AHR基因多态性与维持精子数量的关联性

目的研究芳(香)烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AHR)基因两个单核苷酸多态性位点:rs2066853和rs215840与中国人群特发性男性不育的相关性。方法选取特发性男性不育病例136例和正常可育对照456人作为研究对象,采用飞行质谱的方法对SNP进行基因分型。结果 AHR基因rs2066853与寡弱精子症有相关性(P=0.03964,OR=1.873,95%CI:1.021-3.436);rs2066853AA基因型以及rs215840AA基因型携带者的精子密度(70.4028±49.86762和57.7250±33.95094)均显著低于GG基因型携带者(89.1207±61.24698和70.4028±49.86762),差异有统计学意义(P=2.73E04和P=0.006);构建rs215840-rs2066853的单倍型,GA单倍型在寡弱精子症组中的分布(50%)高于对照组(34.8%),差异有统计学意义(P=0.0397)。结论 AHR基因可能对于维持精子数量起到作用。

AHR小干扰RNA对肝癌HCCLM3细胞体外增殖和体内肿瘤生长的影响

目的 :探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)基因表达对肝癌HCCLM3细胞增殖和迁移的影响及其可能的作用机制。方法 :将AHR基因特异性小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)转染人肝癌HCCLM3细胞后,应用实时荧光定量-PCR法检测AHR mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测AHR和应激激活的蛋白激酶(stress-activated protein kinase,SAPK)/c-Jun N-末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK 1/2)和c-Jun蛋白及其磷酸化水平,CCK-8(cell counting kit-8)法和Transwell法检测AHR-siRNA转染后对HCCLM3细胞增殖和迁移能力的影响。合成AHR基因特异性小发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA),构建稳定干扰AHR基因表达的重组病毒载体pMKO.1/puro-shAHR,并将其感染HCCLM3细胞,感染后的细胞接种于裸鼠皮下建立移植瘤模型,观察移植瘤的生长情况;蛋白质印迹法检测pMKO.1/puro-shAHR感染后HCCLM3细胞及裸鼠皮下移植瘤组织中AHR蛋白的表达水平。结果 :AHR-siRNA转染组HCCLM3细胞中AHR mRNA和蛋白的表达水平明显下降(P<0.01),细胞的增殖和迁移能力受到抑制(P<0.01);SAPK/JNK、ERK 1/2和c-Jun的磷酸化水平降低(P<0.01)。pMKO.1/puro-shAHR感染后的HCCLM3细胞裸鼠皮下移植瘤体积和质量明显低于对照组(pMKO.1/puro-shNC感染HCCLM3细胞)(P<0.01),pMKO.1/puro-shAHR感染后的HCCLM3细胞及裸鼠皮下移植瘤组织中AHR蛋白的表达水平降低(P<0.01)。结论 :AHR可能通过上调SAPK/JNK、ERK 1/2和c-Jun的磷酸化水平而促进HCCLM3细胞的体外增殖和迁移。