疑患EMS/AHPNS对虾中检出黄头病毒的一种新株型

对2012—2013年从河北、福建和广东3个对虾养殖场采集的12份发生疑似早期死亡综合征/急性肝胰腺坏死综合征(EMS/AHPNS)的样品,采用组织病理学方法、套式RT-PCR检测方法以及快速灵敏检测试剂盒进行了检测。三地来源的养殖对虾样品症状均表现为肝胰腺颜色变淡,部分出现萎缩,空肠空胃,腹节肌肉略微白浊;组织病理切片结果表明,患病对虾肝胰腺血细胞浸润,肝胰腺盲管上皮细胞脱落,继发性细菌感染,淋巴器官和血淋巴细胞内存在核固缩、破裂和细胞质包涵体。按世界动物卫生组织(OIE)手册的套式RT-PCR方法检测,结果显示,黄头病毒(Yellow head virus,YHV)目的产物的阳性样品检出率为66.7%,该方法对这些样品的灵敏度可能很低。目的产物测序后经NCBI Blast,与已报道的YHV相似性为76.5%—89%;系统发育树显示这3个来源的样品位于同一个分支,与已知的YHV/鳃联病毒(gill-associated virus,GAV)株均不相同,其亲缘关系与YHV较近,而与GAV较远。用新研发的YHV快速高灵敏检测试剂盒检测,结果表明,所有样品均为YHV强阳性。以上表明患AHPNS的养殖对虾中存在一种YHV的新株型的感染,这也是我国首次检测到YHV的感染。

新型维甲酸AHPN对非小细胞肺癌H460细胞凋亡诱导作用的实验研究

目的通过体外实验评价新型维甲酸AHPN对人肺癌细胞的抑制作用。方法应用MTT分析法、流式细胞术、形态学观察AHPN对人肺癌H460细胞的作用。结果AHPN对H460细胞的生长具有抑制作用，生长抑制率有剂量和时间依赖关系。流式细胞仪分析结果显示H460细胞有G0～G1期阻滞和细胞凋亡发生。人肺癌H460细胞在AHPN的作用下，发生了细胞凋亡的形态学改变。结论AHPN能够诱导H460细胞发生凋亡，且凋亡的发生与细胞周期阻滞相关；随浓度和时间的延长，G0-G1期细胞的比例增高。

新型维A酸AHPN促人皮肤恶性黑素瘤A375细胞凋亡及机制研究

目的:探讨新合成维A酸AHPN对体外培养的皮肤恶性黑素瘤细胞系A375的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法:噻唑蓝(MTT)法测定AHPN对A375细胞系的增殖抑制作用,光镜观察药物对细胞形态的影响,用流式细胞术研究药物对细胞凋亡及细胞周期的影响。基因系统测定体外A375细胞中AHPN作用与核转录因子NF-κB活化关系。结果:维A酸AHPN可有效抑制A375细胞的生长,并具有剂量依赖性。AHPN可促进A375细胞的凋亡及G1期抑制;可增强A375细胞NF-κB活性。结论:AHPN可有效抑制A375细胞的增殖并诱导其凋亡。AHPN对A375细胞的促凋亡作用与NF-κB活化有关。

Apoptotic effect and mechanisms of AHPN on human skin malignant melanoma cell A375

Objective： To study apoptotic effects of synthetic retinoic acid 6-[3-（1-adamantyl）-4-hydroxyphenyl]-2-naphthalene carboxylic acid（AHPN） on human skin malignant melanoma A375 cells in comparison with the natural ligand all-trans-retinoic acid（ATRA） in vitro and the mechanisms related to the actions of AHPN. Methods：MTT assay was used to determine the anti-proliferative effects of AHPN and ATRA on A375 cells. Flow cytometry was performed to investigate the influence of AHPN and ATRA on cell cycle and cell apoptosis. In addition, transfection and luciferase activity assays were employed to explore the mechanisms of how AHPN executes its proapoptotic function. Results：Firstly, AHPN promoted apoptosis and GI arrest in A375 cells compared with ATRA. Secondly, the activity of NF-K B in A375 cells treated with AHPN increased 2-3 times compared with solvent DMSO treatment. Conclusion：AHPN, in comparison with ATRA, is a more effective alternative for therapy of malignant melanoma. The potentially proapoptotic function of AHPN requires activation of NF-K B.

AHPN衍生物的合成及其与RARγ的结合活性研究

目的本实验以6-{3'-(1-金刚烷基)-4'-羟基苯基}-2-萘甲酸(AHPN)母核为结构基础,设计、合成一系列AHPN衍生物,并对这些衍生物做初步的活性筛选,期望找到活性显著的衍生物。方法以对溴苯酚和1-金刚烷醇为原料经取代、缩合、氧化、还原等反应合成AHPN衍生物,经过^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、HR-MS表征,并利用Biacore技术检测衍生物与蛋白质之间的结合能力。结果衍生物7c、6c、6e、6h显示出了显著优于先导化合物AHPN与视黄酸核受体γ(RARγ)的结合能力,亚磷酸二甲酯基与氮杂环的引入提高了该类化合物的活性。结论该类AHPN衍生物与RARγ结合能力显著,有进一步研究的价值。

新型维甲酸对乳腺癌细胞周期蛋白D1、E表达的影响

目的 研究新型维甲酸AHPN对乳腺癌细胞的生长抑制的可能机制。方法 应用细胞生长抑制试验及Western印迹法 ,研究新型维甲酸对乳腺癌细胞株MDA MB 435细胞的生长抑制现象、不同时间点细胞内周期蛋白D1、周期蛋白E蛋白表达情况。结果 AHPN可有效地抑制MDA MB 435细胞的生长 ,周期蛋白D1的蛋白表达随药物的作用时间的延长而逐渐降低 ,但周期蛋白E的蛋白表达却无明显的改变。结论 AHPN可有效地抑制人乳腺癌细胞株MDA MB 435细胞的生长 ,这种抑制作用可能通过降低周期蛋白D1的蛋白表达实现 。

亚硝酸盐氮胁迫下凡纳滨对虾对副溶血弧菌的易感性

为探讨亚硝酸盐氮胁迫对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）急性肝胰腺坏死综合征（Acute Hepatopancreatic Necrosis Syndrome, AHPNS）发生的影响,设置1个凡纳滨对虾对照组和4个不同亚硝酸盐氮质量浓度（2.0、4.0、6.0和10.0 mg/L）胁迫组,亚硝酸盐氮暴露20 d,于凡纳滨对虾后腹肌注射副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）进行感染。观察到在感染后9~24 h各实验组出现死亡高峰,濒死对虾表现出与AHPN相同的临床症状,48 h后,各实验组对虾不再出现死亡,对照组和各实验组对虾累计死亡率分别为0、4%、8%、16%和24%。其中,4.0 mg/L实验组对虾累计死亡率与2.0 mg/L实验组差异不显著（＞0.05）,但显著低于6.0和10.0 mg/L实验组（＜0.05）。感染副溶血弧菌后,对照组、2.0和4.0 mg/L组凡纳滨对虾血清ALT活性先上升后下降,6.0和10.0 mg/L实验组血清谷丙转氨酶（ALT）活性持续上升。对照组和2.0 mg/L实验组对虾血清谷草转氨酶（AST）活性先上升,96 h后开始下降,4.0、6.0和10.0 mg/L实验组AST活性持续升高。对照组、2.0和4.0 mg/L实验组对虾ALP活性呈现先升高后降低的趋势,6.0和10.0 mg/L实验组对虾碱性磷酸酶（ALP）活性持续降低。对照组对虾溶菌酶（LSZ）活性在各取样时间点显著高于6.0和10.0 mg/L实验组（＜0.05）,而与2.0和4.0 mg/L实验组差异不显著（＞0.05）。结果表明,亚硝酸盐氮胁迫能降低凡纳滨对虾的免疫力,增加其对副溶血弧菌的易感性。为预防AHPNS的暴发,养殖水体中亚硝酸盐氮质量浓度应控制在4.0 mg/L以下。

基于增广混合Petri网的CPS事件建模

信息物理融合系统是一类将信息系统和物理系统连接并融合在一起的混合系统,包含了感知、通信、计算与控制等多种技术,其系统操作既包括离散的计算过程,又包括连续的物理过程。针对此特性,提出一种以事件为驱动、以数据为核心的增广混合Petri网模型。首先,CPS具有事件驱动的内在属性,为事件定义1个用于赋予数据值的变量因子,以数据作为事件执行程度的核心;其次在混合Petri网的基础上加入时间和空间属性,以及为变迁的发生引入条件弧概念;最后,通过对自适应巡航控制系统的运行机理进行建模分析,验证了所提出模型的可行性。