双膦酸盐修饰生长分化因子5促进MC3T3-E1细胞的成骨分化

背景:生长分化因子5作为骨形态发生蛋白的一员在软骨及骨组织修复领域表现出良好的应用潜力,增强生长分化因子5与骨组织的亲和力是提高蛋白使用效率的关键,因而开发具有骨靶向性的生长分化因子5蛋白具有重要意义。目的:利用双膦酸盐修饰生长分化因子5并探讨改性后蛋白对小鼠成骨前体细胞生长分化的影响。方法:采用化学交联法将生长分化因子5与帕米膦酸钠偶联,得到偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5,采用傅里叶变换红外光谱、圆二色谱对其基团及结构进行表征,利用ELISA试剂盒测定生长分化因子5与磷酸钙的结合量以及生长分化因子5的体外释放量,用于表征其体外骨靶向性。将生长分化因子5(对照组)、偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5(实验组)分别与成骨前体细胞MC3T3-E1共培养,以单独培养的细胞为空白对照,评价复合物对细胞增殖及分化等的影响。结果与结论:①红外光谱及圆二色谱结果表明,实验成功制备了双膦酸盐/生长分化因子5复合物且蛋白二级结构无显著变化;体外磷酸钙吸附结果表明,偶联帕米膦酸钠后,生长分化因子5与磷酸钙的吸附率增加了约1倍;在半胱氨酸存在条件下,偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5的蛋白可释放出来;②CCK-8实验结果显示,实验组培养4,7 d的吸光度值高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养7 d后,实验组碱性磷酸酶表达明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养13 d后,实验组钙结节含量明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);qRT-PCR结果检测结果显示,培养7 d后,实验组碱性磷酸酶、骨钙素及Runx2的mRNA表达高于对照组、空白对照组(P<0.01,P<0.001,P<0.0001);③结果表明,双膦酸盐修饰有利于增强生长分化因子5与磷酸钙的结合能力,同时有利于增强其生物活性。

hSOD1-G93A突变的肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠脊髓中5-mC水平以及DNMT1、DNMT3A和DNMT3B表达的变化

目的探讨5-甲基胞嘧啶(5-mC)水平以及DNA甲基转移酶1、3A和3B(DNMT1、DNMT3A和DNMT3B)蛋白表达变化与肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)之间的关系。方法选用发病前期(70 d)、发病早期(95 d)、发病中期(108 d)和发病晚期(122 d)的hSOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠,以同窝野生型(wild type,WT)小鼠作为对照,应用ELISA和Dot blot技术检测ALS小鼠脊髓中5-mC水平的变化规律,采用Western blot和免疫荧光双标染色技术检测ALS小鼠不同时期的脊髓中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的蛋白水平变化以及定位。结果ELISA和Dot blot结果显示,与WT小鼠相比,ALS转基因小鼠脊髓中5-mC水平升高;Western blot分析显示,与WT小鼠相比,ALS转基因小鼠脊髓中DNMT1蛋白水平在70 d无显著性变化,在95 d、108 d和122 d显著升高;DNMT3A蛋白水平在70 d、95 d和108 d升高,在122 d无显著性变化;DNMT3B蛋白水平在70 d无显著性变化,在95 d、108 d和122 d显著升高。结论ALS转基因小鼠脊髓中5-mC水平及关键DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的蛋白水平异常升高与ALS发病密切相关。

MC5R介导鹅肌肉对营养/能量水平变化的响应

为探究黑皮质素受体MC5R在鹅营养/能量代谢中的作用及其机制,着重检测禁食/再饲喂模型中鹅胸肌和营养/能量代谢相关因子处理后鹅原代胸肌细胞中MC5R的mRNA表达水平,通过过表达MC5R后的转录组测序分析筛查MC5R调控的基因与通路,以及检测活体和细胞模型中MC5R下游基因的mRNA表达量。结果表明:肌肉中MC5R的表达为禁食所诱导,而这种诱导可被再饲喂所抑制;鹅原代肌细胞中MC5R的表达可被葡萄糖和油酸所诱导,但被甲状腺素所抑制;MC5R过表达影响的差异表达基因主要富集于糖脂代谢和炎症相关的通路;在鹅活体和细胞模型中筛选到的PLA2G4A、PTGS2、TRAF2、IL6和PLPP4基因可能介导MC5R的生物学作用。综上,MC5R可能通过糖脂代谢和炎症相关通路介导鹅肌肉中营养/能量水平变化所引起的生物学效应。

铁路5G专网宽带集群通信MC设备组网技术研究

为满足智能铁路的发展需要,我国铁路通信正在逐步向5G专网演进,其中,宽带集群通信MC设备是铁路5G典型应用的关键装备。智能铁路的发展对保障关键业务安全可靠提出了更高的要求,MC设备组网技术与集群和调度通信业务可靠性、稳定性密切相关。首先,阐释MC设备的系统架构和互联互通接口,提出MC业务功能需求,为组网技术研究奠定基础;其次,基于铁路5G专网建设规划,提出MC设备总体部署方案,并结合MC系统特点,提出相适应的云部署建议;最后,紧密结合铁路应用需求,通过研究主备、负荷分担、双活等技术,提出一种业务容灾能力更强的MC设备容灾备份方案。研究结果表明,所提出的部署和容灾备份等组网技术,能够为MC设备的工程应用提供指导,以提高系统和业务的可靠性;铁路宽带集群通信MC设备的应用,能够提供多媒体集群通信服务,为智能铁路发展提供有力的通信保障。

痛泻要方对内脏高敏性大鼠结肠MC活化与5-HT相关性影响的研究

目的:通过对内脏高敏性大鼠结肠MC密度、5-HT表达及二者相关性的影响,研讨痛泻要方对内脏高敏性大鼠结肠MC活化的干预作用。方法:采用乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性大鼠IBS模型,以免疫组织化学方法和甲苯胺蓝改良法进行结肠双重复染法,观察痛泻要方对结肠组织MC形态学、密度的影响,及其与5-HT表达之间关系,并观察痛泻要方对其二者相关性的影响。结果:经乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性模型后,结肠中MC颗粒增多,MC周边5-HT表达增强,二者有明显相关性,经痛泻要方干预后,结肠中MC形态改善、数量降低,5-HT表达降低,对二者相关性具有明显调节作用。结论:痛泻要方可改善内脏高敏性大鼠肠道MC活化程度,并抑制MC释放5-HT,从而降低5-HT表达。

McGrath-5型视频喉镜与McCoy喉镜引导困难气道双腔支气管插管的效果比较

目的探讨Mc Grath-5型视频喉镜与Mc Coy喉镜在困难气道双腔支气管插管的临床应用效果。方法选择预计双腔支气管插管困难的择期手术患者60例,采用随机数字表法,将其随机分为两组:Mc Grath-5型视频喉镜组(A组,n=30)和Mc Coy喉镜组(B组,n=30)。常规诱导后分别用两种喉镜引导经口插管,对两组患者一次插管成功率、插管时间、定位成功率、插管时间内脉搏血氧饱和度(Sp O2)<90%次数、环状软骨按压例数、插管并发症发生情况和血流动力学指标:诱导前(T0)、置入喉镜暴露声门时(T1)、导管进入声门即刻(T2)、插管后3 min(T3)各时间点记录患者收缩压(SBP)、心率(HR)和脑电双频指数(BIS)值的变化进行分析。结果 A组患者环状软骨按压例数明显低于B组(P<0.05),插管时间明显高于B组(P<0.05);两组患者T3时点的SBP和HR较T0时点均明显降低(P<0.05),A组患者T1、T2时点SBP和HR均明显低于B组(P<0.05)。结论与Mc Coy喉镜相比,Mc Grath-5型视频喉镜引导经口双腔导管插管对血流动力学的影响较小,插管并发症较少,插管时间虽延长但不至于影响患者氧供,为临床解决困难气道双腔插管提供一种良好选择。

薯蓣皂苷通过上调Lrp5、β-catenin表达促进成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化

目的探讨薯蓣皂苷对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化的影响,并初步探讨薯蓣皂苷预防与治疗骨质疏松的作用机制。方法①体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,分别加入含不同浓度的薯蓣皂苷(0.3、0.6、1.2μmol·L-1)进行培养,以洛伐他汀(0.04μmol·L-1)作为阳性对照。采用MTT法检测细胞增殖情况;用ALP试剂盒检测细胞内ALP的活性;采用RT-PCR检测Lrp5、β-catenin、OPG/RANKL mRNA表达情况;Von Kossa染色法检测细胞矿化能力。②通过RNAi技术将Lrp5基因沉默,检测薯蓣皂苷是否依赖于Lrp5来调节OPG/RANKL的比值。结果①薯蓣皂苷可以剂量依赖的促进MC3T3-E1细胞的增殖;②薯蓣皂苷可以剂量依赖的增加MC3T3-E1细胞ALP的活性;③薯蓣皂苷可以剂量依赖的上调MC3T3-E1细胞Lrp5、β-catenin、OPG/RANKL mRNA表达水平;④薯蓣皂苷可以使MC3T3-E1细胞产生的矿化结节数增加;⑤薯蓣皂苷依赖于Lrp5来调节MC3T3-E1的OPG/RANKL比值。结论①适量浓度的薯蓣皂苷可以促进MC3T3-E1细胞的增殖与分化;②薯蓣皂苷可以调节Lrp5等与骨代谢相关的基因的表达以产生抗骨质疏松作用。

胃癌前病变MC5抗原定量分析及对胃癌高危人群预测价值的探讨

应用本院制备的抗结肠癌单克隆抗体ＭＣ５及ＡＢＣ免疫组化染色，检测了６４例具有随访结果的胃粘膜异型增生标本。用计算机图像分析系统对ＭＣ５抗原的表达进行了定量分析，并通过计算约登指数及绘制ＲＯＣ曲线探讨了高危界值。６４例标本中包括癌变组３０例，未癌变组３４例，随访时间６～７２个月（平均２６个月）。免疫组化染色结果显示，癌变组３０例标本中有２０例表达阳性（６６．７％），未癌变组３４例标本中仅８例呈阳性表达（２３．５％），两组比较差异显著（Ｐ＜０．０１）。图像分析等结果显示，ＭＣ５的平均灰度值＞０．２２为高危界值，以此值作为判定不典型增生是否具有癌变倾向的依据，其灵敏度为７６．７％，特异度为７３．５％，准确度为７５．０％。结论：ＭＣ５抗原的表达程度和胃粘膜不典型增生癌变关系密切。ＭＣ５抗原表达阳性的胃粘膜不典型增生尤其当灰度值≥０．２２的病例，是具有潜在癌变倾向的高危人群，对这些病人进行严密的随访监测，可提高早期胃癌的检出率。

猪MC5R基因在7个群体中的基因型分布研究

MC5R基因是黑素皮质素受体家族的一员,与动物肥胖相关。利用PCR-RFLP技术,对该基因在猪7个不同群体的多态性进行了检测,发现在大白、梅山、大梅和梅大群体只有AA型,长大只有AB型,在长白猪群体则3种基因型均有分布。

MC5抗原和CEA在大肠良、恶性病变表达的对比研究

为了探讨大肠息肉与大肠癌之间的病因学关系,研究抗人大肠癌单克隆抗体MC5对大肠癌早期诊断的价值,我们应用MC5抗大肠癌及抗CEA两种单克隆抗体,通过抗生物素—生物素—酶复合物法（ABC法）,对147例大肠良、恶性病变及大肠正常粘膜进行MC5抗原和CEA表达对比研究,现报告如下:

结肠癌相关抗原MC_5—Ag的纯化及分析

本文用一株鼠抗人结肠癌单克隆抗体MC_s,经盐析。DEAE—S_2离子交换层析纯化后与澳化氢活化的Sepharose 4B偶联制备免疫吸附剂。用免疫亲和层析的方法从结肠癌组织中纯化出单抗MC_5相应抗康,经电泳乙酰苏丹黑10B染色,考马斯亮蓝染色,加热实验,高碘酸氧化,SDS—PAGE和免疫印迹等分析证实MC_5相应抗原是一种新的结肠癌相关糖蛋白,分子量分别为67KD和55KD。

MC5陶瓷拉拔模具材料

介绍了一种螺旋钢丝冷拨模用的新型金属陶瓷材料，对材料的组织和性能进行了分析。

5-羟色胺／褪黑素能系统对MC和AMMC的作用机制

白癜风患者皮损在色素恢复过程中,白斑边缘正常表皮基底层黑素细胞和毛囊外毛根鞘无活性黑素细胞(AMMC)是白癜风患者皮损色素恢复的两个途径。AMMC可被某些特定因子激活、增殖和游走,并产生黑素,可能是黑素干细胞。5-羟色胺/褪黑素能系统(5-HTs/MTs)对黑素细胞(MC)和AMMC的增殖和凋亡产生作用;5-羟色胺(5-HT)抑制黑素生成,黑素细胞内生成褪黑(激)素(MT)可能是黑素的内在调节剂,因而探讨5-HTs/MTs信号转导途径对AMMC的作用机制,可进一步揭示白癜风的发病机理,对开发新的5-HT类药物及临床治疗提供科学依据,具有重要的理论和应用价值。

MC5冷轧辊钢球化退火工艺研究

详细研究了MC5轧辊钢球化退火工艺。研究结果表明:适宜的球化工艺为:在820℃～900℃之间加热,在700℃～740℃之间等温。

大肠腺瘤癌变的MC_5免疫组织化学研究

本文通过抗人结肠癌单克隆抗体MC_U免疫组化标记,对大肠腺瘤癌变发生进行研究。 材 料 与 方 法 我科1971～1985年收到大肠癌根治切除标本454例,检出肠癌并存腺癌112例。选取1980年后手术摘除腺瘤85例及残瘤27例行MC_5(抗血清由四军大提供)免疫组化检测,采用双PAP法,DAB显色,苏木素复杂。 结果判断:深棕色强阳性(+ + +)。

MC5免疫组织化学在大肠癌中的定位诊断研究

目的研究免疫组织化学法检测MC5在大肠癌定位诊断中的意义。方法选取2014年1月至2015年2月在我校附属医院病理科存档的确诊为大肠癌的蜡块标本102例及内镜中心活检病理为正常粘膜的40例，通过免疫组化法检测102例大肠癌和40例正常人群粘膜的MC5表达水平，研究其在大肠癌早期定位诊断中的价值。结果40例正常人群的粘膜MC5表达均为阴性，102例大肠癌患者的MC5阳性表达率为89．21％（91／102），且定位于胞浆和胞膜，在癌旁正常组织中MC5阳性表达率为37．25％（38／102），两者相较差异有统计学意义（P〈0．05）。在35例高分化癌中，表达结果为一的7例，＋的20例，＋＋的4例，＋＋＋的4例；在28例中分化癌中，表达结果为一的4例，＋的4例，＋＋的17例，＋＋＋的3例；在39例低分化癌中，表达结果为一的0例，＋的6例，＋＋的2例，＋＋＋的31例；MC5表达水平与大肠癌的分化程度呈负相关，MC5表达水平随着分化程度的上升而下降。结论MC5在大肠癌中呈阳性表达，具有一定的特异性，且分化程度越低表达水平越高，可作为大肠癌早期定位诊断的指标之一。

MC3T3-E1Subclone14体外诱导成骨模型的建立及Ano5基因表达的研究

目的建立MC3T3-E1 Subclone 14体外诱导成骨模型,探讨Ano5基因表达与成骨细胞形成的关系,了解其对成骨分化的影响。方法 MC3T3-E1 Subclone 14细胞贴壁培养,加入条件培养基,分别培养至0d、3d、7d、14d、21d。倒置显微镜下观察细胞形态,通过碱性磷酸酶活力测定和茜素红染色,鉴定成骨细胞。利用REAL TIME-PCR检测Ocn、Colα1、Opg/Rankl、Osterix和Runx2等成骨相关因子的基因表达水平,同时检测Ano5基因在成骨细胞形成过程中的表达趋势。结果体外诱导MC3T3-E1 Subclone 14倒置光学显微镜下观察细胞形态呈梭形。成骨细胞碱性磷酸酶活力逐渐增高。成骨诱导培养至14d和21d,茜素红染色可见细胞表面出现矿化结节。成骨相关因子基因表达均逐渐增高,至21d达到高峰。Ano5基因从诱导分化的第3d开始表达,随后表达量逐渐增高,至14d达到高峰,21d表达量下降。结论在MC3T3-E1 Subclone 14体外诱导分化为成骨细胞过程中,Ano5基因表达量逐渐升高,至14d达到高峰,21d开始表达量具有下降趋势。

ERK5信号通路介导流体剪切力对MC3T3-E1成骨细胞MMPs、TIMPs表达的影响

目的观察流体剪切力(fluid shear stress,FSS)作用下,MC3T3-E1成骨细胞中细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)和基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)的表达情况,并探讨ERK5信号通路在其中的作用。方法对MC3T3-E1成骨细胞进行不同的处理,分为正常组、XMD8-92组、FSS组和FSS+XMD8-92组,对FSS组施加12 dyn/cm^2流体剪切力,采用蛋白免疫印迹法分别检测P-ERK5、ERK5、MMPs和TIMPs蛋白水平的变化。结果生理强度(12 dyn/cm^2)的流体剪切力作用于MC3T3-E1成骨细胞45 min后能显著上调MMPs的表达,下调TIMPs的表达,但此效应可被ERK5高选择性抑制剂XMD8-92阻断。结论 ERK5信号通路调控流体剪切力对成骨细胞MMPs、TIMPs蛋白的表达。

MC68HC11G5在自动门控制系统中应用

文中介绍MC68HC11G5单片机的特性及其在自动门控制系统中的应用,重点阐述系统的硬件设计。