AFLP法构建人参、西洋参基因组DNA指纹图谱

目的 采用扩增片段长度多态性DNA(AFLP)分子遗传标志技术 ,分析人参、西洋参基因组DNA多态性。方法 人参、西洋参干燥根基因组DNA ,经EcoRI/MseI酶切并与其相应的人工接头连接后 ,使用选择性引物进行PCR扩增。结果 经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 ,成功构建出多态性丰富和重复性好的人参、西洋参DNA指纹图谱。结论 AFLP法有望成为一种独立的切实可行的手段 ,将在人参、西洋参等药用植物的鉴定、生物进化、系统发育研究及指导道地性药材的科学栽培等方面发挥重要作用。

应用AFLP法检测小鼠高、低转移性肝癌细胞株基因组的遗传差异

目的 应用AFLP技术检测小鼠高、低转移性肝癌细胞株基因组的遗传改变 ,以期发现与肿瘤转移相关的DNA片段或基因。方法 肿瘤组织基因组DNA经限制性内切酶酶切 ,连接特异性接头 ,采用 2 5对与接头相识别的引物进行扩增 ,扩增产物经含溴化乙锭的 1 5 %琼脂糖凝胶电泳 ,紫外透视仪分析、照相 ,回收差异片段 ,克隆测序。结果 2 5对引物均扩增出清晰条带 ,2 1对引物扩增结果显示高低转移性肝癌无差异 ,4对引物扩增结果显示二者之间有差异 ,表现为扩增带的有无 ,4条回收片段中的 1条片段克隆成功并测序。结论 AFLP技术适用于肿瘤易感基因的筛选 ,小鼠肝癌的转移可能与基因组不稳定性有关 ,所得差异片段是否与转移相关有待进一步鉴定。