HSP60和CD_(44)V_6在胃腺癌中的表达及其意义

目的研究热休克蛋白60(HSP60)、CD_(44)V_6在人胃癌组织中的表达.方法对60例非癌胃粘膜病变及50例胃腺癌组织手术及内镜活检石蜡标本,应用抗人 HSP60,CD_(44)V_6单克隆抗体,以免疫组织化学检测方法检测 HSP60,CD_(44)V_6的表达.结果 HSP60在慢性浅表性胃炎、肠上皮化生、不典型增生、胃腺癌的阳性率为30%,65%,70%,76%,过表达率为10%,25%,35%,58%.CD_(44)V_6在慢性浅表性胃炎、肠上皮化生、不典型增生、胃腺癌的阳性率为5%,25%,30%,78%,HSP60,CD_(44)V_6在肠上皮化生、不典型增生及胃腺癌中的阳性率和过表达率均明显高于慢性浅表性胃炎(P<0.05);HSP60在胃腺癌组织的过表达率高于肠上皮化生和不典型增生(P<0.05).HSP60在高、中、低分化胃腺癌中的阳性表达率为64.7%,77.7%,75.0%.HSP60在不同分化程度胃腺癌中表达无明显差异(P>0.05),而 CD_(44)V_6在高、中、低分化胃腺癌中的阳性表达率为64.7%,66.2%,91.7%,CD_(44)V_6在低分化胃腺癌的表达明显高于高、中度分化胃腺癌(P<0.05).结论 HSP60,CD_(44)V_6在人胃癌及癌前情况或病变中过度表达,可能与胃腺癌的发生、发展有关,还可能有助于预测胃腺癌的分化程度.

大肠癌组织中Cox-2和FasL的表达及意义

目的:探讨Cox2和FasL蛋白在大肠癌组织中的表达、相互关系及临床意义。方法应用免疫组化SP法检测60例大肠癌、20例大肠腺瘤及20例正常大肠组织Cox2和FasL蛋白的表达情况。结果:1)大肠癌组织、大肠腺瘤和正常大肠组织Cox2表达阳性率分别为78.3%(47/60)、55.0%(11/20)和25.0%(5/20),Cox2在大肠癌组织中阳性表达率显著高于腺瘤组织及正常大肠组织阳性表达率,P=0.000。大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠组织阳性表达率分别为86.7%(52/60)、50.0%(10/20)和20.0%(4/20)FasL在大肠癌组织中阳性表达率显著高于腺瘤组织及正常组织,P=0.000。2)Cox2和FasL的表达与肿瘤组织学分级及肿瘤生长部位无关Cox2与肿瘤Duke’s分期和淋巴结转移有相关性,P值分别为0.0.25和0.006。Cox2的表达与肿瘤大小有关,P=0.005。3)大肠癌组织中Cox2与FasL蛋白的表达为正相关性,r=0.627,P=0.000。结论:大肠癌组织中Cox2和FasL高表达,两者之间的表达强度有等级相关性。Cox2蛋白可通过诱导FasL蛋白的表达上调,增加大肠癌细胞侵袭力,从而成为其促进癌细胞浸润、转移的途径之一。

HLA-DR抗原和HSP70在肝细胞癌中的表达意义

目的探讨 HLA-DR 抗原和热休克蛋白70(HSP70)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义.方法采用免疫组化技术对44例 HCC 和癌旁组织中 HLA-DR 抗原和 HSP70的表达进行检测.结果癌旁正常肝组织中肝细胞未见 HLA-DR 抗原表达.HCC中肿瘤细胞 HLA-DR 抗原表达阳性率为43%.HCC 中 HSP70阳性率明显高于癌旁组织(阳性率分别为68%和27%,X^2=7.3,P<0.01).HLA-DR 抗原和 HSP70表达与癌周淋巴细胞浸润(X_1~2=0.51,X_2~2=3.2,P>0.05)和转移(X_1~2=2.9,X_2~2=2.3,P>0.05)无关,但与癌组织分化程度有关(X_1~2=4.9,X_2~2=4.5,P<0.05).结论 HLA-DR 抗原和 HSP70的异常表达在 HCC 发生、发展中起重要作用,对判断患者预后有一定的价值.

慢性乙型肝炎肝组织中HLA-DR和HSP70的表达意义

目的探讨 HLA-DR 抗原和热休克蛋白70(HSP70)在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及其意义.方法采用免疫组化技术对36例慢性乙型肝炎和20例正常肝组织中 HLA-DR 抗原和 HSP70的表达进行检测.结果正常肝组织中肝细胞未见 HLA-DR 表达.慢性乙型肝炎肝细胞 HLA-DR 表达阳性率为28%,其中,中重度肝炎HLA-DR 阳性率明显高于轻度肝炎(阳性率分别为38%和20%,x^2=13.6,P<0.01).慢性乙型肝炎和正常肝组织中肝细胞 HSP70表达阳性率分别为45%和15%,两者相比差异显著(x^2=6.3,P<0.05).中度和重度肝炎 HSP70阳性率明显高于轻度肝炎(阳性率分别为63%和30%,x^2=3.9,P<0.05).结论肝细胞 HLA-DR 和 HSP70的异常表达在慢性乙型肝炎免疫损伤和免疫保护中起重要作用。

CD_(44)V_6和CD_(15s)抗原在子宫内膜癌中的表达及其与临床相关性研究

目的 :探讨CD44V6、CD15s抗原表达与子宫内膜癌和侵袭转移的关系。方法 :应用免疫组化SABC方法对 5 0例子宫内膜癌标本进行CD44V6和CD15s抗原检测。结果 :CD44V6和CD15s在子宫内膜癌中阳性表达率分别为 74 %和 72 % ,两者呈正相关。CD44V6和CD15s表达与子宫内膜癌的临床分期和病理分级呈正相关 ,并随肿瘤细胞侵袭肌层深度的增加 ,阳性表达率增高。结论 :CD44V6、CD15s高表达提示子宫内膜癌生物学行为不良 ,联合检测CD44V6、CD15s可作为判断子宫内膜癌恶性程度、预测转移和评估预后的生物学指标。

Ki-67、p53蛋白在乳腺癌组织的表达及临床意义

目的探讨Ki-67、p53蛋白在乳腺癌及癌旁组织中的表达及两者之间的关系和临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测80例乳腺癌组织及其癌旁的正常乳腺组织中Ki-67、p53蛋白的表达,分析其与临床病理因素的关系及两者的相关性。结果80例乳腺癌组织中Ki-67蛋白阳性表达率为63.8%,高于癌旁乳腺组织8.8%(P<0.05),其表达与患者年龄、肿瘤大小、ER、PR表达无关,与肿瘤的分期、腋窝淋巴结转移、C-erbB-2表达相关。乳腺癌组织p53蛋白阳性表达率为68.8%,高于癌旁乳腺组织11.3%((P<0.05),其表达与年龄、肿瘤大小、分期、ER、PR表达无关,与腋窝淋巴结转移、C-erbB-2表达相关。Ki-67蛋白与p53蛋白表达之间无关。结论Ki-67、p53蛋白可通过抑制细胞凋亡,对乳腺癌发生和发展起重要作用,是判断乳腺癌生物学行为、预测转移趋势有价值的参考指标。

犬小肠缺血再灌后C-fos,PCNA及Bax的表达意义

目的研究犬小肠缺血再灌注后 C-fos,PCNA 和 Bax 的表达及其意义.方法通过阻断分布范围较小的细小小肠动脉,建立缺血再灌注模型,以免疫组织化学方法研究小肠缺血再灌注0,30,60min和对照组动物小肠组织的 C-fos,增殖性细胞核抗原(proliferating cell nuclear entigen,PCNA)和 Bax 的表达特点.结果小肠缺血再灌注后 C-fos,PCNA 和 Bax 在粘膜层、粘膜下层和肌层的表达均有明显增加.在再灌注30min,三者表达达高峰,但至60min 则有明显下降.C-fos 在粘膜单层柱状上皮的阳性细胞率于再灌注0,30,60min 和对照组动物分别是89%,95%,53.4%和80%,在小肠腺分别为45%,90%,56%和81%,小肠粘膜上皮的 PCNA 阳性细胞率分別为95%,95%,55%和80%,在小肠腺则为82%,95%,60%和80%,但Bax 在小肠粘膜上皮的阳性细胞率分别是60%,95%,60%和10%,而在小肠腺则为30%,80%,10%和10%.结论小肠缺血再灌注后 C-fos,PCNA 和 Bax 的表达明显增加,说明它们的活动与小肠的缺血再灌注后细胞凋亡、增殖、恢复重建及调节功能有关.小肠小范围的缺血再灌注后 C-fos,PCNA 和 Bax 的表达具有发展快,但恢复也均较迅速的特点.本研究结果提示,在小肠手术中,选择较小的动脉进行阻断并缩短其时间可能对减少再灌注损伤和改善伤口修复有益.

非小细胞肺癌组织中Skp2的表达及其与p27^(kip1)和Ki-67蛋白表达的关系

目的:探讨Skp2的表达在非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)发生发展中的作用,及其与p27kip1和Ki67蛋白表达的关系。方法:应用免疫组化SP法检测Skp2、p27kip1和Ki67三种蛋白在60例NSCLC和20例正常支气管黏膜上皮组织中的表达。结果:NSCLC组织中Skp2蛋白表达的阳性率为48.33%(29/60),显著高于正常支气管黏膜上皮组织中的表达,P=0.000。Skp2的表达与肿瘤的组织学类型、肿瘤细胞的分化程度、TNM分期、淋巴结转移和患者吸烟与否显著相关,P值分别为0.038、0.005、0.019、0.010和0.002,但与患者的年龄及性别无关,P值分别为0.833和0.281。NSCLC组织中Skp2表达与p27kip1表达呈显著负相关,P=0.001;而与Ki67表达呈显著正相关,P=0.027。结论:Skp2在NSCLC组织中表达是上调的,可能是通过作用于细胞周期调控蛋白p27kip1,加速了对p27kip1泛素化依赖的蛋白降解,使其表达及代谢发生异常,导致细胞周期失控并促进细胞异常增殖,从而参与了NSCLC的发生和发展。

微波消融治疗小鼠黑色素瘤及对肿瘤血管生成的影响

目的研究微波消融对小鼠黑色素瘤肿瘤负荷、生存期、肿瘤血管生成的影响。方法建立C57BL/6J小鼠B16-BL6黑色素瘤皮下移植模型,随机分成对照组、微波低剂量组、微波中剂量组、微波高剂量组,比较各组瘤重,病理学检测消融后肿瘤坏死、复发情况,免疫组织化学检测VEGF和CD34表达,计算微血管密度(microvesseldensity,MVD),记录其生存期。结果微波消融各组小鼠肿瘤重量较对照组显著减少(P<0.05);病理学观察发现消融病灶肿瘤细胞大量坏死,肿瘤血管破坏;消融后微血管密度MVD计数及血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)表达显著降低(P<0.05);但微波消融各组同对照组比较不具有生存期优势(P>0.05)。结论微波消融可抑制小鼠消融后黑色素瘤病灶血管新生,并减少肿瘤负荷,但并未延长小鼠生存期。

肺癌组织中胸苷酸合酶与细胞增生核抗原蛋白的表达

目的研究胸苷酸合酶(TS)、细胞增生核抗原(Ki-67)在非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中的表达及临床意义;观察TS、Ki-67在NSCLC癌组织表达水平的相关性。方法应用免疫组化SP染色法检测了51例不同临床特征的NSCLC癌组织标本的TS和Ki-67的表达水平。结果TS与Ki-67蛋白总阳性率分别为68.6%(35/51)、72.5%(37/51),在不同组织类型癌组织的表达差异均无显著性;TS与癌组织分化程度差异有显著性(P<0.05),与TNM分期、淋巴结转移差异无显著性(P>0.05);Ki-67与分化、TNM分期、淋巴结转移差异有显著性(P<0.05);TS与Ki-67两者之间的表达水平呈显著正相关(r=0.84),TS各组别的Ki-67表达具有显著差异性。结论TS、Ki-67是判断NSCLC分化及增殖程度有价值的指标。

CEA-mRNA和CA19-9对恶性腹水的诊断价值

目的 :分析 CEA- m RNA和 CA19- 9指标在诊断与鉴别诊断恶性腹水方面的应用价值。方法 :采集腹水为检测标本 ,其中恶性腹水、良性腹水各 32份。应用反转录套式聚合酶链反应技术检测 CEA- m RNA、磁分离酶联免疫测定技术方法检测 CA19- 9。结果 :良性腹水组 ,CEA- m RNA和 CA19- 9阳性率分别为 6 .2 % (2 / 32 )和 0。恶性腹水组 ,CEA-m RNA和 CA19- 9阳性率分别为 78.1% (2 5 / 32 )和 5 9.4 % (19/ 32 ) ,特异性分别为 93.8%和 10 0 % ,两者联检的阳性率为87.5 % (2 8/ 32 )。恶性腹水组与良性腹水组检测结果的差别 ,均具有显著性 (P<0 .0 1)。结论 :在诊断和鉴别诊断恶性腹水方面 ,CEA- m RNA和 CA19- 9均具有较高的特异性和敏感性 ,具有较高的应用价值 ;两者联检 ,可以进一步提高检测敏感性。

白细胞免疫球蛋白样受体A3在类风湿关节炎患者外周血CD14^+单核细胞中的表达

目的:分析白细胞免疫球蛋白样受体A3(LILRA3)在类风湿关节炎(RA)患者外周血CD14+单核细胞中的表达。方法:收集2017年2至8月在浙江大学医学院附属第二医院风湿科住院治疗的RA患者53例和21名该院健康体检者的资料。流式细胞术检测CD14^+单核细胞亚群LILRA3表达,并分析其与RA患者的临床特征、实验室指标、自身抗体和疾病活动度的关系。结果:RA患者外周血CD14+单核细胞中LILRA3表达水平较健康对照组升高(P <0. 01)。LILRA3表达与RA患者压痛关节数、肿胀关节数、红细胞沉降率呈正相关(r=0. 280、0. 371、0. 341,P <0. 05或P <0. 01),但与年龄、病程、Sharp评分、C反应蛋白、血常规及免疫球蛋白等指标均无相关性(均P> 0. 05)。类风湿因子和抗环瓜氨酸肽抗体阳性患者LILRA3的表达率高于阴性患者(均P <0. 05)。以28处关节疾病活动指数(DAS28) 5. 1分作为疾病活动度分组的依据,高疾病活动度组LILRA3表达率较中低疾病活动度组升高,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论:RA患者外周血CD14+单核细胞中LILRA3表达升高,且与疾病活动度相关。

肿瘤-睾丸抗原LAGE-1基因的原核表达纯化和抗血清制备

目的:构建人肿瘤-睾丸抗原LAGE-1的原核表达质粒,表达、纯化LAGE-1融合蛋白并制备GST-LAGE-1多克隆抗体。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增人肝癌组织LAGE-1基因3′端片段,连入原核表达载体pGEX-4T-1(+),构建原核表达质粒pGEX-LAGE-1并测序。将该质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,经包涵体透析复性和谷胱甘肽巯基转移酶纯化系统分离纯化目的蛋白。用纯化的融合蛋白GST-LAGE-1免疫新西兰大白兔,间接ELISA法测定抗体效价,饱和硫酸铵沉淀法纯化抗体,并采用Western blot检测GST-LAGE-1多克隆抗体特异性。结果:RT-PCR扩增得到LAGE-1基因3′端264bp片段,测序结果与GenBank公布序列一致;成功构建pGEX-LAGE-1原核表达质粒,含有该质粒的大肠埃希菌经IPTG诱导后表达相对分子质量约为36×103的蛋白,经包涵体复性和GST融合蛋白纯化系统纯化,得到重组蛋白GST-LAGE-1,纯度达90%;制备兔抗GST-LAGE-1抗体,纯化的抗体经Western blot证实可与目的蛋白特异性结合。结论:获得了纯化的肿瘤-睾丸抗原LAGE-1重组蛋白及其特异性多克隆抗体,为进一步研究LAGE-1抗原在肿瘤免疫治疗中的作用奠定基础。

人类组织相容性抗原-Ⅰ缺失与宫颈癌的相关性研究

目的 探讨人类组织相容性抗原 (humanleucotyteantigen, HLA)表达缺失与宫颈癌的关系。方法 采用SP法检测特异性鼠抗人HLA -Ⅰ类分子单克隆抗体在宫颈癌组织中表达情况。结果 62例宫颈癌组织中有 42例HLA -Ⅰ抗原呈阳性表达, 20例呈阴性表达,阴性率 32. 3%。HLA -Ⅰ抗原阳性表达组织中CD+3 T细胞和CD8+T细胞数量明显多于HLA -Ⅰ抗原阴性表达组织,肿瘤恶性程度及淋巴结转移与HLA -Ⅰ下调有关。结论 宫颈癌组织存在HLA -Ⅰ抗原部分缺失,形成免疫逃逸,导致肿瘤细胞的发生、发展、浸润和转移。

人原发性肝内胆管细胞癌中HCV基因及其抗原表达的意义

目的检测HCV基因及其抗原在人原发性肝内胆管细胞癌中的表达,探讨肝内胆管细胞癌的病因及发病机制。方法用免疫组化技术检测HCV抗原,用原位分子杂交技术检测HCV基因(HCV RNA)。结果在40例肝内胆管细胞癌中,HCVC33c抗原、核心抗原及HCV RNA阳性率分别为52.5％,72.5％和57.5％;在21例癌旁肝组织中,其阳性率分别为63.6％,45.5％和48.5％。结论人原发性肝内胆管细胞癌的发生除与HBV有密切关系外,与HCV慢性感染也有密切关系。

冠心病患者血清胱抑素C、CA125和骨保护素检测的临床意义

【目的】探讨分析冠状动脉粥样硬化性心脏病（CHD）患者血清胱抑素C（CysC）、CA125和骨保护素（OPG）的水平变化及临床意义。【方法】选取本院158例经冠状动脉造影确诊的 CHD 患者作为观察组（CHD组），另选95例健康人作为健康对照组。分别应用免疫比浊法、化学免疫发光法和ELISA法比较不同组别和不同病变支数患者的CysC、CA125、OPG 水平。【结果】与健康对照组比较，CHD组CysC、CA125、OPG水平明显升高（ P ＜0．05或 P ＜0．01）；单支、双支、多支病变组3组血清CysC、CA125、OPG 水平逐渐升高，左室射血分数（LVEF）逐渐下降，且差异均有显著性（ P ＜0．05或 P ＜0．01）；NYHAⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级组血清CysC、CA125、OPG水平逐渐升高，LVEF逐渐下降，且差异均有显著性（ P＜0．05或 P＜0．01）。CysC、CA125、OPG 水平均与冠脉病变支数、心功能级别呈正相关（ P ＜0．01），与 LVEF呈负相关（ P ＜0．01）。【结论】联合检测血浆CysC、BMG、OPG 水平不仅能评价心功能受损程度，而且有助于早期发现CHD和有助于冠脉病变严重程度的判断及预后判断。

食管鳞癌中PTEN和Ki-67蛋白的表达

目的 :探讨食管鳞癌中PTEN和Ki 6 7蛋白表达情况及其临床意义。方法 :采用SP免疫组织化学法对 6 5例食管鳞癌标本进行了检测。结果 :6 5例食管鳞癌中PTEN蛋白的阳性率为 5 8 46 % (38/6 5 ) ,高、中分化组与低分化组相比 ,有显著性差异(P <0 0 5 )。并且 ,食管鳞癌中PTEN与Ki 6 7蛋白表达之间存在显著的负相关关系 (P <0 0 5 )。结论 :PTEN基因的缺失或突变在食管鳞癌的发生发展中可能起重要作用 ,且与肿瘤恶性分化程度及细胞增殖情况密切相关。

槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤抑制作用的研究

目的 :研究槲皮素对人乳腺癌细胞株MCF 7裸鼠移植瘤的抑制作用及其对细胞增殖的影响。方法 :复制MCF 7裸鼠移植瘤动物模型 :2 4只移植成功的裸鼠分为对照组、槲皮素组、多柔比星组及联合用药组 4组 ,每组 6只。观察比较移植瘤的生长情况、移植瘤质量、光镜及电镜观察移植瘤结构的变化 ,Ki 67免疫组化分析对细胞增殖的影响。结果 :对照组移植瘤生长速度明显快于槲皮素组、多柔比星组及联合用药组。移植瘤质量对照组明显大于槲皮素组、多柔比星组及联合用药组 ,P <0 0 1。槲皮素组及联合用药组抑瘤率分别为 3 6 46%和 41 49%。Ki 67标记指数为对照组最高 ( 83 5 3 % ) ,槲皮素组次之( 66 95 % ) ,均高于联合用药组 ( 5 8 80 % ) ,P <0 0 1。结论 :槲皮素可抑制MCF 7裸鼠移植瘤生长及增殖 。

Sle^x在直肠癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨唾液酸化的路易斯寡糖-X(sialyl lewis X,Slex)在直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测60 例直肠癌、30 例正常肠壁、11例远端肠壁浸润癌组织、27例阳性癌转移淋巴结、20例癌结节及1例肝转移灶中Slex 的表达情况。结果:1)Slex 在直肠癌组织、正常肠壁组织、远端肠壁浸润癌组织、阳性癌转移淋巴结、癌结节及肝转移灶中的表达率分别为80. 00%、0、100. 00%、100. 00%、100 .00%和100 .00%。直肠癌与正常肠壁比较,差异有统计学意义,χ2=51 .428 6,P=0 .000 1;直肠癌组织与癌转移淋巴结、癌结节比较,差异均有统计学意义,P 值分别为0. 015 0 和0 .031 4;直肠癌组织与远端肠壁浸润癌组织、肝内转移灶比较差异均无统计学意义,P值分别为0 .191 1和1 000 0。2)在不同直肠癌组织学类型中,高、中分化腺癌组织的Slex表达率明显低于低分化腺癌、黏液腺癌,差异有统计学意义,P=0 .025 3。在肿瘤浸润深度中,pT1、pT2 癌组织中Slex 的表达率明显低于pT3、pT4, 差异有统计学意义,χ2=4 271 4,P=0 .038 8。在Duke’s 分期中,A、B期的癌组织中Slex 表达率明显低于C、D期,差异有统计学意义,χ2 = 5. 424 1,P=0 .019 9。无淋巴结转移癌组织的Slex 表达率明显低于有淋巴结转移组。

p16及增殖细胞核抗原的表达与胃癌临床病理的关系

目的 :研究胃癌中p16蛋白、PCNA表达与胃癌临床病理的关系。方法 :应用免疫组化SP法对5 2例胃癌组织中p16蛋白、PCNA进行检测。结果 :5 2例胃癌组织中p16蛋白、PCNA表达阳性率分别为 4 4 .2 %、71.2 %。p16蛋白随着肿瘤分化程度的降低、恶性程度的增高和浸润深度的加深 ,其表达的阳性率逐渐降低 ,而PCNA的表达则相反。p16蛋白、PCNA表达与胃癌预后有关。结论 :p16蛋白、PC NA的检测可作为判断胃癌恶性程度。