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血清AFP阴性肝癌中EGFR的表达与临床及预后的关系
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作者 徐彤 丁宇 +3 位作者 高双全 方先来 李银珍 廖罗飞 《肝胆外科杂志》 2020年第5期356-359,共4页
目的探讨血清AFP阴性的肝细胞肝癌癌组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达与临床病理特征及预后的关系。方法用BenchMarkXT全自动免疫组化机检测癌组织ECFR表达情况,x检验分析与临床病理参数间的关系,Kap... 目的探讨血清AFP阴性的肝细胞肝癌癌组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达与临床病理特征及预后的关系。方法用BenchMarkXT全自动免疫组化机检测癌组织ECFR表达情况,x检验分析与临床病理参数间的关系,Kaplan-Meier法及Cox风险模型进行生存分析。结果56例血清AFP阴性肝癌患者EGFR阳性率78.6%,肿瘤分级3级的EGFR阳性率高于1级.2级患者,有饮酒史患者的EGFR阳性率高于无饮酒患者,差别均有统计学意义(P=0.003,P=0.005),不同性别年龄组、脉管癌栓、肿瘤大小、血清HBsAg有否阳性、周围肝组织有否肝硬化及有无吸烟史中,EGFR表达率差别均无统计学意义;Kaplan-Meier生存分析发现EGFR阳性表达患者生存率高于阴性患者,差异有统计学意义(P=0.045),Cox多因素分析发现癌组织EGFR的表达及术后化疗是预测肿瘤预后的独立因素(P<0.05)。结论EGFR的阳性表达与肿瘤分级及饮酒史正相关,EGFR的表达在--定程度上影响血清AFP阴性的肝细胞肝癌的发生发展及预后。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 血清afp EGFR 预后
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全反式维甲酸下调肝癌细胞HepG2内AFP结合蛋白的表达 被引量:3
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作者 蒋卫 李朝英 +4 位作者 王珊珊 李慧 刘忠民 张超 李刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1009-1015,共7页
当成人肝细胞发生癌变,甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)在血清中的含量会急剧增加.AFP可与细胞表面AFP结合蛋白(AFP binding protein,ABP)结合促使细胞增殖分化.全反式维甲酸(al1-trans retinoic acid,ATRA)通过与特异性维甲酸受体(ret... 当成人肝细胞发生癌变,甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)在血清中的含量会急剧增加.AFP可与细胞表面AFP结合蛋白(AFP binding protein,ABP)结合促使细胞增殖分化.全反式维甲酸(al1-trans retinoic acid,ATRA)通过与特异性维甲酸受体(retinoic acid receptor,RAR)结合发挥抑制肿瘤生长的作用.Western印迹检测肝癌细胞HepG2和HLE中ABP的表达.结果显示,ABP在HepG2细胞中高表达,在HLE细胞中无明显表达.这一结果与2种细胞AFP的表达情况一致.激光扫描共聚焦显微镜定位分析显示,ABP存在于HepG2细胞胞膜和胞浆,用80μmol/L ATRA处理HepG2细胞4 h,可导致RAR入核增加.用不同浓度(20~160μmol/L)ATRA处理HepG2细胞后培养36 h.Western印迹结果表明,细胞ABP的表达随着ATRA浓度的增高而越少,ATRA浓度达80μmol/L时,HepG2细胞的ABP表达减少,ATRA浓度为160μmol/L时,ABP几乎无表达;加入80μmol/L ATRA后,随着作用时间延长,HepG2细胞ABP表达逐渐减少,当作用时间为12 h时,ABP表达明显减少.结果表明,ABP的表达对ATRA的反应呈剂量和时间依赖性.免疫共沉淀结果表明,AFP、ABP及RAR这3种蛋白质具有互相结合的作用.这些结果为进一步深入研究AFP在肝癌发生过程中的作用机制提供了依据. 展开更多
关键词 HEPG2细胞 甲胎蛋白 甲胎蛋白结合蛋白 维甲酸受体
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肝癌细胞中AFP与RAR相互作用的实验研究 被引量:1
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作者 王珊珊 庞丽君 +3 位作者 欧阳雅博 乔录新 陈德喜 李刚 《北京医学》 CAS 2017年第12期1258-1260,I0002,共4页
目的探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)与维甲酸受体(retinoic acid receptor,RAR)之间的相互作用。方法采用免疫荧光、荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer,Fret)及免疫共沉淀实验验证肝癌细胞系Hep G2和SMMC-... 目的探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)与维甲酸受体(retinoic acid receptor,RAR)之间的相互作用。方法采用免疫荧光、荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer,Fret)及免疫共沉淀实验验证肝癌细胞系Hep G2和SMMC-7721胞质中AFP与RAR之间的相互关系。结果在胞质中AFP与RAR存在共定位现象,Fret结果显示,两者之间存在很高的能量转移效率,分别为21%和19%。免疫共沉淀实验结果显示,胞质中AFP与RAR存在相互作用。结论 AFP与RAR存在相互作用,为后续研究AFP的生物学功能,以及维甲酸的药物疗效提供实验基础。 展开更多
关键词 甲胎蛋白 维甲酸受体 免疫共沉淀
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血清Eph-A5、AFP、hCG及CK水平在前置胎盘患者中的变化及其意义 被引量:10
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作者 杨琳 李慧敏 +1 位作者 朱艳 吉莉琴 《中国妇幼健康研究》 2018年第7期898-901,共4页
目的探讨前置胎盘患者血清中酪氨酸激酶受体家族中促红细胞生成素产生肝细胞受体(Eph)-A5、甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)及肌酸激酶(CK)的水平变化及其意义。方法选取2014年1月至2017年1月陕西省核工业二一五医院产科确诊的... 目的探讨前置胎盘患者血清中酪氨酸激酶受体家族中促红细胞生成素产生肝细胞受体(Eph)-A5、甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)及肌酸激酶(CK)的水平变化及其意义。方法选取2014年1月至2017年1月陕西省核工业二一五医院产科确诊的前置胎盘患者62例(病例组),选取同期正常妊娠妇女60例(对照组),检测两组的血清Eph-A5、AFP、hCG及CK水平并进行对比分析。结果病例组的血清AFP、hCG及CK水平显著的高于对照组(t值分别为7.38、13.19、5.47,均P<0.05),病例组的血清Eph-A5水平显著的低于对照组(t=30.81,P<0.05);边缘型前置胎盘、部分前置胎盘、中央型前置胎盘的血清AFP、hCG、CK、Eph-A5水平组间比较,差异均不具有统计学意义(F值分别为2.20、3.12、2.92、3.32,均P>0.05);发生胎盘植入的前置胎盘患者的血清AFP、hCG、CK水平显著高于未发生胎盘植入的前置胎盘患者(t值分别为6.45、9.67、3.45,均P<0.05);发生胎盘植入的前置胎盘患者的血清Eph-A5水平显著低于未发生胎盘植入的前置胎盘患者(t=9.40,P<0.05)。结论前置胎盘患者的血清AFP、hCG、CK水平显著高、Eph-A5水平降低;发生胎盘植入的前置胎盘患者的血清AFP、hCG、CK水平升高、Eph-A5降低更加明显。 展开更多
关键词 前置胎盘 促红细胞生成素产生肝细胞受体A5 甲胎蛋白 人绒毛膜促性腺激素 肌酸激酶
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甲胎蛋白受体的性质及其所介导的cAMP-PKA信号转导途径 被引量:1
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作者 李孟森 李平风 +2 位作者 贺师鹏 杜国光 李刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期101-106,共6页
研究HeLa细胞膜上甲胎蛋白 (alpha fetoprotein ,AFP)受体的存在情况及其介导的信号转导 .先用Na[12 5I]标记AFP ;标记的AFP和培养的HeLa细胞结合 ,Scatchard法和受体 配体结合法分析受体数目 ;再用放射免疫结合法分析在百日咳毒素 (pe... 研究HeLa细胞膜上甲胎蛋白 (alpha fetoprotein ,AFP)受体的存在情况及其介导的信号转导 .先用Na[12 5I]标记AFP ;标记的AFP和培养的HeLa细胞结合 ,Scatchard法和受体 配体结合法分析受体数目 ;再用放射免疫结合法分析在百日咳毒素 (pertussistoxin ,PTX)预处理前后AFP对细胞内环腺苷酸 (cAMP)浓度及细胞内蛋白激酶A(proteinkinaseA ,PKA)活性变化的影响 .在HeLa细胞膜表面存在 2种不同解离平衡常数 (Kd)的AFP受体 ,Kd1=5 2pmol L(2 10 0位点 细胞 ) ;Kd2 =2 3nmol L (114 0 0位点 细胞 ) .在AFP(2 0mg L)作用下 ,HeLa细胞内cAMP浓度变化及PKA活性的改变为与对照组比较 ,用PTX预处理前cAMP浓度升高 2 6 7% ,PKA活性增高 10 3 2 % ;用PTX预处理后升高 86 % ,PKA活性增高 2 5 3% .抗甲胎蛋白单克隆抗体可阻断AFP对细胞cAMP浓度和PKA活性的影响 .结果证明 ,在HeLa细胞膜上有 2种不同解离平衡常数的甲胎蛋白受体存在 ,受体有可能通过cAMP PKA途径介导信号转导 . 展开更多
关键词 甲胎蛋白 受体 信号转导 CAMP-PKA
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受体介导甲胎蛋白对NIH3T3细胞增殖的促进作用 被引量:1
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作者 李孟森 李平风 +2 位作者 贺师鹏 杜国光 李刚 《海南医学院学报》 CAS 2003年第2期72-77,共6页
目的:探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促新生细胞增殖作用的分子机理。方法:从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的NIH3T3细胞;用3H-TdR参入法观察AFP对细胞DNA合成的影响以及放射受体分析法分析NIH3T3细胞膜表面AFP受体分布;观察... 目的:探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促新生细胞增殖作用的分子机理。方法:从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的NIH3T3细胞;用3H-TdR参入法观察AFP对细胞DNA合成的影响以及放射受体分析法分析NIH3T3细胞膜表面AFP受体分布;观察在AFP作用下细胞内的第二信使物质环磷酸腺苷(cAMP)浓度及依赖cAMP激活的蛋白激酶A(PKA)活性的改变;Westernblot分析AFP对增殖相关的P21ras表达的影响。结果:10~80mg/L的AFP对NIH3T3细胞的DNA合成有明显的促进作用,与对照组比较最大增幅为121.9%;在NIH3T3细胞膜表面存在2种不同解离平衡常数(KD)的AFP受体,KD1=2.722nmol/L(12810位点/细胞);KD2=89.305nmol/L(119700位点/细胞);AFP能显著提高NIH3T3细胞内的cAMP浓度及PKA活性;对P21ras的表达也有明显的促进作用。结论:AFP促NIH3T3细胞增殖是通过细胞膜表面受体介导,经跨膜cAMP-PKA信号转导途径,影响基因表达来实现的。 展开更多
关键词 受体介导 甲胎蛋白 NIH3T3细胞增殖 促进作用 肿瘤细胞增殖 新生细胞增殖
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甲胎蛋白携带药物靶向治疗肿瘤 被引量:1
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作者 林波 王秋交 李孟森 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期603-608,共6页
甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)是一种在胎儿发育时期高表达的蛋白质,它又是一种穿梭蛋白质,能够将营养物质输送给胚胎细胞。相似的是,在肝癌等恶性肿瘤发展时期,肿瘤细胞也高表达AFP及其受体,它们通过AFP受体摄取AFP及其运载的物质... 甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)是一种在胎儿发育时期高表达的蛋白质,它又是一种穿梭蛋白质,能够将营养物质输送给胚胎细胞。相似的是,在肝癌等恶性肿瘤发展时期,肿瘤细胞也高表达AFP及其受体,它们通过AFP受体摄取AFP及其运载的物质。因此,可以将AFP与抗癌药物结合,选择性攻击肿瘤细胞。AFP与药物的结合方式有多种,它可以和药物非共价结合,药物被包裹在AFP的疏水袋中;也可以通过共价键与药物结合,或者利用AFP与纳米颗粒和脂质体连接来提高输送药物的效果,肿瘤细胞的酸性环境能促使结合的药物有效释放。为了避免AFP致癌的风险,还可以通过改造AFP或利用AFP片段来输送药物。由于AFP介导的肿瘤靶向治疗主要是攻击具有AFP受体的癌细胞,因此对正常细胞影响并不大。AFP携带药物不仅能促进肿瘤细胞对药物的吸收、提高药物的抗肿瘤活性,还能克服多重耐药(multidrug resistance, MDR)问题。另外,AFP携带药物还具有免疫治疗的效果。AFP携带药物不仅能激活T细胞受体,消除免疫耐受,抑制肿瘤的生长,还能利用改造好的AFP靶向抑制髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs),激活NK细胞和T细胞,从而破坏癌细胞以及阻止癌干细胞的转移。因此,AFP携带药物治疗是免疫治疗与靶向化疗相结合的新疗法,它将成为治疗癌症的一种策略。 展开更多
关键词 甲胎蛋白携带药物 afp受体 靶向治疗 癌症免疫治疗 多重耐药
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甲胎蛋白促人肝癌Bel7402细胞增殖的机制研究
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作者 李孟森 李平风 +2 位作者 杨非易 杜国光 李刚 《海南医学院学报》 CAS 2003年第2期65-71,83,共8页
目的:观察甲胎蛋白促肿瘤细胞增殖的信号转导方式。方法:用从人脐带血清中提取的甲胎蛋白,作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,运用MTT染色计数法,流式细胞仪测定细胞周期和3H-脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入法等指标检测细胞增殖状况;... 目的:观察甲胎蛋白促肿瘤细胞增殖的信号转导方式。方法:用从人脐带血清中提取的甲胎蛋白,作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,运用MTT染色计数法,流式细胞仪测定细胞周期和3H-脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入法等指标检测细胞增殖状况;放射受体分析细胞膜上甲胎蛋白受体存在和数目;免疫结合法检测细胞内cAMP浓度;Westernblot分析P21ras蛋白的表达。结果:甲胎蛋白(10~80mg·L-1)作用24h后,人肝癌Bel7402细胞有不同程度的促增殖作用;在人肝癌Bel7402细胞膜上存在2种不同的解离平衡常数(Kd)的甲胎蛋白受体,Kd分别为Kd1=1.3×10-9mol·L-1(89400位点/细胞)和Kd2=9.9×10-8mol·L-1(582000位点/细胞)。AFP能显著提高Bel7402细胞内的cAMP浓度,对P21ras的表达也有明显的促进作用。甲胎蛋白的单克隆抗体能阻断这种作用。结论:甲胎蛋白具有促人肝癌Bel7402细胞增殖的作用,这种作用是由受体介导的cAMP信号转导途径实现的。 展开更多
关键词 甲胎蛋白 肝癌 BEL7402 肿瘤细胞增殖 afp受体
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甲胎蛋白新功能:调节HeLa细胞生长的信号转导机制
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作者 李孟森 李平风 +2 位作者 贺师鹏 杜国光 李刚 《海南医学院学报》 CAS 2003年第2期78-83,共6页
目的:观察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)调节HeLa细胞生长的细胞内信号转导机制。方法:用从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的HeLa细胞,通过MTT计数、3H-TdR参入法、流式细胞仪等研究细胞增殖;放射免疫结合法检测在AFP作用下,HeL... 目的:观察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)调节HeLa细胞生长的细胞内信号转导机制。方法:用从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的HeLa细胞,通过MTT计数、3H-TdR参入法、流式细胞仪等研究细胞增殖;放射免疫结合法检测在AFP作用下,HeLa细胞第二信使物质环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)活性的改变;用共聚焦显微镜观测细胞内Ca2+浓度的变化;用Westernblotting分析法分析P21ras表达。结果:①表明AFP(浓度大于10mg/L)对HeLa细胞增殖有明显的促进作用。②在AFP(20mg/L)作用下,PKA活性升高达122.6%,而Ca2+浓度升高达125.71%;P21ras蛋白表达在作用24h时增高112.6%。③抗甲胎蛋白单克隆抗体能有效地阻断AFP对HeLa细胞信号转导的影响。结论:①AFP能促HeLa细胞生长;②AFP可能通过cAMP-PKA和Ca2+途径调节HeLa细胞生长。 展开更多
关键词 甲胎蛋白 新功能 调节 HELA细胞生长 信号转导机制
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人肝癌HepG2细胞表达甲胎蛋白抑制AMD3100诱导凋亡的研究 被引量:1
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作者 龙儒桃 翁启芳 +4 位作者 朱明月 李伟 马兰 谢协驹 李孟森 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1109-1113,共5页
目的研究CXCR4信号对人肝癌HepG2细胞增殖及甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)表达在肝癌细胞耐受诱导凋亡中的作用。方法 MTT法检测CXCR4信号的拮抗剂AMD3100对人肝癌细胞HepG2增殖的影响,并用Western blot分析AMD3100处理前后AFP、CXCR... 目的研究CXCR4信号对人肝癌HepG2细胞增殖及甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)表达在肝癌细胞耐受诱导凋亡中的作用。方法 MTT法检测CXCR4信号的拮抗剂AMD3100对人肝癌细胞HepG2增殖的影响,并用Western blot分析AMD3100处理前后AFP、CXCR4的表达变化;用RNA干扰技术抑制AFP表达24 h后再给予AMD3100处理24 h,荧光显微镜观察HepG2细胞的形态学变化以及流式细胞术分析细胞的凋亡情况。结果 AMD3100对人肝癌HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用;AMD3100处理后HepG2细胞的CXCR4和AFP表达明显受到抑制;干扰AFP表达可协同AMD3100诱导HepG2细胞凋亡。结论 HepG2细胞通过表达AFP导致癌细胞耐受AMD3100诱导的凋亡。 展开更多
关键词 CXCR4信号 甲胎蛋白 肝癌细胞 癌细胞增殖
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A novel liver-directed gene delivery system using an autonomously replicating vector specifically expressed in AFP positive hepatoma cells
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作者 颜子颖 乔健 +1 位作者 贡惠宇 侯云德 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1998年第1期80-86,共7页
A composite EBV based expression vector, pEBAF, was constructed with the 5′ flanking sequence of human α fetoprotein gene as a promoter. Complexed to galactosylated histone, this vector with a foreign DNA insertion ... A composite EBV based expression vector, pEBAF, was constructed with the 5′ flanking sequence of human α fetoprotein gene as a promoter. Complexed to galactosylated histone, this vector with a foreign DNA insertion could be transferred into hepatic cells via the asialoglycoprotein receptor mediated endocytosis pathway. It was replicated as an episome, and its expression was restricted to the AFP positive hepatoma cells. This new gene delivery method has the following advantages: (i) absence of a potential toxicity is related to viral vectors; (ii) the targeting is specific to AFP positive hepatoma cells; (iii) the introduction of the EBV replicon into this system results in the high level expression and long term maintenance of the transferred gene. This novel gene delivery system has potential applications in gene therapy for the treatment of hepatocellular carcinoma. 展开更多
关键词 EBV REPLICON VECTOR afp promoter receptor mediated gene transfer HEPATOMA cell.
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