小麦锈菌AFLP分子标记技术体系的建立

以小麦条锈菌、杆锈菌、叶锈菌的夏孢子为材料,通过DNA提取、酶切、PCR扩增、凝胶电泳等系列程序摸索和优化,建立了锈菌的AFLP分子标记体系如下:40μl酶切体系中采用了EcoRI、TrulI各5U,37℃3h,65℃3h双酶切4μl100ng/μl的DNA;然后加入10μl连接混合液22℃连接3h,16℃10h;连接产物5μl,10μMEcoRI、10μMTru1I预扩引物各1.5μl,PCR反应液25μl,ddH2O17μl进行预扩;预扩产物稀释20倍后取5μl,50ng/μlEcoRI、Tru1I选扩引物各1μl,PCR反应液10μl,ddH2O3μl体系进行选择性扩增,为小麦锈病和其他真菌性病害的分子标记克隆及抗病育种的辅助选择提供了有力工具。

木霉AFLP分子标记技术体系的建立

以摇床培养的木霉菌丝为材料,采用液氮研磨等方法提取到高质量的基因组DNA,能够用于AFLP实验分析,探索和优化酶切-连接反应、预扩增和选择性扩增反应过程中的关键因素,建立了适合木霉AFLP的最佳试验体系和反应条件。利用该技术体系对不同时期保存的菌株及融合子进行AFLP指纹分析,发现不同时期保存的同一菌株指纹相同,融合子指纹兼有亲本菌株的特性。通过对木霉AFLP条件的探索和研究,建立了木霉基因组AFLP反应体系,得到的扩增多态性条带完全能够用于木霉遗传稳定性和多样性分析。

新一代分子标记技术──AFLP

ＡＦＬＰ（Ａｍｐｌｉｆｉｅｄｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）是近年来发展起来的最有效的新一代分子标记技术．本文对ＡＦＬＰ的发生发展、基本原理、反应程序，在植物分子生物学研究中的应用以及方法本身的优缺点进行了介绍和评述．

用AFLP分子标记技术鉴别甘蔗(Saccharum of ficinarum L.)品种

本研究采用AFLP技术 ,从 6 4对引物中筛选出 5对带型分布均匀、多态性丰富且分辨能力强的引物 ,对两个在生产上广泛推广应用的甘蔗品种的AFLP指纹图谱进行分析 ,计算了两品种间的遗传相似性和遗传距离。结果表明 ,5对引物在 2个甘蔗品种间均存在显著的差异 ,其中多态性位点占总扩增位点的 10 2 % ,区分率达 10 0 %。研究结果对生产上应用AFLP技术鉴定甘蔗品种的真伪性提供了依据。本文对甘蔗AFLP分析体系的关键技术以及银染技术的安全性和可靠性进行了讨论。

AFLP分子标记技术及其在动物学研究中的应用

扩增片段长度多态性技术 (AFLP)基于选择性扩增完全酶切消化后的基因组DNA片段 ,包括酶切与连接、选择性扩增、检测分析等 3个步骤。该技术的运用不需要预知基因组的序列特征 ,具有较高的多态分辨力 ,产生的标记是显性标记 ,可适用于任何来源和各种复杂度的DNA。自AFLP技术问世以来 ,在酶切、扩增体系、检测和分析方法等方面不断得到改进。本文将以线虫、昆虫、鱼类、鸟类、家畜、鼠、人等为例 ,介绍近年来AFLP技术在动物或人的遗传图谱构建和QTL (quantitativetraitloci)定位、生物多样性、性别决定和繁殖行为研究、疾病及疾病诊断研究等上的应用。

AFLP分子标记技术及其应用研究进展

AFLP是新近发展起来的一种DNA指纹技术,该方法重复性好、特异性高、能反映生物基因组的细微变化,在生物遗传多样性研究、品系分析、高密度遗传图谱的构建、微生物分型与鉴定、生态位变化、抗性育种、动物近交系选育、疾病诊断等方面应用广泛。本文简述了AFLP分子标记的基本原理、方法与特点以及在动植物、微生物、生态群落等方面研究中的应用和发展前景。

AFLP分子标记技术在茶树遗传育种研究中的应用

AFLP(Amplified Fragment Length Ploymorphism)是一种实用的,有效的DNA分子标记技术。与RFLP、RAPD相比,AFLP具有在一次实验中可同时观察到大量的限制性片段的优点。本文阐述了AFLP的基本原理,评述了AFLP在茶树遗传育种研究中的应用前景。

AFLP分子标记技术及其在蔬菜遗传育种中的应用进展

扩增片段长度多态性(AFLP)技术是检测DNA多态性的一种分子标记技术。本文介绍了AFLP分子标记技术的基本原理、技术流程及特点,及其在蔬菜遗传与育种中的应用进展,并对其前景进行了展望。

AFLP分子标记技术及其在茶树上的应用

本文介绍了AFLP分子标记技术的基本原理、特点和技术流程。对AFLP分子标记在茶树种质资源鉴定与分类、遗传多样性、亲缘关系的建立和遗传图谱的构建等方面的应用进行了概述,并对其存在的问题和在茶树领域的应用前景进行了分析。

AFLP分子标记技术在家蚕品种改良中的应用

AFLP(AmplifiedFragmentLengthPolymorphism ;AFLP)是近年来发展起来的最有效的新一代分子标记技术。本文阐述了AFLP技术的特点和基本技术步骤 ,评述了AFLP技术在家蚕遗传育种上的应用前景。

几种常用分子标记技术在种子纯度和品种真实性鉴定方面的比较与分析

本文通过对RAPD、RFLP、SSR和AFLP等几种常用的分子标记技术在种子纯度和品种真实性鉴定方面的比较与分析 ,得出SSR是目前能用于种子纯度和品种真实性鉴定的最适宜技术。

分子标记技术及其在果树种质资源研究上的应用

本文对RFLP、RAPD及AFLP等 3种分子标记技术的原理、特点及其在果树品种的鉴定、遗传多样检测、系谱分析、遗传图谱构建等方面应用和进展进行了简要概述 。

分子标记技术及其在作物遗传育种研究上的应用

建立在DNA基础之上的分子标记是继形态标记、细胞标记、生化标记之后发展起来的一种较为理想的遗传标记方法 ,近年来发展迅速。

分子标记技术在咖啡育种上的应用(英文)

主要介绍了AFLP和RAPD 2种分子标记技术以及2种分子标记的优缺点。同时,着重介绍了2种分子标记在咖啡育种上的应用成果。在最后还列举了2个其他的分子标记在咖啡育种上的应用。

桉树的分子标记技术及遗传图谱构建进展

桉树是世界上的三大类速生树种之一,具有重要经济价值。本文着重论述了RFLP、RAPD、AFLP和SSR等4种DNA分子标记技术在桉树上的应用和推广,讨论了基于上述分子标记构建的桉树遗传连锁图的现状及其应用,提出了当前桉树遗传图谱构建存在的问题,进一步探讨了桉树的分子标记技术和遗传图谱构建的发展趋势。

分子标记技术在花生上的应用研究

主要介绍了RFLP、RAPD、SSR、AFLP等四种分子标记技术的原理、方法、特点及其在花生上的应用现状:①RAPD、SSR、AFLP都可以分析花生品种的多样性;②RAPD技术可以对杂交后代进行鉴定;③利用RFLP、RAPD技术绘制花生指纹图谱;④利用分子标记技术研究花生根瘤菌;⑤基于花生的RFLP、RAPD技术的改进。同时,展望了分子标记技术在花生上的应用前景,以期对花生的分子标记育种有所帮助。

分子遗传标记技术在蜻蜓目昆虫研究中的应用

分子生物学技术应用于昆虫系统学研究在近些年发展相当迅速。目前已出现了几十种分子遗传标记。该文简述了酯酶同工酶电泳、核酸序列分析以及AFLP、RAPD、核酸探针等分子生物学技术在蜻蜓目昆虫研究中的应用情况。

新型分子标记―SRAP技术体系优化及应用前景分析

基于PCR的分子标记技术很多,但均因自身缺点限制了发展和应用。一种新兴的分子标记技术-相关序列扩增多态性SRAP(Sequence-RelatedAmplifiedPolymorphism)以其特有的优点得到日益广泛的应用,显示了良好的发展前景。此技术在国外较多应用,但国内利用较少。以西瓜为材料对技术体系各影响因素进行调整,优化反应体系,比较DNA提取方法,调整银染技术,得到很好的扩增效果,同时对SRAP的原理、特点和应用前景进行了介绍。研究表明,SRAP将成为研究领域一个有力的工具。

DNA分子标记技术及其原理

综述几种DNA分子标记技术:RFLP是用限制性内切酶切割不同个体基因组DNA后,含同源序列的酶切片段在长度上的差异,可靠性较高、但操作烦琐,信息含量低;染色体原位杂交是利用特异性核酸片段作探针,直接同染色体DNA片段杂交,在染色体上显示特异DNA,准确、直观,但技术非常复杂;PCR是模仿DNA在生物体内的自然复制过程来扩增DNA片段,安全性好,快速易行;RAPD是以人工合成的碱基顺序随机排列的寡核苷酸单链为引物,对所研究的基因组DNA进行PCR扩增,产生多态性的RAPD片段,可以检测多个基因位点,但不能识别杂合子位点;AFLP指纹技术是在RFLP与RAPD两种指纹技术基础上建立和发展起来的,有较高的稳定性,但对基因组纯度和反应条件要求较高;DNA芯片技术是一种以杂交测序基本理论为基础的新型生物技术,用于测序、基因表达、疾病诊断等,但造价、探针的密度与纯度还有待完善;小卫星DNA一般与RFLP技术结合以获得小卫星DNA指纹图谱,信息含量高,但它在染色体上分布不均匀;微卫星DNA既可用作探针获得指纹图谱,也可通过PCR方法进行微卫星位点多态性分析,但工作量大;ISSR即内部简单重复序列,也是一种新兴的分子标记技术,具有很好的稳定性和多态性。