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ATF5蛋白表达水平与胃癌AGS细胞药敏水平的相关性 被引量:3
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作者 刘洁 赵亚刚 +1 位作者 朱鸿武 李立平 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第7期1061-1065,共5页
目的:探究ATF5蛋白表达水平与胃癌AGS细胞药敏水平的相关性。方法:采用脂质体载体转染技术转染ATF5 pc DNA3.1质粒、ATF5 si RNA空质粒,构建ATF5蛋白高、中、低表达水平的AGS细胞组。Western blot实验检测AGS细胞中ATF5蛋白表达水平,MT... 目的:探究ATF5蛋白表达水平与胃癌AGS细胞药敏水平的相关性。方法:采用脂质体载体转染技术转染ATF5 pc DNA3.1质粒、ATF5 si RNA空质粒,构建ATF5蛋白高、中、低表达水平的AGS细胞组。Western blot实验检测AGS细胞中ATF5蛋白表达水平,MTT实验检测AGS细胞对紫杉醇、顺铂药物敏感性,平板克隆形成实验探讨AGS细胞集落形成差异,分析ATF5蛋白表达水平与胃癌AGS细胞药敏水平的相关性。结果:ATF5蛋白过表达组AGS细胞在紫杉醇、顺铂影响后存活率较对照组高,均P<0.05,IC50值较对照组也明显升高,均P=0.00;而低表达组存活率较对照组低,均P<0.05,IC50值较对照组也明显降低,P顺=0.00,P紫=0.002。过表达组细胞在药物影响后克隆形成数较对照组高,而低表达组克隆形成集落较对照组低,均P<0.05。结论:ATF5蛋白的过表达能降低胃癌AGS细胞对紫杉醇、顺铂的药物敏感性,而ATF5蛋白的低表达则能增加胃癌AGS细胞对紫杉醇、顺铂的药物敏感性,提示胃癌AGS细胞药敏水平可能与ATF5蛋白表达水平相关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 aft5蛋白 AGS细胞 药物敏感性
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ATF5蛋白对食管鳞癌细胞耐药性影响 被引量:5
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作者 刘洁 李立平 +1 位作者 朱鸿武 赵亚刚 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2017年第5期291-296,共6页
目的食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)多药耐药严重影响化疗效果,其分子机制仍未阐明。本研究通过构建不同ATF5蛋白表达量的食管癌Eca-109细胞模型,探究过表达ATF5及低表达ATF5对食管癌Eca-109细胞耐药性及凋... 目的食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)多药耐药严重影响化疗效果,其分子机制仍未阐明。本研究通过构建不同ATF5蛋白表达量的食管癌Eca-109细胞模型,探究过表达ATF5及低表达ATF5对食管癌Eca-109细胞耐药性及凋亡的影响。方法利用脂质体载体转染技术对食管癌细胞株进行转染,建立高、中(转染空质粒的对照组)、低3组不同ATF5蛋白表达量Eca-109细胞模型。蛋白质印迹法检测3组细胞ATF5蛋白表达水平。MTT实验和平板克隆实验观察3组细胞对紫杉醇、顺铂耐受性的变化;DAPI染料核染色后观察3组细胞在紫杉醇、顺铂作用下凋亡反应的差异;分析ATF5蛋白对食管鳞癌Eca-109细胞耐药的影响。结果利用转染技术成功构建的3组不同ATF5蛋白表达量的Eca-109细胞模型,表达模型组细胞中ATF5蛋白相对表达量为85.9±2.66,对照组为64.35±2.54,低表达模型组为45.3±3.11,3组差异有统计学意义,F=532.323,P<0.001。MTT实验显示,紫杉醇、顺铂作用72h后,3组细胞存活率差异有统计学意义,F_紫=163.382,P<0.001;F_顺=579.36,P<0.001;同一组细胞不同浓度对存活率的影响差异有统计学意义,F_紫=616.32,P<0.001;F_顺=2 558.05,P<0.001;不同浓度的紫杉醇、顺铂作用3组细胞后,过表达组细胞的半数抑制率浓度(IC50)分别为4.16±2.21和1.54±0.67;对照组分别为1.54±0.92和1.27±0.65;低表达组细胞的半数抑制率浓度分别为0.33±0.21和0.53±0.62,3组差异有统计学意义,F_紫=198 330.768,P<0.001;F_顺=64 298.048,P<0.001;表明过表达ATF5的细胞对紫杉醇、顺铂的药物耐受性均明显升高而低表达模型组细胞对紫杉醇、顺铂的药物耐受性均明显降低。DAPI染色实验显示,紫杉醇、顺铂作用3组细胞后,过表达组细胞的凋亡率分别为(14.04±1.66)%和(11.75±2.09)%;对照组分别为(26.44±2.99)%和(34.07±3.42)%;低表达组细胞的凋亡率分别为(54.85±5.88)%和(66.66±2.81)%,3组差异有统计学意义,F_紫=283.976,P<0.001;F_顺=954.464,P<0.001。提示过表达ATF5蛋白细胞在紫杉醇、顺铂作用下凋亡细胞均减少,低表达ATF5细胞在紫杉醇、顺铂作用下凋亡细胞均增加。平板克隆形成实验显示,紫杉醇、顺铂作用3组细胞后,过表达组细胞的克隆形成率分别为(56.09±1.37)%和(62.67±1.41)%;对照组分别为(38.7±1.37)%和(34.83±3.09)%;低表达组细胞的克隆形成率分别为(25.22±1.58)%和(18.17±3.64)%,3组差异有统计学意义,F_紫=1157.447,P<0.001;F_顺=612.595,P<0.001。表明过表达ATF5蛋白细胞在紫杉醇、顺铂作用下克隆形成数均更多,低表达ATF5蛋白细胞在紫杉醇、顺铂作用下克隆形成数减少。结论上调ATF5蛋白的表达能增加食管鳞癌Eca-109细胞对紫杉醇、顺铂的耐药性,而下调ATF5蛋白的表达则能降低Eca-109细胞对紫杉醇、顺铂的耐药性,提示食管鳞癌细胞的耐药性可能与ATF5蛋白的表达量相关,食管鳞癌细胞中ATF5蛋白的表达情况可能能间接干扰临床药物化疗的效果。 展开更多
关键词 aft5蛋白 食管鳞癌细胞 耐药性 食管癌
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