AK-HER2与参照药治疗HER2阳性转移性乳腺癌患者的疗效、体内代谢特征、安全性和免疫原性比较:一项多中心、随机、双盲Ⅲ期等效性临床试验

背景与目的:针对人表皮生长因子受体(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性转移性乳腺癌患者,曲妥珠单抗治疗能够延长患者总生存期,显著改善患者预后,但是原研曲妥珠单抗价格较高。生物类似药理论上具有相当的疗效和安全性。本临床试验旨在评估曲妥珠单抗生物类似药AK-HER2与原研曲妥珠单抗在HER2阳性转移性乳腺癌患者中的疗效、药代动力学、安全性和免疫原性。方法:这项多中心、随机、双盲Ⅲ期临床试验在中国43个分中心开展。本研究遵从研究方案、赫尔辛基宣言阐明的伦理学原则和药物临床试验质量管理规范,获得医院医学伦理委员会批准,临床试验注册机构为国家药品监督管理局(临床试验批件号为2015L04224,临床试验登记号为CTR20170516)。在入组前获得了受试者的书面知情同意书。入组患者随机分配至AK-HER2组与对照组,分别接受AK-HER2或原研曲妥珠单抗(赫赛汀®,初始负荷剂量8 mg/kg,维持剂量6 mg/kg,每3周为1个治疗周期,总治疗时间为16个周期)与多西他赛(剂量75 mg/m2,治疗持续至少9个周期)联合治疗。本临床试验主要研究终点是第9个周期AK-HER2组与对照组的客观缓解率(objective response rate,ORR)。次要疗效终点包括ORR16、疾病控制率(disease control rate,DCR)、临床获益率(clinical benefit rate,CBR)、无进展生存期(progression-free survival,PFS)和1年生存率。本研究在第6个周期用药后,随机选择100例受试者(AK-HER2组∶对照组=1∶1)进行血样采集,采集时间点分别为输注45 min时(即给药结束)、给药结束后第4、8、24、72、120、168、336、504 h。采集后血样进行PK参数(PK parameter set,PKPS)分析。其他评估指标包括安全性和免疫原性评估。结果:2017年9月—2021年3月期间共有550例HER2阳性转移性乳腺癌患者入组该临床试验。AK-HER2组(n=275)和对照组(n=272)的ORR9分别为试验组受试者(n=237)达CR或PR的有129例,ORR9为54.4%,对照组受试者(n=241)达CR或PR的有134例,ORR9为55.6%。AK-HER2组与对照组的ORR9比率为97.9%[90%置信区间(confidence interval,CI):85.4%~112.2%,P=0.784]差异无统计学意义。在所有次要疗效终点中,两组均未观察到差异有统计学意义。本研究进行了AK-HER2组和对照组药代动力学(pharmacokinetics,PK)参数的均值比值分析,结果显示,两种药物的药代动力学特征相似。原研曲妥珠单抗治疗导致药物减量或暂停的治疗期间出现的不良事件(treatment emergent adverse event,TEAE)发生率,AK-HER2组为3.6%(10例),对照组为8.1%(22例),两组差异有统计学意义(P=0.027)。AK-HER2组发生率较对照组明显减少,其余组间差异均无统计学意义。抗药抗体(anti-drug antibody,ADA)与中和抗体(neutralizing antibody,NAB)阳性率组间差异均无统计学意义(P=0.385和P=0.752)。结论:在HER2阳性转移性乳腺癌患者中,AK-HER2与参照药原研曲妥珠单抗的疗效、药代动力学、安全性和免疫原性相当。

黄鳝AK1基因序列特征及在性腺中的表达模式分析

【目的】探究腺苷酸激酶1(adenylate kinase 1, AK1)序列特征及其在黄鳝性腺发育过程中的功能。【方法】克隆黄鳝AK1基因序列,对其进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测AK1在黄鳝各组织、不同发育时期性腺以及H2O2孵育后卵巢中的表达情况,并利用免疫组化技术定位AK1在黄鳝性腺中的表达位置。【结果】黄鳝AK1编码区序列为630 bp,编码209个氨基酸残基,具有AK家族保守的NMP和LID结构域,与其他鲤科鱼类的同源基因具有较高的序列相似性;黄鳝AK1在垂体、眼睛、心、肝、肾、肠、脾、肌肉、血液、卵巢和精巢中均有表达,在肌肉组织中的表达量最高,在血液中表达量最低。AK1在卵巢发育周期的卵黄生成早期性腺和性逆转周期的间性晚期性腺表达量最高,而在卵黄生成中晚期性腺和间性早期性腺表达最低。H2O2孵育后各浓度组AK活性的表达均呈现先下降后上升的趋势(P<0.05),浓度越高变化的趋势越明显(P<0.05);而AK1的表达均受到抑制。AK1主要定位于卵黄生成早期性腺的颗粒细胞中。【结论】AK1参与了黄鳝性腺的发育,这为揭示黄鳝性腺发育过程中的能量代谢等生物学过程奠定了一定的基础。

金宝AK96血液透析机故障维修五例

血液透析是一种安全、易于实施且应用广泛的血液净化方法,常用于肾脏替代治疗[1-2]。血液透析的作用包括清除体内毒素、纠正酸碱平衡紊乱、清除体内多余水分及纠正电解质失衡[3-4]。血液透析机在血液透析治疗过程中发挥至关重要的作用。由于血液透析机结构复杂、运行条件精确,且运转时间长,易导致设备部件损耗和故障的发生。为确保患者治疗效果和生命安全,有必要参加设备维修培训[5]并加强风险管理[6],以完善维修方法并提高维修效率。本研究结合我院在用的23台金宝AK96血液透析机使用情况,分析血液透析机开机自检和治疗中出现的故障及维修方法,以供同行参考。

轮速传感器AK协议解码系统设计与实现

带AK协议的轮速传感器为汽车主动安全控制系统提供了轮速信息的同时,还提供了转动方向以及诊断等其他信息,为控制系统可靠性的提升发挥了重要的作用。文章以机电制动控制器(Electromechanical Brake System,EMB)为例,采用分立电路与EMB控制器自带的微处理器设计解码系统,进行轮速传感器AK协议解码。通过对AK协议的关键特征进行分析,设计了硬件信号处理电路,分别提取出速度信号与数据信号。基于微控制单元(Microcontroller Unit,MCU)现有的AUTOSAR软件架构,以复杂驱动的形式设计解码软件,进行速度与数据解码。搭建测试平台,对解码系统进行测试。测试结果证明,解码系统对速度和数据的解码结果准确,具有工程实用性。

多目标规划的ak—较多有效点与ak—较多最优点

在文 [1]中 ,作者引入了多目标规划的较多有效点及较多最优点的概念 ,并讨论了它们的性质。本文首次提出了 ak—较多有效点与 ak—较多最优点的概念 ,并讨论了 ak—较多有效点、ak—较多最优点、ak—较多有效解、ak—较多最优解的相关性质。

GPR43调控Akt蛋白磷酸化抑制结肠癌细胞LAT1的表达

目的分析GPR43在结肠癌中的表达情况,探究GPR43抑制结肠癌发生发展的可能作用机制。方法采用qPCR方法检测人结肠癌细胞株HT29和HCT116中GPR43和LAT1 mRNA表达;留取本院结肠癌组织(16例),癌旁正常组织(16例),结肠腺瘤组织(15例)标本,IHC法检测各组织中GPR43及LAT1的蛋白表达情况;脂质体细胞转染技术敲低结肠癌细胞HT29(KD组)中GPR43基因,观察LAT1的表达情况;Western blotting检测Akt蛋白的表达水平,同时,设立GPR43的siRNA阴性对照(NC组)。结果HT29细胞中高表达GPR43 mRNA的同时低表达LAT1 mRNA,而不表达GPR43 mRNA的HCT116细胞中同样高表达LAT1 mRNA;GPR43蛋白在癌旁正常组织、结肠腺瘤、结肠癌组织中的表达呈递减趋势(P<0.05),而LAT1蛋白表达呈递增趋势(P<0.05);在HT29细胞实验中,敲低GPR43后LAT1 mRNA表达明显升高(P<0.05),KD组中Akt蛋白的表达明显高于NC组。结论GPR43通过调控Akt蛋白磷酸化抑制结肠癌细胞LAT1表达。

MtbAK细胞与CD3AK、LAK细胞体外增殖和杀瘤活性比较

目的 :比较结核杆菌抗原激活的杀伤细胞 (MtbAK)、CD3AK及LAK细胞的体外增殖能力和杀瘤活性。方法 :分别用结核杆菌抗原 (Mtb Ag)、CD3mAb和rIL 2刺激人外周血单个核细胞 (PBMC) ,在含rIL 2的RPMI 16 40培养液中诱导扩增MtbAk、CD3AK和LAK细胞 ,用计数法动态观察细胞扩增情况 ,在流式细胞仪上分析MtbAK中的γδT细胞比例 ,以MTT法检测三种扩增细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性。结果 :与CD3AK和LAK细胞相比 ,MtbAK细胞具有更强的增殖能力和较高的细胞毒活性。结论 :MtbAK细胞在体外更易于扩增 ,具有较高的杀瘤活性 ,有可能应用于肿瘤患者的临床过继免疫治疗。

非典型腺苷酸激酶AK6/hCINAP的结构和功能

腺苷酸激酶广泛存在于各种生物中,在维持细胞中核苷酸的正常含量以及能量代谢活动中发挥重要作用。腺苷酸激酶6 (AK6,又称人coilin相互作用核ATP酶蛋白hCINAP)是一种非典型的腺苷酸激酶,既具有腺苷酸激酶的活性,又具有ATP酶的活性。本课题组对AK6/hCINAP的结构、酶学特征和生物学功能开展了长期的研究,证明其在调控基因转录、核糖体质量、早期胚胎发育、细胞衰老、细胞代谢、细胞增殖和凋亡、DNA损伤反应、炎症反应、肿瘤发展等诸多生物学过程中均发挥关键作用。本文对AK6/hCINAP的结构特征、生物学功能及上游调控因子进行了总结,阐明该酶生物学作用和分子机制具有重要的生物学意义,有助于开发AK6/hCINAP选择性抑制剂并应用于临床治疗。

基于AK-SS-CSM的海上风机支撑结构抗震可靠度分析

为探讨地震荷载和结构抗力的不确定性对海上风机支撑结构抗震性能的影响,采用OpenSEES软件建立了塔筒-桩基础-土体非线性数值简化模型,将基于Kriging模型和子集模拟法的主动学习可靠度方法(AK-SS)与能力谱法(CSM)结合,研究了不同地震影响工况下支撑结构在寿命期内的可靠度变化,并探究厚度、埋深、直径以及砂土内摩擦角对结构可靠度的影响。结果表明:AK-SS相比于子集模拟法(SS)等其他可靠度计算方法计算更准确、高效;振型组合分布加载模式(SRSS)适用于由多阶振型控制的海上风机支撑结构;罕遇地震工况为结构的危险控制工况,泥面位移超过临界值为主要失效模式,但对于任一失效模式结构在服役期结束之前均满足目标可靠度要求;与埋深等因素相比,基础厚度、基础直径为结构抗震性能的控制因素,设计时应合理选择桩基础的几何尺寸。

金宝AK200S血液透析机液路故障维修实例

血液透析对提高急慢性肾衰竭患者的生命质量具有重要意义,而血液透析机的运行状况直接关系患者的生命安全。我院在用的血液透析机主要为金宝AK200S型。该设备在医疗机构应用广泛,具有操作简单、数据直观、使用便捷等优势。日常维修工作中发现该设备的故障类型主要为液路故障,本研究根据由易到难的维修原则,对日常工作遇到的液路故障维修实例进行总结,供血液透析机维修工程师参考。

基于生物信息学分析的AK001058 在胃癌中的作用及机制探讨

目的探讨AK001058在胃癌发生发展中的上下游调控机制。方法利用生物信息学分析的方法,于多个数据库或网站(lncLocator、UCSC、lncatlas、ensembl、Genome Browser、NCBI、CHIP-Seq及AnnoLnc)进行数据搜索汇总。结果AK001058全长1631bp,是位于编码蛋白基因之间的LncRNA,定位于染色体5 p13.3(chr5:33,523,536-33,525,166),亚细胞定位主要在胞浆;与AK001058有有相互作用的基因有ADAMTS12和FOXC2-AS1,均与胃癌发生密切相关;与AK001058有相互作用的蛋白有CTCF和HNRNPA2B1,而HNRNPA2B1与胃癌关系密切;在上游调控中AK001058受5个转录因子的调控:EBF1、Egr-1、MafF、MafK和FOXA1,FOXA1亚细胞定位主要在细胞浆,与胃癌的关系更加密切;多种miRNA家族(miR-15abc/16/16abc/195/322/424/497/1907、miR-218/218a、miR-101/101ab、miR-144等)可与AK001058的不同位点相结合发生相互作用。结论AK001058受多种转录因子的调控,多个miRNA参与AK001058的基因表达或功能调节,AK001058也调控了部分与胃癌关系密切的基因及蛋白;AK001058可能广泛参与胃癌发生发展,具体作用机制有待进一步研究。

淫羊藿甙逆转转化生长因子β_2对LAK、CD_3AK细胞的免疫抑制作用

探讨淫羊藿甙逆转转化生长因子 β2 (TransformingGrowthFactorβ2 ,TGFβ2 )对LAK、CD3AK细胞的免疫抑制作用及其机制。方法 :采用MTT法 ,RT PCR和流式细胞术。结果 :淫羊藿甙能逆转受TGFβ2 抑制的LAK和CD3AK细胞的杀伤活性 ,并能部分恢复受TGFβ2 抑制的LAK细胞表面IL 2Rα表达和CD3AK细胞内穿孔素mRNA水平 ,以及CD3AK细胞的增殖活性。结论 :淫羊藿甙通过恢复LAK细胞IL 2Rα表达 ,提高CD3AK细胞内穿孔素mRNA水平及促进CD3AK增殖 ,逆转TGFβ2 对LAK、CD3AK的免疫抑制作用。

CD_3AK细胞与LAK细胞的比较

抗ＣＤ３单抗和ｒＩＬ－２共刺激法诱生扩增的ＣＤ３ＡＫ与用等量ｒＩＬ－２诱生扩增的ＬＡＫ间有明显差异：１）扩增倍数和细胞毒活性强度及其动态学不同：在诱生初期，ＣＤ３ＡＫ细胞数下降，细胞扩增倍数低于ＬＡＫ（０．８３对１．７，Ｐ＜０．０１）；对Ｋ５６２的细胞毒活性低于ＬＡＫ（３８％对４３．９％，Ｐ＞０．０５），诱生８天后ＣＤ３ＡＫ的扩增倍数和细胞毒活性都上升并超过ＬＡＫ（５．１３对１．４，Ｐ＜０．０１；４９．４％对２６％，Ｐ＜０．０５）。２）细胞表型不同：ＣＤ３ＡＫ中Ｔ细胞较多，ＬＡＫ细胞中ＮＫ表型细胞百分率高。

CD3AK细胞的生物学特性及其抗肿瘤作用

CD3AK细胞是用抗T细胞表而CD3分子的单克隆抗体激活的新型杀伤细胞，在肿瘤的免疫疗法中愈来愈受到重视。本文用抗CD3单克隆抗体(北医太免疫室提供)和rIL-2(日本盐野义制药株式会社产品)共同刺激人外周血单个核细胞(PBMC)，诱导CD3AK细胞，系统地研究了其生物特性及其体外抗肿瘤活性并与LAK细胞作比较。

肝癌患者自体CD3AK细胞与LAK细胞的杀伤活性比较

目的 比较肝癌患者自体 CD3AK细胞和 L AK细胞的杀伤活性 ,为临床应用提供依据。方法 以流式细胞仪检测细胞的杀伤活性。结果 原发性肝癌患者自体的 CD3AK细胞的 NK活性和 L AK活性均高于 L AK细胞。结论 CD3AK细胞效果稳定 ,抗瘤效应明显高于 L AK细胞 ,CD3AK细胞可望作为一种新的生物治疗手段用于肿瘤治疗。

正常鼠和免疫鼠CD＿3AK细胞和LAK细胞杀伤活性的比较研究

实验取正常鼠和Ｐ＿（８１５）肿瘤细胞致敏的免疫鼠脾细胞，经抗ＣＤ＿３抗体与低剂量ＩＬ－２或高剂量ＩＬ－２分别诱生为ＣＤ＿３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞，用改良的乳酸脱氢酶释放法以Ｐ＿（８１５）细胞和ＹＡＣ－１细胞为靶细胞，测定ＣＤ＿３ＡＫ和ＬＡＫ细胞的杀伤活性。结果表明：正常鼠ＣＤ＿３ＡＫ细胞对Ｐ＿（８１５）细胞的杀伤活性高于ＬＡＫ细胞，对ＹＡＣ－１细胞的杀伤活性低于ＬＡＫ细胞。免疫鼠ＬＡＫ细胞对Ｐ＿（８１５）细胞的杀伤活性明显增高，高于正常鼠ＬＡＫ细胞和免疫鼠ＣＤ＿３ＡＫ细胞。初步证明，ＣＤ＿３ＡＫ细胞具有很强的细胞毒作用，但不能取代ＬＡＫ细胞，免疫鼠ＬＡＫ细胞的应用仍然是重要的抗肿瘤手段。

人CD3AK细胞杀伤人肺腺癌细胞的形态学观察

抗CD3抗体激活的杀伤细胞(CD3AK细胞)是一种新型的免疫效应细胞，与LAK细胞相比具有广谱、较高的杀伤活性及低IL-2依赖性的特点，因而受到重视。关于其杀伤机制的研究目前尚无明确报道。本研究把体外培养中贴壁状态的人肺腺癌细胞与用抗CD3单克隆抗体激活的人外周血来源的CD3AK细胞共同培养，电镜下观察了两种细胞的相互作用和靶细胞被杀伤的过程．藉此对CD3AK细胞杀伤肿瘤细胞的机制作一探讨。

百特金宝AK96血液透析机的故障表现和维修处理措施探讨

在现代医学中,治疗慢性肾脏衰竭病症主要是采取血液透析的方法,血液透析机是一种集机械、计算机、电子等于一体的医疗设备,可以为疾病的治疗提供良好的透析环境,由于血液透析机的精度要求较高,在使用的过程中会存在一些故障问题,本文主要针对百特金宝AK96血液透析机的常见故障表现和维修处理措施进行分析,希望可以为故障维修工作提供一些参考,降低血液透析机出现故障的概率。

抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增人CD3AK的实验研究Ⅲ CD3AK与常规LAK细胞的比较

抗CD3单抗激活的杀伤细胞(Anti-CD3 monoclonal antibody activated killer cells．CD3AK)是用抗CD3单抗(Anti-monoclonal antibody，Anti-CD3 mAb)激活的一类杀伤细胞，具有较强的增殖能力和细胞毒活性。在CD3AK诱生扩增过程中除抗CD3单抗外也需要rIL-2作为生长因子，这就提出一个问题。

CD_3AK细胞体内外抗肿瘤活性及其临床应用

以TIL、LAK细胞联合rIL-2为代表的肿瘤过继免疫治疗在近年来的临床应用中取得了较为令人满意的临床疗效。特别是在肾癌、黑色素瘤、癌性浆膜转移等。但由于LAK、TIL前体细胞来源困难，且对IL-2呈现强依赖性，因此获得足量有效且1L-2依赖性低的抗肿瘤效应细胞是肿瘤生物治疗的主要研究内容之一。