基于AGEs-RAGE信号通路探索从脾论治糖尿病心肌病的科学内涵

糖尿病是心血管疾病的独立危险因素,糖尿病患者(39%)相比于非糖尿病患者(23%)发生心力衰竭的风险明显增加^([1])。糖尿病心肌病是糖尿病常见的慢性并发症,早期表现为心肌纤维化及相关的舒张、收缩功能障碍,最终可导致心力衰竭发生,对患者生存质量及生命安全均产生许多不利影响^([1])。

益气养阴活血汤对糖尿病肾病AGEs-RAGE轴及血清TNF-α、IL-6水平的影响

目的探究益气养阴活血汤经晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGEs)-晚期糖基化终末产物受体(Receptor of Advanced Glycation Endproducts,RAGE)轴调节机制对早期糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)的治疗价值。方法选取2019年12月—2021年8月期间达州市中西医结合医院肾病科收治的88例早期DN患者,采用随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各44例。对照组给予常规西医治疗,治疗组在对照组基础上联合益气养阴活血汤治疗。治疗8周后,观察比较两组患者综合疗效、不良反应发生率,治疗前后中医证候积分(主症、次症、总积分)、尿液指标[尿白蛋白排泄率(Urinary albumin excretion rates,UAER)、尿微量白蛋白(Microalbunminuria,mAlb)]、AGEs-RAGE轴因子(AGEs、RAGE)、炎症因子[肿瘤坏死因子-α(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)]水平及生活质量(A-DQOL)评分。结果治疗后治疗组总有效率93.18%(41/44)明显高于对照组79.07%(34/43),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者中医证候积分(主症、次症、总积分),尿液指标(UAER、mAlb),AGEs-RAGE轴因子水平(血清AGEs、RAGE)、炎症因子水平(TNF-α、IL-6),生活质量(A-DQOL各维度)评分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组中医证候积分(主症、次症、总积分),尿液指标(UAER、mAlb),AGEs-RAGE轴因子水平(血清AGEs、RAGE)、炎症因子水平(TNF-α、IL-6),生活质量(A-DQOL各维度)评分均较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,治疗组不良反应发生率15.91%与对照组13.95%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气养阴活血汤治疗早期DN安全、有效,有利于减轻蛋白尿,下调炎症反应,改善患者生活质量,可能与经AGEs-RAGE轴的调节机制有关。

妊娠期糖尿病孕鼠的子鼠发育与AGEs-RAGE轴的相关性研究

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)孕鼠血清分泌型晚期糖基化终产物受体(sRAGE)对胎鼠发育的保护作用。方法以腹腔注射法建立SD孕鼠妊娠期糖尿病模型。随机将成功模型进行分组,分为实验及对照两组,对照组隔日尾静脉注射白蛋白溶液(5 mg/kg),实验组同时间点注射相同剂量的0.2 ml PBS稀释的重组sRAGE蛋白。第19天行剖宫产术,剥离胎盘,取出胚胎,记录胎鼠数量、体重、胎盘湿重,肉眼及病理观察胎鼠各系统器官发育畸形及缺陷情况,免疫组化显示子鼠脑、心脏组织切片中p65蛋白质入核状态,分析晚期糖基化终产物-糖基化终产物受体(AGEsRAGE)轴对妊娠期糖尿病孕鼠的胎鼠发育的保护作用。结果 (1)GDM孕鼠在子鼠的产子数量和胎盘湿重两项指标上与正常对照组差异不显著,但是GDM子鼠出现较高的子鼠发育异常和畸形,子鼠的平均体重也较对照组高(P<0.05),sRAGE处理可以降低子代发生畸形的概率,但子代畸形的概率与对照和GDM组相比仍然具有显著差异(P<0.05)。(2)GDM组孕鼠RAGE、EGFR、p65的mRNA表达呈明显上升,而经由sRAGE处理后,各项指标的mRNA表达逐渐下降接近于正常对照组的水平。(3)GDM组子鼠的脑、心脏组织切片后针对p65的免疫荧光染色显示,GDM组细胞中的p65被激活进入细胞核促进相关基因转录,而sRAGE处理显著抑制p65的入核。结论 GDM孕鼠的子代脑和心血管发育异常与孕鼠血清中AGEs水平以及组织中RAGE蛋白质表达水平显著相关,而AGEs-RAGE轴的调控平衡对子鼠发育和出生异常有显著的保护作用。

替米沙坦对自发性高血压大鼠脑组织AGEs-RAGE表达的影响

目的探讨替米沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)脑组织晚期糖基化终产物(AGEs)和晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达及氧化应激反应的影响。方法 SHR12只随机分为高血压对照组(HC组)和替米沙坦组(T组)各6只,同龄WKY大鼠6只作为正常对照组(NC组)。药物干预16周,测定各组脑组织AGEs、RAGE,和氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)。结果与NC组比较,HC组脑组织羧甲基赖氨酸(CML,AGEs主要成分)和RAGE蛋白表达明显上调(P<0.01),SOD活性显著降低,MDA含量显著升高(P<0.05);与HC组比较,T组CML和RAGE的表达显著降低(P<0.01),SOD活性升高,MDA含量减低(P<0.05)。结论脑组织中AGEs聚集,通过AGEs-RAGE导致脑组织氧化应激反应增强可能是高血压脑损害的途径之一。替米沙坦可能通过抑制AGEs的生成和聚集减轻高血压的脑损害。

AGEs-RAGE信号通路与糖尿病难愈合创面

糖尿病难愈合创面是糖尿病比较严重的并发症和致残原因,故国内外学者对它的研究越来越多。创面愈合是炎性细胞、修复细胞及细胞因子等多种因素共同调控的复杂过程,其中晚期糖基化终末产物(Advanced Glycationend Products,AGEs)及其受体协同的AGEs-RAGE信号通路是目前研究的热点,本文就其进行概述。

AGEs-RAGE/NF-κB途径对慢性间歇低氧小鼠脏器的影响及大株红景天对其脏器的保护作用

目的通过建立慢性间歇低氧小鼠模型探讨晚期糖基化终末产物(advanced glycation end prod-ucts,AGEs)-糖基化终末产物受体(advanced glycosylation end product-specific receptor,RAGE)/核因子-κB(NF-κB)途径与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome,OSAS)脏器损伤的关系以及大株红景天注射液对其脏器的保护作用.方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测10只健康对照组小鼠(对照组)、11只单纯慢性间歇低氧小鼠(A组)、11只慢性间歇低氧后再复氧小鼠(B组)、11只慢性间歇低氧后使用大株红景天注射液腹腔注射的小鼠(C组)血清中AGEs、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平,用Western Blotting方法检测小鼠大脑及心脏中RAGE及NF-κB蛋白的表达情况,并观察经HE染色后组织形态学改变情况.结果ELISA结果:与对照组相比,A组小鼠血清中ACEs、IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与A组对比,B组及C组小鼠血清AGEs水平有下降趋势(P>0.05);与A组相比,C组血清IL-6水平有所降低(P<0.05).而B组及C组之间差异无统计学意义(P>0.05);而在血清TNF-α水平方面,B组及C组均较A组下降(P<0.05);而B组及C组两组间差异无统计学意义(P>0.05).RAGE免疫组化结果:心脏组织:对照组小鼠RAGE及NF-κB的表达最弱;A组小鼠的NF-κB的表达在各组中表达最强,其RAGE蛋白表达比对照组及B组强,而与C组相仿;C组小鼠RAGE及NF-κB较对照组及B组表达增多.大脑组织:A组的RAGE及NF-κB蛋白在各组小鼠的大脑组织中表达最强;对照组小鼠RAGE表达较少,NF-κB蛋白在各组中表达最弱;与A组相比,C组的RAGE表达稍有减少,而NF-κB的表达则较其有更为明显的下降.HE染色结果:对照组小鼠心肌组织结构清晰完整、界限清楚、排列紧密;而A组小鼠心肌组织排列紊乱,结构、纹理不清,部分肌细胞核固缩深染.B组小鼠心肌结构较A组小鼠清晰,核固缩深染现象亦较其减少,而C组小鼠心肌结构较清楚,排列亦较紧密.结论OSAS可引起多器官、组织如心脏、大脑组织的损害.OSAS可激活AGEs-RAGE/NF-κB通路,调节炎症细胞释放IL-6、TNF-α等炎症因子,或是OSAS易合并多脏器损害的原因之一.大株红景天注射液有一定程度的抗炎作用,可用于防治OSAS多脏器的损害,但其作用机制与AGEs-RAGE/NF-κB信号通路的激活无明显关系.

AGEs-RAGE信号通路在糖尿病肾病中的作用机制及中医药研究进展

糖尿病肾病是临床常见的糖尿病并发症,是导致终末期肾脏病的主要原因之一,也是糖尿病患者致死的重要因素之一。晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)-糖基化终末产物受体(receptor of AGEs,RAGE)信号通路是糖尿病肾病发生发展的重要一环,在糖尿病肾病中的作用机制主要有激活核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB),刺激产生血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF),刺激转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的产生,诱导单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)表达的增强,激活P21肾素-血管紧张素导致细胞功能紊乱,激活烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶引起氧化应激等。中医药治疗糖尿病肾病具有整体调节和多通道、多靶点的优势,可通过阻断AGEs-RAGE信号通路改善糖尿病肾病进展。目前研究存在的问题主要有:AGEs-RAGE下游机制复杂,未完全阐明,其与一些关键因子如NF-κB、VGEF、TGF-β1、MCP-1基因的关系还有待进一步研究证实;单味中药和中药复方的活性成分治疗糖尿病肾病的临床研究和动物实验较多,但针对AGEs-RAGE信号通路的研究较少;目前实验大多于体外进行,其机制和作用靶点尚未明确。今后的研究中,需进一步完善实验设计,深入了解AGEs-RAGE信号通路的作用机制,以期为糖尿病肾病的中西医结合治疗提供一定参考。

通过生物信息学分析鉴定糖尿病视网膜病变的关键生物标志物和免疫浸润

目的:通过生物信息学方法为糖尿病视网膜病变中的相关机制提供理论依据。方法:通过GEO数据库筛选出增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)数据集GSE60439和GSE94019。使用R语言提取GSE60439数据集中的表达数据进行t检验,筛选出差异基因,筛选条件为P<0.05和|log2FC|≥1;采用WGCNA选择GSE94019数据集中与PDR相关的重要模块;对差异基因及重要模块中的基因取交集得到关键基因。对关键基因进行GO及KEGG富集分析;构建PPI网络鉴定出高风险关键蛋白。最后,使用CIBERSORTx分析免疫细胞在PDR中的浸润,采用Pearson相关性检验分析免疫细胞与关键基因的相关性。结果:最终筛选出3个核心基因,即Col1a1、Col1a2、Col3a1,其表达与M2巨噬细胞呈正相关,且核心基因富集于AGEs-RAGE信号通路。结论:正反馈可能存在于M2巨噬细胞、AGEs-RAGE信号通路及胶原基因(Col1a1、Col1a2、Col3a1)之间,即使没有高糖的刺激,这种恶性循环仍可能持续损害视网膜组织。

基于伏邪理论探讨糖尿病肾病的发病机制及分期论治

糖尿病肾病(DN)是糖尿病患者常见的微血管并发症,DN中晚期糖基化终产物(AGEs)与其受体(RAGEs)的结合导致疾病发生和发展,可以基于中医伏邪理论阐释其作用机理。研究发现AGEs-RAGE轴及其后续级联反应与中医学伏邪对疾病进展作用的特点相似,即发病初期的“隐匿性”以及疾病后期的“爆发性”。本文基于伏邪理论,论述DN的发病机制,总结不同性质的伏邪在疾病进展中的作用,并对DN进行分期辨证论治,以及阐释中医药治疗DN的作用机制。

晚期糖基化终产物及其受体RAGE在糖尿病血管并发症中的作用机制

糖尿病血管并发症是糖尿病致死、致残的主要原因,其发病机制尚未完全阐明。目前大量研究表明,晚期糖基化终产物(AGEs)及其受体RAGE在糖尿病血管并发症的发生、发展中起重要作用,将成为治疗糖尿病血管病变的一个新靶点。本文重点阐述AGEs-RAGE系统的信号转导机制及其在糖尿病血管病变中的作用,并探讨中药干预AGEs-RAGE系统治疗糖尿病血管病变的现状和发展趋势。

丹蛭降糖胶囊干预2型糖尿病血管并发症的实验研究

[目的]探讨丹蛭降糖胶囊干预2型糖尿病大鼠血管并发症的机制。[方法]采用高糖高脂饲料联合STZ注射制备2型糖尿病大鼠模型,观察丹蛭降糖胶囊干预8周后模型大鼠主动脉形态学改变、主动脉组织AGEs、RAGE和血清VCAM-1、ICAM-1含量的变化。[结果]高糖高脂饲料联合STZ注射后模型大鼠腹主动脉出现显著病理学改变,腹主动脉AGEs、RAGE含量显著升高(P<0.01),血清VCAM-1、ICAM-1含量显著升高(P<0.01);而丹蛭降糖胶囊各剂量组大鼠的腹主动脉病理学改变得到不同程度改善,腹主动脉AGEs、RAGE含量显著降低(P<0.05或P<0.01),血清VCAM-1、ICAM-1含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。[结论]丹蛭降糖胶囊能够有效防治2型糖尿病模型大鼠主动脉病理损伤,其干预机制与调节AGEs-RAGE通路密切相关。

sRAGE与重症肺炎患者病情程度、应激性高血糖的关系

目的探讨血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)水平与重症肺炎患者病情严重程度和应激性高血糖发生的关系。方法选取2016年6月—2019年5月在马鞍山市人民医院重症医学科住院治疗的成人非糖尿病重症肺炎患者100例、普通肺炎患者100例,以及同期该院健康体检者100例。检测血清sRAGE、晚期糖基化终末产物(AGEs)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。检测重症肺炎患者空腹血糖,并分为合并应激性高血糖(空腹血糖≥7.0 mmol/L)(合并组)和未合并应激性高血糖患者(空腹血糖<7.0 mmol/L)(未合并组)。比较两组患者血清sRAGE水平,采用多元线性回归对sRAGE的影响因素进行分析。结果重症肺炎患者血清sRAGE水平高于健康对照和普通肺炎患者(P<0.05)。合并组血清sRAGE水平高于未合并组(P<0.05)。APACHEⅡ评分[OR=2.295(95%CI:1.877,3.241)]、MODS评分[OR=3.315(95%CI:2.186,5.673)]、sRAGE[OR=1.271(95%CI:1.026,1.573)]、AGEs[OR=1.328(95%CI:1.105,1.792)]是重症肺炎患者发生应激性高血糖的独立影响因素(P<0.05)。结论血清sRAGE在重症肺炎患者尤其是发生应激性高血糖的重症肺炎患者中的表达水平明显升高,sRAGE不仅可反映肺炎患者的疾病严重程度,而且参与应激性高血糖的发生过程。

基于网络药理学和分子对接的逍遥散治疗肝癌并抑郁症的潜在机制探讨

目的通过网络药理学和分子对接方法,探讨逍遥散治疗肝癌并抑郁症的潜在机制。方法通过TCMSP数据库,以逍遥散组方中药中文名称为检索词,设置口服生物利用度(OB)>30%和类药性(DL)>0.18为筛选条件获取中药活性成分与靶点,从GeneCards数据库中获取肝癌和抑郁症疾病相关靶点,并将疾病靶点与药物成分靶点相互交集,获取共同交集靶点后,导入DAVID数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路和基因本体(GO)功能的富集分析,并进行分子对接验证活性成分与关键靶点的亲和力。结果获得逍遥散161个活性成分和238个靶点,而疾病靶点共计11204个;成分靶点和疾病靶点取交集得共同靶点69个;KEGG通路富集在AGEs-RAGE、癌症、HIF-1等信号通路;分子对接显示核心成分3β-乙酰氧基苍术酮与白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)等靶点结合活性良好。结论逍遥散主要通过3β-乙酰氧基苍术酮介导ILIB、TNF、BCL2等靶标,调节AGEs-RAGE、癌症等信号通路,发挥抗炎、免疫调控、促进细胞凋亡等作用,从而改善肝癌和抑郁症的症状。

湿润烧伤膏联合全蝎软膏治疗糖尿病性皮肤溃疡的疗效观察

目的:评价湿润烧伤膏和全蝎软膏联用治疗糖尿病皮肤溃疡创面愈合的效果并探讨其作用机制。方法:选择Wistar大鼠建立糖尿病皮肤溃疡模型,采用随机数字表法将其分为对照组、模型组、全蝎软膏组、湿润烧伤膏组和联用组,以连续饲喂高脂饲料、腹腔注射链脲佐菌素(STZ)及皮肤损伤法制备糖尿病皮肤溃疡大鼠模型。造模后,分别在创伤处进行药物干预处理,空白组和模型组用PBS处理并计算创面愈合率;采用免疫组化、创面组织超微病理结构观察给药后3 d、7 d、10 d和14 d的创面肉芽组织,western-blot检测Smad4蛋白的表达。结果:糖尿病皮肤溃疡模型组的大鼠体重、血糖与正常组相比有统计学差异,成模率为95.45%;经14 d连续治疗后,各治疗组创面愈合率均高于模型组(P<0.05),联用组创面愈合率与对照组水平接近。免疫组化染色结果显示与模型组相比,经药物干预后的创面组织内AGEs和RAGE的表达水平均明显下调(P<0.05);电镜观察结果表明联用湿润烧伤膏和全蝎软膏能够促进胞内细胞器恢复正常水平,其改善效果较单独药物干预组效果更显著;Western-blot检测结果表明各治疗组创面组织内Smad 4蛋白水平较模型组显著降低,但联用组中Smad4蛋白水平下调更显著(P<0.05)。结论:联合应用湿润烧伤膏和全蝎软膏能够有效促进大鼠糖尿病性皮肤溃疡创面的愈合,可能与调控组织中糖基化终末产物AGEs-RAGE信号通路及下调Smad4蛋白表达水平,抑制炎症反应有关。