可溶性AGE受体对AGE诱导牛主动脉内皮细胞NF-κB激活的抑制作用

目的 :研究可溶性糖化终末产物 (AGE)受体 (sRAGE)对AGE诱导牛主动脉内皮细胞 (BAECs)NF κB激活的抑制作用。方法 :分别用AGE修饰白蛋白和羧甲基赖氨酸 (CML)修饰白蛋白培养BAECs ,凝胶迁移率改变实验检测加入sRAGE或RAGE反义寡核苷酸前后NF κB的DNA结合活性 ,并定量分析蛋白条带的密度积分。结果 :AGE修饰白蛋白和CML修饰白蛋白能通过结合BAECs表面RAGE诱导NF κB的激活 ,sRAGE和RAGE反义寡核苷酸均能有效的抑制AGE对NF κB的激活 ,sRAGE几乎能完全抑制AGE对NF κB的激活 ,而RAGE反义寡核苷酸抑制NF κB激活的作用是有限的。结论 :RAGE在AGE诱导BAECsNF κB的激活中起关键作用 。

比较肝素和低分子量肝素对人单核细胞表面AGE受体的影响

用放射性受体 配体结合分析法 ,观察肝素和低分子量肝素对正常人和慢性肾功能衰竭血液透析患者单核细胞表面晚期糖基化终产物 (AGE)受体的影响。结果表明 ,肝素对正常人和慢性肾功能衰竭血液透析患者单核细胞表面的AGE受体均有封闭作用 ,且这种封闭作用具有剂量依赖性 ;低分子量肝素对AGE受体无封闭作用。提示肝素可以干扰AGE的清除和降解 。

糖基化终末产物及相关药物研究进展

糖基化终末产物(AGEs)是蛋白质和脂类经非酶糖基化后生成的含多种结构分子的混合物,阻断AGEs的致病途径有望成为改善糖尿病慢性并发症,缓解衰老,治疗老年痴呆等的新途径。该文主要综述了体内AGEs的来源,病理生理学机制,及AGEs生成抑制剂,断裂剂及AGEs受体阻断剂的研究进展。

晚期糖基化终末产物的临床病理机制及抑制剂的研究进展

在糖尿病患者体内以及衰老进程中晚期糖基化终末产物 (AGEs)是不断积累的 ,其可以通过直接或间接的方式对机体产生病理作用。本文概述了AGEs对各种组织或细胞包括心血管组织、肾脏、大脑和骨组织等的间接病理作用和机制、介导该作用的AGEs受体或其他结合蛋白 。

非酶糖化、晚期糖基化终产物与阿尔茨海默病

许多证据显示非酶糖化及其晚期产物-晚期糖基化终产物(AGEs)在阿尔茨海默病(AD)发病中的重要作用。AGEs促进蛋白交联;糖化β-淀粉样蛋白与AGEs受体相互作用激活小胶质和星形胶质细胞,促进氧化应激、分泌诱导型一氧化氮合酶和前炎症细胞因子,并损伤神经元,促进AD的发生发展。AGEs及其受体在AD中的可能作用机制为开发预防、治疗AD的新药提供理论基础。

蛋白质的糖基化及其在肾脏病变中的作用

晚期糖基化终产物 (AGE)是蛋白质的氨基与糖的醛基发生非酶性糖基化反应的终产物 ,在慢性肾功能衰竭和糖尿病肾病并发症的发生和发展中起重要作用。

晚期糖基化终产物与糖尿病周围神经病变

晚期糖基化终产物(AGEs)是蛋白质的氨基与糖的醛基发生非酶糖基化反应的终产物,在糖尿病周围神经病变的发生发展中起重要的作用。本文主要综述了AGEs的产生,受体与糖尿病周围神经病变,以及相关治疗的研究进展。

黄芪桂枝五物汤对糖尿病周围神经病变大鼠模型AGEs/RAGE/NF-κB信号通路的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对糖尿病周围神经病变大鼠模型晚期糖基化终产物(AGEs)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨黄芪桂枝五物汤减轻糖尿病周围神经病变的作用机制。方法:以高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导法,制作糖尿病周围神经病变大鼠模型。造模成功后,按照随机数字表法分成模型组、黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组、甲钴胺组,共5组,另设正常组,自第5周开始黄芪桂枝五物汤干预,采用黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组(19.40,4.85,2.43 g·kg^-1·d^-1)连续灌胃12周;甲钴胺组采用甲钴胺0.25 mg·kg^-1·d^-1灌胃。实验结束后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测糖尿病周围神经病变大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测坐骨神经组织中RAGE,NF-κB p65 mRNA含量;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测坐骨神经组织中RAGE,NF-κB,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白的表达变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β,TNF-α含量,坐骨神经组织RAGE,NF-κB p65 mRNA含量,RAGE,NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达显著增加(P<0.01),p-NF-κB p65/NF-κB p65升高,p-NF-κB p65蛋白表达显著升高(P<0.01)。经黄芪桂枝五物汤干预后,与模型组比较,各给药组血清IL-1β,TNF-α含量,RAGE,NF-κB p65 mRNA含量,RAGE,NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达量均显著降低(P<0.01),黄芪桂枝五物汤高剂量组p-NF-κB p65/NF-κB p65显著降低(P<0.01),且呈剂量相关性,随黄芪桂枝五物剂量增加而效果明显。结论:黄芪桂枝五物汤可减轻糖尿病周围神经病变,其机制可能与阻断AGEs/RAGE/NF-κB信号通路中组织细胞表面RAGE的表达、抑制NF-κB激活及其引发TNF-α触发的氧化应激和过度炎症反应,从而避免细胞受损和功能紊乱有关。

益糖康通过抑制AGE/RAGE信号通路改善骨骼肌细胞凋亡的机制

目的:研究益糖康通过抑制糖基化终末产物(AGE)/糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路纠正骨骼肌细胞过度凋亡进而改善胰岛素抵抗(IR)的作用机制。方法:①体外实验,制备益糖康含药血清,将C2C12细胞设置空白组、模型组、益糖康含药血清高、中、低剂量(40、20、10 g·kg^(-1))组、RAGE抑制剂组,除空白组外,用棕榈酸诱导C2C12 IR模型细胞,然后分别采取相应的干预方式后检测各组细胞的活性及葡萄糖消耗量水平,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测重要凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p53、胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]的mRNA及蛋白表达水平。②体内实验,将96只符合研究标准的Wistar大鼠设置空白组、对照组、益糖康高、中、低剂量组(40、20、10 g·kg^(-1))、吡格列酮(1.35 mg·kg^(-1))组,运用高糖高脂糖尿病模型诱导饲料联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立胰岛素抵抗动物模型并运用高胰岛素-正常血糖钳夹(HEC)实验验证,模型判定成功后对各组大鼠按要求进行灌胃给药干预。用原位末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠骨骼肌组织阳性凋亡细胞个数,Real-time PCR及Western blot技术检测Bcl-2、Bax、p53、Caspase-3、Caspase-9的mRNA及蛋白表达水平。结果:①体外实验,与空白组比较,模型组C2C12细胞凋亡率显著升高,细胞活性、葡萄糖消耗量均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,益糖康含药血清各剂量组和RAGE抑制剂组C2C12细胞凋亡率显著降低,细胞活性、葡萄糖消耗量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,益糖康含药血清各剂量组和RAGE抑制剂组C2C12细胞凋亡率显著降低,细胞活性、葡萄糖消耗量均显著升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组C2C12细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著降低,Bax、p53、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,益糖康含药血清各剂量组和RAGE抑制剂组C2C12细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bax、p53、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。②体内实验,与空白组比较,模型组大鼠骨骼肌组织阳性凋亡细胞个数显著升高(P<0.01)。与模型组比较,益糖康高、中、低剂量组,吡格列酮组大鼠骨骼肌组织阳性凋亡细胞个数显著降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠骨骼肌组织Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著降低,Bax、p53、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,益糖康各剂量组和吡格列酮组大鼠骨骼肌组织Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bax、p53、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。益糖康中剂量具有RAGE抑制剂类似的功效,且疗效等同于盐酸吡格列酮。结论:益糖康可能通过抑AGE/RAGE信号通路抑制骨骼肌细胞凋亡。

晚期糖基化终末产物与糖尿病神经病变

非酶糖基化反应是糖尿病神经病变的重要发病机制之一。持久高血糖使体内晚期糖基化终末产物（AGEs）不断积累，沉积于神经组织的AGEs不仅修饰了细胞骨架蛋白、髓鞘蛋白及基质蛋白等，从而直接损害神经结构与功能，而且还通过增强氧化应激反应，或与神经元表面AGEs受体（RAGE）作用进一步导致神经功能紊乱。AGEs还可引起神经微循环障碍。单用或联用AGEs抑制剂、抗氧化剂、可溶性RAGE及抗RAGE IgG在防止、缓解、逆转糖尿病神经病变中显示出巨大的潜力。

体外重建皮肤模型（老化模型）中特定的晚期糖化终末产物诱导的生物学效应

人皮肤老化的特征包括弹性纤维减少、不溶性胶原蛋白蓄积以及创伤修复能力受损等。而对于皮肤曝光部位，促炎性改变还能导致富含胶原蛋白基质的重构，进一步加重上述变化。该基质重构过程可通过两种方式实现。第一种涉及晚期糖化终末产物（AGE）的产生（由葡萄糖和羰基醛经过化学反应生成），可导致细胞外基质发生蛋白质交联、固化及失去弹性等损害。第二种涉及富含AGE的真皮基质与真皮细胞之间的相互作用，通过AGE受体（RAGE）和其他受体途径引起细胞活化，导致生长因子和细胞因子的释放，从而使细胞外基质发生深度重构。