二氢杨梅素诱导人肺腺癌细胞系AGZY-83-a凋亡的实验研究

目的研究二氢杨梅素(dihydromyricetin)对人肺腺癌细胞系AGZY-83-a凋亡的影响及其相关机制。方法采用MTT法检测二氢杨梅素对人肺腺癌细胞AGZY-83-a存活率的影响,应用TUNEL法和Caspase-3活性检测观察二氢杨梅素对AGZY-83-a凋亡的作用,并通过共聚焦显微镜观察二氢杨梅素对肺腺癌细胞内钙的影响。结果MTT结果显示,二氢杨梅素50μmol·L-1对AGZY-83-a的增殖有明显抑制作用,并呈剂量和时间依赖关系;TUNEL实验结果显示二氢杨梅素可以引起AGZY-83-a发生凋亡,且具有剂量依赖性;Caspase-3活性检测结果显示二氢杨梅素可增加肺腺癌细胞Caspase-3活性,说明二氢杨梅素可以诱导AGZY-83-a凋亡;二氢杨梅素可升高肺腺癌细胞内钙,平均荧光强度FI可增加20多倍。结论二氢杨梅素可通过增加细胞内钙诱导AGZY-83-a细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。

三氧化二砷和四乙铵对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a增殖和凋亡影响的研究

目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)和四乙铵(tetraethylammonium,TEA)对人肺腺癌细胞AG-ZY-83-a增殖和凋亡的影响,探讨As2O3诱导人肺腺癌细胞株凋亡的机制。方法体外细胞培养人肺腺癌AGZY-83-a细胞株,采用MTT法检测As2O3和TEA对细胞增殖的影响。透射电镜(TEM)、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况。比色法检测细胞内Caspase-3活性改变。结果As2O3和TEA对AGZY-83-a细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.01)。As2O3组对AGZY-83-a细胞增殖抑制率低于TEA+As2O3组(P<0.05)。As2O3和TEA使AGZY-83-a细胞凋亡率,Caspase-3增加,单用As2O3组的细胞凋亡率、Caspase-3活性分别高于TEA+As2O3组(P<0.05)。结论应用TEA部分抑制了As2O3诱导AGZY-83-a细胞凋亡;As2O3诱导AGZY-83-a细胞凋亡可能和As2O3对细胞膜不同的钾离子通道作用有关系。

银杏内酯、4-AP和TEA对AGZY-83-a细胞的作用研究

目的研究中药银杏内酯A、B及钾离子通道阻滞剂4-氨基吡啶(4-AP)和四乙胺(TEA)对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a的抑制作用。方法应用体外培养的人肺腺癌细胞株AGZY-83-a,首先采用MTT法测定不同剂量银杏内酯A、B和4-AP、TEA对肿瘤细胞生长的抑制作用,于酶标仪测OD值(λ=490 nm),计算其抑制率;同时进一步绘制药物作用7天的生长曲线以观察其抗肿瘤作用。结果应用不同剂量银杏内酯A和B 48h后测得的OD值与正常对照组无显著差异,1μmol/L银杏内酯A和B对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为5.05%和2.52%(n=6,P>0.05);不同剂量4-AP、TEA对人肺腺癌细胞有明显的抑制作用,呈浓度依赖关系。1mmol/L4-AP和5mmol/L TEA对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为15.40%和30.69%(n=6,P<0.001)。不同作用时间的银杏内酯A、B对人肺腺癌细胞生长亦无抑制作用;不同作用时间的4-AP和TEA对人肺腺癌细胞有抑制作用。结论银杏内酯A、B对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a的生长无抑制作用。4-AP和TEA对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a有明显的抑制作用,与药物浓度正相关。

三氧化二砷通过升高细胞内钙离子浓度介导肺癌细胞凋亡

目的 研究三氧化二砷 (As2 O3 )对人肺腺癌细胞株AGZY 83 a的抑制作用 ,探讨As2 O3 诱导人肺腺癌细胞株凋亡的机制。方法 采用MTT法、透射电镜、激光扫描共聚焦仪及流式细胞术等方法观察三氧化二砷对人肺腺癌细胞株AGZY 83 a的影响。结果 ①As2 O3 能抑制人肺腺癌细胞株AGZY 83 a的生长 ,呈剂量依赖关系 (P <0 0 1) ,IC50 =1 6 1mg·L-1;②在光学显微镜及电镜下 ,可见As2 O3 作用后的人肺腺癌细胞株AGZY 83 a呈现凋亡中、早期的变化特征 :表面绒毛脱失 ,染色质块状散于核内 ;③流式细胞术显示 :As2 O3 作用后的人肺腺癌细胞株AGZY 83 a细胞凋亡百分率与药物剂量呈依赖关系 ;④LSCM显示 :As2 O3 作用后的人肺腺癌细胞株AGZY 83 a细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)升高 (P <0 0 1) ,呈剂量时间依赖关系。结论 As2 O3 能明显抑制人肺腺癌细胞株AGZY 83 a细胞的生长 ,并诱导人肺腺癌细胞株AGZY 83 a细胞凋亡 ,细胞内 [Ca2 + ]升高可能是诱导细胞凋亡的机制之一。

钾通道阻滞剂对人肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究电压依赖性延迟整流钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)、钙离子激活钾通道阻断剂四乙铵(tetraethylammonia,TEA)对人肺腺癌细胞(AGZY-83-a)的影响,并探讨人肺腺癌细胞株凋亡的机制。方法体外细胞培养法培养人肺腺癌细胞株,采用MTT法检测不同浓度4-AP、TEA对细胞增殖的影响。透射电镜、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况。比色法检测细胞内Caspase-3活性改变。结果不同浓度的4-AP、TEA作用于细胞48h后,与对照组相比各组吸光度值(A490)均明显降低(n=10,P<0.001),并且呈浓度依赖关系。4-AP、TEA组的IC50为3.59mmol/L和3.97mmol/L。4-AP及高浓度的TEA使人肺腺癌细胞株细胞凋亡率增加。经4-AP、TEA处理48h的AGZY-83-a细胞内Caspase-3的A405较正常对照组有显著增加(n=6,P<0.001)。结论钾通道阻滞剂4-AP、TEA对AGZY-83-a细胞增殖有明显的抑制作用,抑制率与药物浓度正相关。诱导人AGZY-83-a细胞凋亡,4-AP和TEA诱导AGZY-83-a细胞凋亡的过程中细胞内Caspase-3活性增加。

三氧化二砷对人肺腺癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的研究三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a的抑制作用,探讨As2O3诱导人肺腺癌细胞株凋亡的机制。方法采用MTT法、透射电镜及激光扫描共聚焦(LSCM)等方法观察As2O3对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a的影响。结果As2O3能抑制人肺腺癌细胞株AGZY-83-a的生长,呈剂量依赖关系(P<0.01),IC50=9.38μmol/L;在光学显微镜及电镜下,可见As2O3作用后的人肺腺癌细胞株AGZY-83-a呈现早期凋亡的变化特征:表面绒毛脱失,染色质块状散于核内;LSCM显示,As2O3作用后人肺腺癌细胞株AGZY-83-a细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)显著升高(P<0.01),呈剂量时间依赖关系。结论As2O3能明显抑制人肺腺癌细胞株AGZY-83-a细胞的生长,并诱导人肺腺癌细胞株AGZY-83-a细胞凋亡,细胞内[Ca2+]升高可能是诱导细胞凋亡的机制之一。