AG3340对高糖诱导人视网膜色素上皮细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂AG3340对高糖(HG)培养状态下人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)迁移和侵袭能力的影响及作用机制。方法:将体外培养的ARPE-19细胞分为4组,其中对照组(Control组)用含5.6mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养基培养;HG组用含30mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养基培养;HG+AG3340组用AG3340预处理细胞12h后,再用含30mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养基继续培养;甘露醇(MA)组用含5.6mmol/L葡萄糖和24.4mmol/L甘露醇的DMEM/F12培养基培养作为渗透压对照组。采用划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力,Western blot法检测MMP-9、MMP-2、纤连蛋白(Fibronectin)及胶原蛋白(Collagen)Ⅳ的相对表达水平。结果:划痕实验结果显示,划痕24、48h后HG组细胞迁移率均较Control组明显增加(均P<0.001),采用AG3340预处理后细胞迁移率均较HG组降低(均P<0.01)。Transwell小室实验结果显示,HG组细胞侵袭数目较Control组明显增加(P<0.001),采用AG3340预处理后细胞侵袭数目较HG组减少(P<0.01)。Western blot检测结果显示,HG组细胞中MMP-9和MMP-2相对表达量均较Control组增加,Fibronectin和CollagenⅣ相对表达量均较Control组减少(均P<0.001),采用AG3340预处理后细胞中MMP-9和MMP-2蛋白相对表达量均较HG组降低,Fibronectin和CollagenⅣ相对表达量均较HG组增加(均P<0.05)。结论:高糖环境诱导ARPE-19细胞迁移和侵袭能力增强,AG3340则可以部分逆转该作用,该过程可能与AG3340抑制细胞内MMP-9和MMP-2的表达,稳定细胞外基质组分有关。

AG3340抑制大鼠C6胶质瘤细胞增殖的初步研究

目的寻找一种既能抑制胶质瘤新生血管的形成，又能杀灭胶质瘤细胞的细胞因子，为临床肿瘤药物的筛选提供理论依据。方法培养传代大鼠C6胶质瘤细胞株以每孔1×10^4个细胞铺96孔培养板，分组加入AG3340[金属蛋白酶（MMPs）非肽类抑制剂，终浓度分别为0ng／ml、50ng／ml、100ng／ml、150ng／ml]，培养48h后，弃去培养液，每孔加入DMSO（二甲亚砜）150μl，振荡后用酶标仪570nm测定吸光度值（A值）。结果（1）随着加入AG3340浓度增加，部分大鼠C6胶质瘤细胞便会出现变圆、离壁、浮起直至死亡的现象。（2）对照组OD（取相同倍数视野中心）值：0．1645±0．015；低浓度组OD值：0．1443±0．011；中浓度组OD值：0．1358±0．011；高浓度组OD值：0．1213±0．014。总体及各实验组间比较，均有统计学意义（总体F=46．67，P〈0．01；各组间P〈0．05）。结论AG3340对大鼠C6胶质瘤细胞增殖有明显的抑制作用，且与浓度呈一定相关性，随着浓度的增加其抑制作用逐渐增强。

肿瘤新生血管生成及其抑制剂的研究进展

恶性肿瘤是严重危害人类健康的常见病和多发病.在我国,恶性肿瘤已经成为城市居民的第一死因,农村居民的第二死因,它的死亡率居各种疾病之首.