皖南蝮蛇毒抑瘤组分-Ⅰ对胃癌MKN-28细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的:探讨皖南蝮蛇毒抑瘤组分-Ⅰ(agkistrodon halys venom antitumor componentⅠ,AHVAC-Ⅰ)对胃癌MKN-28细胞生物学行为的影响作用。方法:不同实验浓度(5、10和15μg/mL)AHAVC-Ⅰ处理胃癌细胞MKN-2824 h后,采用细胞增殖和毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖活力;划痕实验和Tanswell小室检测细胞迁移能力;激光共聚焦显微镜(annexin VmCherry/DAPI双染)和流式细胞术(annexin VFITC/PI双染)检测细胞凋亡;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Caspease-3的表达水平。结果:AHVAC-Ⅰ各浓度组分别与正常对照组相比结果显示,随着AHVAC-Ⅰ浓度的增加,MKN-28细胞增殖活力逐渐下降(P<0.01),细胞迁移能力逐渐被抑制(P<0.01),细胞凋亡率增高(P<0.05),凋亡相关蛋白Caspease-3表达上调(P<0.01)。结论:AHVAC-Ⅰ抑制胃癌细胞MKN-28增殖和迁移,诱导其凋亡。

皖南蝮蛇抑瘤组分Ⅰ对人胃癌SGC-7901细胞作用机制的初步探讨

目的:探讨皖南蝮蛇抑瘤组分Ⅰ(AHVAC-Ⅰ)对人胃癌SGC-7901细胞作用的基本机制。方法:本实验选择SGC-7901细胞作为研究对象,体外条件下传代培养。按实验目的分为正常对照组和AHVAC-Ⅰ浓度组。MTT法检测不同浓度的AHVAC-Ⅰ对SGC-7901细胞的增殖抑制作用,通过化学荧光法对细胞内线粒体膜电位(△Ψm)分析。结果:AHVAC-Ⅰ能抑制SGC-7901细胞增殖,在一定范围内(3~30 mg/L)呈剂量依赖性,引起SGC-7901细胞出现死亡并伴随有染色质聚集、核破碎、凋亡小体等典型的凋亡形态学特征;此外还检测到有△Ψm降低现象。结论:AHVAC-Ⅰ对SGC-7901细胞的作用与线粒体凋亡途径有关,作用机制之一是通过降低△Ψm诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡。

皖南蝮蛇抑瘤组分Ⅰ急性毒理研究

目的 探究皖南蝮蛇抑瘤组分Ⅰ(Agkistrodon Halys venom antitumor component-I,AHVAC-Ⅰ)对小鼠的急性毒理反应,评价AHVAC-Ⅰ作为一种新的抗肿瘤药物使用的安全性。方法 采用小鼠半数致死量法,将120只SPF小鼠随机分为对照组,AHVAC-Ⅰ剂量组(1.00 mg/kg、1.44 mg/kg、、2.96 mg/kg、4.25 mg/kg),每组20只小鼠。按分组给相应剂量腹腔注射给药一次。于第7天,眼球取血检测小鼠肝肾功能(ALT、AST用于检测肝功能;CR、BUN用于检测肾功能),HE染色法检测脏器组织病理形态表现;根据LD_(50)值,1.00 mg/kg与1.44 mg/kg蛇毒组例入低剂量组,2.06 mg/kg蛇毒组为中剂量组,2.96 mg/kg蛇毒组例入高剂量组。结果 小鼠腹腔注射AHVAC-Ⅰ的LD_(50)是2.585 mg/kg,其95%可信限为2.233~3.069 mg/kg。与对照组相比,中、高剂量组小鼠血清中ALT、AST、CR、BUN水平显著升高(P<0.05),而低剂量组小鼠血清中的ALT、AST、CR和BUN均无明显变化。病理检查发现中、高剂量组小鼠的肝、肾有变性损伤。中剂量组肝组织可见部分肝细胞轻度水肿,胞体增大,胞浆透亮;高剂量组肝组织可见肝细胞点状坏死,肝细胞水肿,双核增多;中剂量组肾组织可见部分肾小球水肿,囊腔变小,肾小管轻度水肿;高剂量组肾组织可见肾小球水肿囊腔变小甚至消失,周围肾小管轻度水肿。而低剂量AHVAC-Ⅰ组小鼠肝脏、肾脏、心肌均未发现明显的病理变化。结论 低剂量AHVAC-Ⅰ不会引起小鼠严重的急性毒性反应,当浓度超过2.06 mg/kg对小鼠的主要毒性靶器管为肝脏与肾脏。