AKR7A3在胃癌中的表达、细胞生物学影响及临床意义研究

背景AKR7A3是一种新发现的肿瘤相关分子,在癌症的发生、发展中起着非常重要的作用,但其在胃癌(gastric carcinoma,GC)中的作用研究较少。目的探讨AKR7A3对于胃癌的临床意义及预后预测价值,并通过体外细胞学实验分析验证其对胃癌细胞生物学功能的影响。方法利用TCGA、GEPIA、GDSC等数据库及R语言软件,采用生物信息学方法分析AKR7A3对胃癌患者临床预后及用药等方面的影响,并采用什么细胞系,通过体外细胞实验CCK-8检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,流式细胞实验检测细胞凋亡。验证AKR7A3对胃癌细胞的生物学功能的影响。结果差异性分析可见AKR7A3在胃癌组织中表达下调(P<0.05),并且预后分析提示低表达组胃癌患者总生存期及无病生存期均低于高表达组(P<0.05),对胃癌患者预后的预测具有指导意义,AKR7A3可能通过Nitrogen metabolism等信号通路影响胃癌的发生发展,并与Salubrinal、拉帕提尼等化疗药物敏感性相关,并且AKR7A3能够抑制细胞增殖(P<0.05)、促进细胞凋亡(P<0.05),同时还能抑制细胞迁移(P<0.01),使MDA含量增加(P<0.05)。结论AKR7A3可能与胃癌患者预后、化疗药物选择及疗效等有关,并且在胃癌细胞中作为抑癌基因,能够抑制肿瘤细胞的增殖、迁移,促进细胞凋亡。

AKR7A3在肺腺癌中异常表达及临床意义

目的:探讨醛-酮还原酶家族7成员A3(AKR7A3)在肺腺癌中的异常表达及与临床病理特征的关系,并探究其临床意义。方法:采用生物信息学数据库分析、免疫组化、Western Blot、Real-time PCR等方法对肺腺癌组织及不同细胞中AKR7A3的表达进行检测与分析。结果:Oncomine数据库分析结果显示,在肺腺癌中,AKR7A3的表达普遍高于正常肺组织,分别为正常肺组织的1.811倍(P=0.022)、1.356倍(P<0.01)、1.413倍(P=0.002)。Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果显示,AKR7A3高表达的患者较低表达的患者生存时间缩短,差异具有统计学意义(P=0.003 7)。免疫组化染色显示肺腺癌组织中AKR7A3的表达较癌旁增高,在与临床病理特征的相关性分析中,发现其与肿瘤分化程度(P<0.01)、淋巴结转移情况(P=0.029)以及TNM分期(P<0.01)相关,且会造成患者生存时间缩短(P=0.031)。Cox多因素分析表明AKR7A3可能是影响肺腺癌患者预后的独立危险因素(P=0.012)。Western Blot及Real-time PCR实验提示不同肺腺癌细胞中AKR7A3蛋白及mRNA表达普遍增高。结论:AKR7A3在肺腺癌中表达增高,对预后有不良影响,有促进肿瘤发生发展的作用。

醛酮还原酶AKR7A3原核表达条件的优化及酶学活性检测

AKR7A3属醛酮还原酶是NADPH依赖型的氧化还原酶超家族的一员,参与人体内很多极为重要的生理活动。本文构建原核表达载体,优化表达条件,获得可溶性好、活性高的AKR7A3属醛酮还原酶。研究了温度、转速、诱导时间和IPTG浓度等不同条件对AKR7A3酶表达量的影响,并进行了酶活性动力学检测分析。在16℃、110rpm/min、20h、1.00mM/L诱导剂浓度时AKR7A3可溶性蛋白达到99.0%。酶活性动力学检测结果说明在37℃;PH=7.0;NADPH浓度2mmol/L;底物浓度在2.00mmol/L;加酶量100μL时酶活性最好,最佳反应底物为睾丸酮。成功在大肠杆菌中表达出高活性的可溶性酶蛋白,并获得了体外酶活性的最佳动力学条件,为后续AKR7A3基础研究和应用研究提供实验基础。