、20、30、40μg/m L)和PC-B2干预组(3、10、30μg/m L PC-B2+30μg/m L AFB1),利用噻唑蓝法、酶联免疫吸附法和荧光定量PCR技术分别测定细胞增殖活力、细胞上清液8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)含量及细胞h OGG1基因表达水平。结果 AFB1可明显抑制L-02细胞增殖活力(P<0.05),呈剂量-效应关系;与溶剂对照组比较,30μg/m L AFB1组细胞活力[(69.9±2.46)%]明显降低(P<0.05),细胞上清中8-OHd G含量[(2.779±0.089)ng/m L]明显升高(P<0.05);与30μg/m L AFB1组比较,3、10、30μg/m L PC-B2干预组细胞活力[分别为(70.6±2.67)%、(69.7±1.94)%、(82.4±1.58)%]明显升高(P<0.05),细胞上清中8-OHd G含量[分别为(2.550±0.078)、(2.376±0.109)、(1.873±0.065)ng/m L]明显降低(P<0.05);与溶剂对照组比较,30μg/m L AFB1组L-02细胞h OGG1基因表达减少(P<0.05);与30μg/m L AFB1组比较,PC-B2干预组L-02细胞h OGG1表达明显升高。结论 PC-B2可提高肝细胞增殖活力,抑制AFB1所致肝细胞DNA损伤,其机制可能与调控修复基因h OGG1表达有关。 展开更多
关键词 原花青素-B2(PC-B2) 黄曲霉毒素B1(afb1) 人胚胎肝细胞(L-02) 8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG) 人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(hOGG1)
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