AGGF1在结直肠癌细胞DNA损伤修复及化疗敏感性中的作用

目的研究血管生成因子AGGF1在人结直肠癌细胞DNA损伤修复及化疗抵抗中的作用及机制。方法顺铂诱导结直肠癌细胞株HCT116细胞DNA损伤模型,运用siAGGF1及siNC转染结直肠癌细胞干扰AFFF1的表达。Western blot实验检测AGGF1、γH2AX基因表达水平,免疫荧光法检测顺铂诱导HCT116细胞DNA损伤(双链断裂)后,γH2AX和AGGF1在损伤位点的募集情况;MTS法检测损伤细胞的增殖情况;免疫组织化学方法检测结直肠癌及癌旁正常组织中AGGF1的表达水平。结果Western blot结果显示顺铂处理HCT116细胞明显下调AGGF1表达,干扰AGGF1的表达抑制了γH2AX和NBS1;免疫荧光实验表明AGGF1和γH2AX共定位,细胞增殖实验表明结直肠癌细胞对化疗的敏感性增加(P<0.01);AGGF1在结直肠癌组织中表达高于相应癌旁组织(P<0.01),表明其可能与肿瘤的恶性表型相关。结论下调AGGF1基因可抑制结直肠癌细胞的DNA损伤修复,提高其对化疗的敏感性,机制上可能与NBS1磷酸化相关。

血管生成因子AGGF1表达与结肠癌患者预后关系的研究

背景:血管生成在肿瘤生长和转移过程中起关键作用。AGGF1是一个新发现的血管生成因子,在多种恶性肿瘤中存在异常表达。目的:探讨AGGF1表达与结肠癌患者预后的关系。方法:收集西安市第一医院2010年1月—2012年12月80例结肠癌手术患者的癌组织和配对癌旁组织标本,以免疫组化法检测AGGF1表达。分析癌组织AGGF1表达与肿瘤临床病理特征和患者预后的关系,以Cox回归模型分析结肠癌患者的预后影响因素。结果:结肠癌组织AGGF1表达阳性率显著高于癌旁组织(67.5%对32.5%,P<0.05),并与肿瘤分化程度、淋巴结转移、血管淋巴管浸润和TNM分期显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,AGGF1阴性表达结肠癌患者的生存率显著高于AGGF1阳性表达患者(P<0.05)。单因素和多因素分析表明,AGGF1与结肠癌患者预后显著相关(OR=2.09,95%CI:1.67～4.45,P=0.011;OR=1.98,95%CI:1.72～4.59,P=0.000)。结论:结肠癌组织中血管生成因子AGGF1表达显著升高,并与肿瘤转移和患者预后不良相关,是一个潜在的预后指标,值得进一步深入研究。

AGGF1、FOXC2和ATG5在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨AGGF1、FOXC2和ATG5与非小细胞肺癌(NSCLC)的相关性,并在其浸润、转移中的可能作用。方法收集2009年2月—2014年5月本院收治的189例NSCLC患者的手术标本,将NSCLC的肿瘤组织作为研究组,并取距肿块>5.0 cm处的正常肺组织作为对照组,采用免疫组织化学染色分别检测AGGF1、FOXC2和ATG5三种蛋白在两组中的表达,并对临床病理数据进行统计学分析和生存分析。结果AGGF1、FOXC2和ATG5蛋白在研究组和对照组中的阳性表达率分别为62.8%(118/188)和30.9%(51/165)、33.0%(62/188)和18.2%(30/165)及52.1%(98/188)和23.6%(39/165),有显著性差异(P<0.05);AGGF1蛋白的表达与NSCLC的TNM分期、分化程度、血管侵犯及淋巴结转移之间差异均有统计学意义(P<0.05);FOXC2蛋白的表达与NSCLC的TNM分期及淋巴结转移之间有显著性差异(P<0.05);ATG5蛋白表达与NSCLC的TNM分期及血管侵犯之间有显著性差异(P<0.05)。Spearman法显示AGGF1、FOXC2和ATG5三种蛋白之间均两两呈正相关关系。Kaplan-Meier法显示上述三种蛋白表达阳性组与阴性组的术后生存率之间,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cox多因素分析显示,在NSCLC中AGGF1蛋白的表达、血管侵犯及TNM分期是独立的预后因素。结论AGGF1、FOXC2和ATG5在NSCLC中均呈明显高表达水平,可能三者都参与了NSCLC的侵袭、转移,但是仅AGGF1可能对预测NSCLC进展和预后有重要意义。

AGGF1调控AMPK-mTOR-ULK1信号通路促进视网膜血管生成机制研究

目的研究G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)对人视网膜血管内皮细胞(HRMECs)血管生成的影响及机制。方法将体外培养的HRMECs随机分为对照组、AGGF1组和AMPK信号通路抑制剂Compound C+AGGF1组,对照组细胞在M199培养基中培养,AGGF1组细胞在M199培养基中加入0.5μg/ml AGGF1进行培养,Compound C+AGGF1组在M199培养基中加入5μmol/L Compound C及0.5μg/ml AGGF1进行培养。培养48 h,分别采用Transwell及Matrigel法检测细胞迁移和管腔形成,采用Western blotting法检测各组细胞的自噬关键信号通路蛋白AMPK、mTOR和ULK1的表达,采用可表达GFP-LC3B融合蛋白的质粒转染细胞,荧光显微镜下观察细胞内自噬的变化。结果AGGF1组中细胞迁移数和管腔形成数均明显高于对照组和Compound C+AGGF1组(均P<0.001),Compound C+AGGF1组细胞迁移数和管腔形成数均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。对照组、AGGF1组和Compound C+AGGF1组细胞中的AMPK、mTOR和ULK1蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。AGGF1组细胞中p-AMPK和p-ULK1值均明显高于对照组和Compound C+AGGF1组,差异均有统计学意义(P<0.01),AGGF1组细胞中p-mTOR值均明显低于对照组和Compound C+AGGF1组,差异均有统计学意义(P<0.05);Compound C+AGGF1组的p-AMPK和p-ULK1值均高于对照组(P<0.01),Compound C+AGGF1组的p-mTOR值低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。对照组细胞中出现较弱的GFP-LC3B绿色荧光,AGGF1组绿色荧光明显强于对照组和Compound C+AGGF1组,自噬增强(P<0.001);Compound C+AGGF1组的绿色荧光强于对照组(P<0.05)。结论AGGF1通过激活AMPK-mTOR-ULK1自噬信号通路促进视网膜微血管内皮细胞的血管生成。

AGGF1在乳腺癌中的表达与预后的关系

目的:探讨AGGF1(angiogenic factor with G and FHA domains 1)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌患者预后的意义。方法:利用免疫组织化学方法检测110例乳腺癌组织及配对癌旁正常组织AGGF1蛋白的表达,并分析其与临床病理指标的关系及对患者预后的影响。结果:在乳腺癌组织中,AGGF1蛋白阳性45例(41%),AGGF1蛋白阴性65例(59%);配对癌旁正常组织中,AGGF1蛋白阳性15例(13.6%),AGGF1蛋白阴性95例(86.4%);AGGF1在乳腺癌组织的表达明显高于配对癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。AGGF1蛋白表达与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移等无相关性(P>0.05);AGGF1蛋白表达与ER,PR,HER-2,增殖指数(Ki-67)等有相关性(P<0.05)。生存分析显示,AGGF1蛋白阳性表达患者的无病生存期(disease-free survival,DFS)与总生存期(overall-survival,OS)明显差于AGGF1蛋白阴性表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素COX比例风险回归模型分析发现:AGGF1蛋白阳性表达与乳腺癌患者的预后相关,为预后的独立预测因子。结论:在乳腺癌组织中,AGGF1蛋白阳性表达,与患者不良预后相关,可作为乳腺癌患者预后预测的指标,也有可能为潜在的治疗靶点。

miR-372调控血管生成因子AGGF1的表达并抑制血管生成

目的 :研究miR-372(miR-372)对新血管生成因子AGGF1基因的表达调控。方法:通过生物信息学预测找到可能靶向调控AGGF1基因的候选miRNA;通过荧光素酶报告基因实验、荧光定量聚合酶链反应(q PCR)和Western blot检测等实验证实miR-372对AGGF1基因表达的靶向调控;通过体外血管内皮细胞成管实验检测miR-372对血管生成的影响。结果:生物信息学预测显示miR-372靶向AGGF1;荧光素酶报告基因实验证实miR-372可通过结合AGGF1基因3′-非翻译区(3′-untranslational region,3′-UTR)而抑制其表达;q PCR和Western blot实验分别表明miR-372在m RNA水平和蛋白水平下调AGGF1表达;体外血管生成实验表明miR-372所介导的AGGF1表达下调可明显抑制血管生成。结论 :miR-372可通过靶向结合AGGF1基因的3′-UTR下调其表达,并抑制内皮细胞血管生成能力。

AGGF1在肝癌中的表达及与预后的关系

目的:探索AGGF1在肝癌中的表达情况及与肝癌患者预后的关系。方法:对180例肝癌组织及癌旁组织进行AGGF1免疫组织化学检测,并对其表达与患者预后的关系进行分析。结果:AGGF1在肝癌组织中的表达比癌旁组织高(P<0.001),Kaplan-Meier曲线分析发现AGGF1表达高的患者生存较差(P=0.002)。COX回归模型分析发现AGGF1可以作为一个独立指标预测肝癌患者术后生存。结论:肝癌患者AGGF1高表达预示着较差预后,并且AGGF1可以作为一个独立因素来预测肝癌患者术后生存。

Aggf1 attenuates hepatic inflammation and activation of hepatic stellate cells by repressing Ccl2 transcription

Liver injury represents a continuum of pathophysiological processes involving a complex interplay between hepatocytes, macrophages, and hepatic stellate cells. The mechanism whereby these intercellular interactions contribute to liver injury and fibrosis is not completely understood. We report here that angiogenic factor with G patch and FHA domains 1(Aggfl) was downregulated in the livers of cirrhotic patients compared to healthy controls and in primary hepatocytes in response to carbon tetrachloride(CC14) stimulation. Overexpression of Aggfl attenuated macrophage chemotaxis. Aggfl interacted with NF-κB to block its binding to the Ccl2 gene promoter and repressed Ccl2 transcription in hepatocytes. Macrophages cultured in the conditioned media collected from Aggfloverexpressing hepatocytes antagonized HSC activation. Taken together, our data illustrate a novel role for Aggfl in regulating hepatic inflammation and provide insights on the development of interventional strategies against cirrhosis.

超声造影联合hPygo2、AGGF1水平检测对老年宫颈癌患者术后疗效的评估分析

目的研究超声造影联合hPygo2、人G补缀FHA域血管生成因子1(angiogenic factor with G and FHA domains 1,AGGF1)水平检测老年宫颈癌患者术后疗效。方法选取126例行手术治疗的老年宫颈癌患者作为研究对象,根据患者术后疗效分为有效组和无效组,两组患者均行超声造影检测,并检测组织中hPygo2、AGGF1的表达情况,比较两组患者术后宫颈癌组织的血流灌注参数,并对影响术后疗效的相关因素进行单因素和Logistic回归分析,探讨影响术后疗效的独立影响因素,以及超声造影与hPygo2、AGGF1水平间的相互关系。结果有效组患者术前AT、TTP显著高于无效组,而PI显著低于无效组(P<0.05)。有效组患者宫颈癌组织中hPygo2、AGGF1表达水平显著高于无效组(P<0.05)。患者肿瘤大小、组织hPygo2和AGGF1表达水平以及影像结果均是影响术后疗效的危险因素。组织hPygo2和AGGF1表达水平、AT、TTP相互之间存在正相关性,均与PI呈现负相关。结论hPygo2、AGGF1在宫颈癌组织高水平表达,而超声造影可有效反应肿瘤血流灌注状态。三者之间存在显著相关性,联合检测可有效反应术后疗效。

AGGF1中和抗体联合抗CTLA-4抗体抑制小鼠色素瘤生长的分子机制研究

目的:探究抗AGGF1中和抗体(RDD-Ab),RDD-Ab + 抗CTLA-4抗体联合治疗对小鼠黑色素瘤的治疗作用。方法:合成AGGF1的GTFQRDDAPASVHSE肽并制备多克隆中和抗体(RDD-Ab)。为了评估RDD-Ab对血管生成活性和黑色素瘤生长的影响,我们实施了小管生成实验、迁移实验、细胞增殖实验、黑色素瘤细胞皮下移植性模型实验和免疫组化等实验。结果:实验结果显示,制备的RDD-Ab可以识别细胞中天然的AGGF1蛋白和过表达的AGGF1蛋白。RDD-Ab可显著抑制血管内皮细胞小管形成、迁移和增殖。与IgG对照组相比,RDD-Ab治疗显著减缓黑色素瘤生长,RDD-Ab + CTLA-4抗体联合治疗时肿瘤生长速度最慢。免疫组化实验也表明,RDD-Ab显著减少瘤内微血管生成与肿瘤细胞增殖,同时,联合治疗可显著增加瘤内CD4+和CD8+淋巴细胞的浸润。结论:RDD-Ab可在体外抑制血管内皮细胞的血管新生功能,具有高效的黑色素瘤生长抑制作用,RDD-Ab + CTLA-4联合治疗黑色素瘤效果更佳(显著增加瘤内CD4+和CD8+淋巴细胞的浸润),这为未来黑色素瘤的临床干预提供了一种新的潜在治疗方案。Objective: To investigate the therapeutic effect of neutralizing antibody (against AGGF1, RDD-Ab), RDD-Ab + CTLA-4 therapy on mouse melanoma. Methods: Synthesize GTFQRDAPASVHSE peptide of AGGF1 and prepare polyclonal neutralizing antibody (RDD-Ab). In order to evaluate the effects of RDD-Ab on angiogenesis and melanoma growth, we conducted tube formation, migration, cell proliferation, subcutaneous melanoma cell transplantation model and immunohistochemistry (IHC). Results: RDD-Ab can recognize both natural AGGF1 protein and overexpressed AGGF1 protein in cells. The experimental results showed that RDD-Ab significantly inhibits the formation, migration, and proliferation of endothelial cell tubules. Compared with the IgG control group, RDD-Ab significantly slowed down the growth of melanoma. IHC experiments showed that RDD-Ab significantly suppressed tumor angiogenesis and proliferation. The combination therapy of RDD-Ab + CTLA-4 antibody has the slowest tumor growth rate, and the combination therapy increases the infiltration of CD4+ and CD8+ lymphocytes robustly in solid tumors. Conclusion: RDD-Ab can inhibit the angiogenesis function of endothelial cells in vitro and has a highly effective inhibitory effect on melanoma growth has an efficient inhibitory effect on melanoma growth, and the combined treatment with CTLA-4 antibody is more effective. This provides a new potential treatment option for clinical intervention of melanoma in the future.

AGGF1-EPCs对小鼠急性肾损伤保护作用的研究

目的:探究AGGF1预处理的EPCs对肾IRI的治疗作用。方法:用淋巴细胞分离液(histopaque-1083)离心分离出单个核细胞层,分离的单个核细胞(Bone marrow mononuclear cells, MNCs)进行鉴定(Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1染色)后用分离纯化的AGGF1蛋白预处理(0.5 μg/mL,洗涤后尾静脉注射) 12 h,之后进行小鼠细胞治疗。小鼠分Sham组、生理盐水组(Saline组,I/R小鼠)、EPCs组(移植EPCs,I/R小鼠)、AGGF1-EPCs组(移植AGGF1蛋白预处理的EPCs,I/R小鼠)共4组,为了评估AGGF1预处理的EPCs植入疗法对肾IRI的影响,我们实施了免疫荧光实验、免疫组化和ELISA等实验。结果:实验结果显示,MNCs来源的EPCs呈现Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1阳性。ELISA实验结果显示,AGGF1-EPCs组小鼠的尿素氮水平(BUN),肌酐(Creatine)与急性肾损伤标志物NGAL水平均较Saline组、EPCs组显著下降,同时,免疫组化分析也显示AGGF1-EPCs组小鼠肾脏的F4/80较Saline组、EPCs组显著下降。此外,血清IL-1β,TNF-α的检测结果也显示,炎症因子(IL-1β, TNF-α)在AGGF1-EPCs组小鼠的中表达最低。结论:AGGF1预处理的EPCs植入疗法可以显著降低缺血再灌注引起的急性肾损伤与炎症反应,对IRI具有良好的改善保护作用,这为未来肾IR的临床干预提供了一种新的潜在治疗方案。Objective: To explore the therapeutic effect of AGGF1 primed-EPCs on renal ischemia-reperfusion injury (IRI). Methods: We centrifuge and separate the bone marrow mononuclear cells (MNCs) using histopaque-1083, and identify the MNCs with Dil-ac-LDL and FITC-UEA-1 staining. After pretreatment with purified AGGF1 protein (0.5 μg/mL), EPCs were washed and injected into the C57BL/6J mice via tail vein. The mice were divided into four groups: Sham group, Saline group (I/R mice), EPCs group (transplanted EPCs, I/R mice), and AGGF1-EPCs group (EPCs pretreated with AGGF1 protein, I/R mice). To evaluate the effect of EPCs implantation on renal IRI, we carried out western blot, ELISA, and immunohistochemistry experiments. Results: Our results showed that EPCs derived from MNCs exhibited Dil-ac-LDL and FITC-UEA-1 positive. The ELISA results showed that the levels of urea nitrogen (BUN), creatinine and acute kidney injury marker NGAL in the AGGF1-EPCs group mice were significantly lower than those in the Saline group and EPCs group. At the same time, immunohistochemical analysis also showed that the NGAL levels and F4/80 in the kidneys of AGGF1-EPCs group mice were significantly lower than those in the Saline group and EPCs group. In addition, we also observed that the inflammatory factors IL-1β, TNF-α were significantly reduced in the AGGF1-EPCs group of mice. Conclusion: The implantation therapy of AGGF1 primed-EPCs significantly reduce acute renal injury and inflammatory response caused by ischemia-reperfusion. This provides a new potential treatment for clinical intervention of renal IR.

AGGF1和HIF-1α及VEGF表达与食管鳞癌放疗预后相关性研究

目的 食管癌是一种常见的上消化道恶性肿瘤,放射治疗是食管癌的主要治疗方法之一。本研究旨在探讨食管鳞癌组织中AGGF1和HIF-1α及VEGF的表达,及其与食管鳞癌临床病理特征、放疗疗效及预后的相关性。方法 采用免疫组化SP法,检测新疆医科大学附属肿瘤医院胸腹放疗科2011-01-01-2015-01-01收治的79例食管鳞癌和20例正常食管组织中AGGF1、HIF-1α和VEGF的表达,结合临床病理特征和随访资料进行相关分析。结果 79例食管鳞癌中AGGF1（χ^2=18.975,P〈0.001）、HIF-1α（χ^2=26.884,P〈0.001）和VEGF（χ^2=22.702,P〈0.001）的表达显著高于20例正常食管组织中的表达。食管鳞癌中AGGF1（χ^2=8.134,P=0.004）和VEGF（χ^2=5.175,P=0.023）的表达与淋巴结转移密切相关;HIF-1α的表达与临床分期（χ^2=5.882,P=0.015）、淋巴结转移（χ^2=7.712,P=0.005）和浸润深度（χ^2=5.538,P=0.019）密切相关。食管鳞癌中VEGF和HIF-1α的表达呈正相关,r=0.333,P=0.003;AGGF1和VEGF的表达呈正相关,r=0.790,P〈0.001。放疗近期疗效与HIF-1α的表达呈负相关,r=-0.246,P=0.029。AGGF1（P=0.170）和VEGF（P=0.229）阳性表达组OS短于阴性组;HIF-1α阳性表达组OS显著短于阴性组,P=0.013。Cox多因素回归分析显示,HIF-1α阳性表达（P=0.002）、浸润深度（P=0.005）和临床分期（P〈0.001）是食管鳞癌患者生存预后的独立因素。结论 AGGF1,HIF-1α及VEGF在食管鳞癌组织中高表达,并与食管鳞癌临床病理特征密切相关,三者高表达可能对食管鳞癌的放疗疗效和生存预后有影响,可为提高食管鳞癌的放疗效果和改善生存预后提供新的思路和方法。

AGGF1在食管鳞癌组织的表达与临床特征及预后的关系

目的 探讨食管鳞癌组织中AGGF1的表达,并分析与食管鳞癌临床特征及预后的关系.方法 采用免疫组化SP法对收治的70例食管鳞癌和30例正常食管组织中AGGF1进行检测,并对其表达与食管鳞癌临床特征及预后进行相关性分析.结果 AGGF1在食管鳞癌组织中的阳性表达率高于正常食管组织[54.29%（38/70）比23.33%（7/30）]（P=0.004）.食管鳞癌中AGGF1的阳性表达与食管鳞癌TNM分期、临床分期、组织病理学及预后密切相关（P均〈0.05）.AGGF1阳性表达者总生产时间较阴性表达者短[（19.7±3.5）个月比（33.2±4.0）个月],差异有统计学意义（P=0.015）.Cox多因素回归分析显示,AGGF1及VEGF阳性表达（P=0.043、0.024）、临床分期（P=0.035）是食管鳞癌患者生存预后的独立影响因素.结论 AGGF1在食管鳞癌组织中高表达,并与食管鳞癌临床病理因素、生存预后密切相关.

AGGF1通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌发生发展

目的研究G补缀FHA域血管新生因子1(angiogenic factor with G-patch and FHA domain 1,AGGF1)调控Wnt/β-catenin信号通路对结直肠癌细胞(colorectal cancer,CRC)增殖、侵袭和上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的可能机制。方法通过裸鼠荷瘤免疫组化法检测AGGF1在正常组织和癌组织中的表达。qRT-PCR和Western blotting检测NCM460、SW620、HT29、HCT116、SW480中AGGF1的mRNA和蛋白表达水平。于HCT116细胞中过表达AGGF1,分为Vector组和AGGF1组;于SW620细胞中敲减AGGF1,分为shControl组和shAGGF1组。CCK-8法和克隆形成试验测定细胞活性和细胞克隆数目。划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭情况。免疫荧光检测细胞E-cadherin、N-cadherin的表达。Western blotting检测细胞E-cadherin、N-cadherin、AGGF1、β-catenin、糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、p-GSK-3β蛋白表达水平。结果AGGF1蛋白表达在CRC组织中明显增高。AGGF1 mRNA和蛋白表达水平在HCT116细胞中最低,在SW620细胞中最高。CCK-8法、克隆形成试验、划痕试验和Transwell试验结果显示,在HCT116细胞中,与Vector组比较,AGGF1组48,72,96 h细胞活性、克隆细胞数目、相对迁移距离、侵袭细胞数显著增加(P<0.05或P<0.01);而在SW620细胞中,与shControl组比较,shAGGF1组结果相反(P<0.05或P<0.01)。免疫荧光和Western blotting检测结果显示,与Vector组比较,AGGF1组E-cadherin荧光表达和蛋白表达水平降低(P<0.01),N-cadherin增强(P<0.05或P<0.01),同时上调AGGF1、β-catenin、p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达(P<0.01);与shControl组比较,shAGGF1组E-cadherin荧光表达和蛋白表达水平显著升高(P<0.01),N-cadherin显著降低(P<0.05或P<0.01),同时下调AGGF1、β-catenin、p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论AGGF1可通过激活Wnt/β-catenin信号通路异常表达,上调β-catenin、p-GSK-3β、N-cadherin表达,下调E-cadherin表达,促进CRC细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,从而促进CRC发生发展。

AGGF1在肿瘤中的作用及其调控机制

血管生成因子含G补缀和FHA域1(AGGF1)是近年来鉴定出来的血管生成因子,其在血管内皮细胞高度表达,可表现出与血管内皮生长因子一样的功能,能够促进新生血管生成。近年来研究发现,AGGF1在肝癌、白血病、胶质瘤和胃癌等多种肿瘤中呈高表达。基于其可参与调控肿瘤血管生成、DNA修复和细胞自噬等机制,高表达AGGF1的肿瘤容易产生耐药及发生转移,其患者的生存与预后较AGGF1低表达的患者更差。深入了解AGGF1影响肿瘤血管生成的作用及具体的分子机制,可为抗肿瘤血管生成的治疗提供新策略。

FHA domain of AGGF1 is essential for its nucleocytoplasmic transport and angiogenesis

Angiogenic factor with G-patch and FHA domains 1(AGGF1) exhibits a dynamic distribution from the nucleus to the cytoplasm in endothelial cells during angiogenesis, but the biological significance and underlying mechanism of this nucleocytoplasmic transport remains unknown. Here, we demonstrate that the dynamic distribution is essential for AGGF1 to execute its angiogenic function. To search the structural bases for this nucleocytoplasmic transport, we characterized three potential nuclear localization regions, one potential nuclear export region, forkhead-associated(FHA), and G-patch domains to determine their effects on nucleocytoplasmic transport and angiogenesis, and we show that AGGF1 remains intact during the dynamic subcellular distribution and the region from 260 to 288 amino acids acts as a signal for its nuclear localization. The distribution of AGGF1 in cytoplasm needs both FHA domain and 14-3-3α/β. Binding of AGGF1 via FHA domain to 14-3-3α/β is required to complete the transport. Thus, we for the first time established structural bases for the nucleocytoplasmic transport of AGGF1 and revealed that the FHA domain of AGGF1 is essential for its nucleocytoplasmic transport and angiogenesis.

人G补缀FHA域血管生成因子1在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的探索人G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)在宫颈癌中的表达及与宫颈癌患者预后的相关性。方法对60例宫颈癌组织及癌旁组织进行AGGF1免疫组织化学法检测,并对其表达及与患者预后的相关性进行分析。结果 AGGF1在宫颈癌组织中的表达比癌旁组织高(P<0.05),Kaplan-meier曲线分析发现,AGGF1表达高的患者生存较差(P=0.004)。Cox回归模型分析发现,AGGF1可以作为独立指标预测宫颈癌患者术后生存。结论宫颈癌患者AGGF1高表达预示预后较差,并且其可以作为一个独立因素来预测宫颈癌患者术后生存。

G补缀FHA域血管生成因子1在糖尿病视网膜新生血管形成中的作用

目的:观察G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)在糖尿病视网膜组织及高糖条件下视网膜血管内皮细胞中的表达,以及AGGF1对视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为对照组和糖尿病视网膜病变(DR)模型组,采用免疫组化法检测视网膜组织中AGGF1的蛋白表达。将体外培养的恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A细胞)随机分为对照组(低糖环境培养)和高糖组(培养基中加入25mmol/L D-葡萄糖),采用免疫荧光法检测细胞中AGGF1的蛋白表达。然后将RF/6A细胞分为对照组和AGGF1处理组,分别采用CCK-8法、Transwell法和Matrigel检测细胞增殖、迁移及管腔形成。结果:AGGF1蛋白在视网膜各层均有表达,在血管内皮细胞中也有明显表达,AGGF1在DR组视网膜中的表达(0.17±0.05)明显强于对照组(0.07±0.02)(P<0.05)。AGGF1蛋白在高糖组和对照组RF/6A细胞中均有表达,AGGF1在高糖下RF/6A细胞中的表达(0.63±0.10)明显强于对照组(0.40±0.03)(P<0.05)。处理12h,AGGF1组细胞增殖率(114.88%±0.84%)明显高于对照组(100.00%±2.17%)(P<0.05);处理24h,AGGF1组细胞增殖率(157.35%±1.89%)明显高于对照组(142.77%±0.50%)(P<0.05);处理48h,AGGF1组细胞增殖率(185.39%±1.90%)明显高于对照组(160.17%±1.33%)(P<0.05)。处理12h,AGGF1组细胞迁移数(127.00±7.00个)明显多于对照组(90.33±6.66个)(P<0.05)。处理12h,AGGF1组细胞管腔数(33.67±1.15个)明显多于对照组(15.33±3.51个)(P<0.05);AGGF1组细胞分支总长度(8226.33±288.55μm)明显多于对照组(6463.33±938.01μm)(P<0.05)。结论:糖尿病视网膜组织和高糖诱导的视网膜血管内皮细胞表达AGGF1蛋白明显增多,AGGF1可促进视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成,提示AGGF1可能参与了DR的视网膜新生血管形成。