自身免疫性肝炎患者肝组织程序性细胞死亡因子1及其配体1的表达及其与临床的相关性

目的通过检测程序性细胞死亡因子1(PD-1)及其配体1(PD-L1)在自身免疫性肝炎(AIH))患者不同分期肝组织中的表达情况,探讨其在AIH发病机制中的作用。方法收集43例AIH患者(包括活动期31例和缓解期12例)肝组织,并选择9例健康者为对照组。应用免疫组织化学方法结合图像定量分析系统检测肝组织内PD-1及PD-L1的表达情况,并比较不同病情分期PD-1及PD-L1表达的差异。结果 AIH患者肝组织PD-1为(10.12±5.31)%,高于对照组(1.74±0.37)%,(P<0.05),AIH活动期肝组织PD-1为(15.68±6.31)%,高于缓解期(6.24±3.25)%,(P<0.05)。AIH患者肝组织PD-L1为(7.45±4.29)%,高于对照组(1.48±0.32)%,(P<0.05);AIH活动期肝组织PD-L1为(9.47±4.67)%,高于缓解期(4.78±2.43)%(均P<0.05)。结论 PD-1及其配体PD-L1在AIH患者肝组织中高表达,提示其可能参与了AIH的发病机制。

自身免疫性肝炎肝穿标本中高迁移率族蛋白B1免疫组织化学研究

目的观察自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)患者和健康供肝标本中人高迁移率族蛋白B1(high mobility groupbox-1 protein,HMGB1)的表达情况,探讨HMGB1蛋白与AIH发病的相互作用。方法免疫组织化学方法观察55例AIH患者肝穿组织标本和10例健康肝移植供肝标本中HMGB1蛋白表达情况。结果AIH患者的肝穿标本与健康肝脏标本相比,肝细胞中HMGB1阳性表达明显增多,HMGB1阳性颗粒主要分布在肝细胞核和Kuffer细胞核中,在点灶状坏死区和界面炎症区浸润的炎性细胞细胞核和细胞浆内可见HMGB1阳性颗粒。结论HMGB1是AIH发生发展中一个重要的炎症蛋白。

自身免疫性肝炎患者血清中高迁移率族蛋白B1检测及临床意义

目的采用ELISA检测方法,初步探讨人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与自身免疫性肝炎(AIH)发病的相互作用关系。方法将纯化的HMGB1蛋白,包被ELISA检测微孔板,检测AIH患者和健康献血员的血清分别165份和69份,分析比较AIH患者和健康献血员的血清中抗HMGB1抗体的分泌情况。结果AIH患者血清中抗HMGB1抗体的阳性率明显高于健康献血员(78.7%VS50.7%,P<0.05)。直线回归分析显示,抗HMGB1抗体滴度(OD值)与ALT水平有很好的相关性(相关系数r=0.968)。结论HMGB1是AIH疾病发生发展中一个重要的炎症蛋白,与疾病的炎症活动程度有很好的相关性。

自身免疫性肝炎新型抗原分子高迁移率族蛋白B1的克隆表达鉴定及蛋白纯化

目的获得高纯度的人高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),为制备单克隆抗体及研究其与自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的关系打基础。方法应用PCR从乳腺文库中扩增得到HMGB1基因片段,并将其克隆到pET28a(+)载体上,对获得的pET28a(+)-HMGB1重组质粒扩增后进行PCR、酶切和测序鉴定。将鉴定完全正确的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析和Western blotting鉴定。最后进行大量诱导并纯化,得到带His标签的HMGB1蛋白。结果成功构建pET28a(+)-HMGB1重组质粒,并经诱导表达,得到了纯化的His-HMGB1蛋白。结论构建pET28a(+)-HMGB1重组质粒并得到其表达蛋白,为今后深入研究HMGB1在AIH中的作用机理提供有力的实验工具。

120例I型自身免疫性肝炎临床特征与疗效相关因素分析

目的分析120例I型自身免疫性肝炎（AIH-1）患者的临床表现特征以及疗效相关因素，以期进一步优化AIH-1患者的临床诊疗工作。方法回顾性分析120例AIH-1患者的临床症状、体征、生化检查、免疫球蛋白、自身抗体、肝脏组织学检查、治疗方案及疗效。结果AIH-1患者以乏力、黄疸、脾大为主要临床表现，白蛋白（ALB）水平轻度下降，总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）和1一谷酰转移酶（GGT）升高；治疗失败组与缓解组比较，ALB、ALT和AST降低（P〈0．05），TBIL和DBIL升高（P〈0．01）。AIH．1多因素分析显示，ALB、TBIL、AST、免疫球蛋白G（IgG）及症状与疾病预后相关。结论AIH．1患者的临床特征对早期诊断有重要意义；ALB、TBIL、AST、IgG、症状可能与AIH-1预后相关，早期判断及早期特异治疗有可能预后。