Akt/FoxM1在VB-1诱导的人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用

目的研究Akt/FoxM1在新木脂素(VB-1)诱导的人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法采用不同浓度VB-1处理HeLa细胞后,通过MTT法测定细胞活力,琼脂培养集落形成法检测细胞集落形成能力,Histone/DNAELISA和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,Western Blot检测p-AKT和FoxM1的表达水平。结果 VB-1以浓度依赖的方式显著抑制HeLa细胞的活力和集落形成,提高细胞内Histone/DNA片段化水平,呈现出典型DNA梯形条带,同时下调p-AKT和FoxM1表达水平。结论 VB-1能以浓度依赖性方式有效诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡,其作用机制可能与下调p-AKT和FoxM1有关。

miR-370通过FoxM1相关通路调控人视网膜母细胞瘤细胞凋亡机制研究

目的探讨miR-370对人视网膜母细胞瘤细胞Y79增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法通过Lipofectamine TM 2000将miR-370-mimics、miR-370-NC及miR-370-inhibitor转染至Y79细胞内,分别建立miR-370过表达组(mimics组)、对照组(NC组)和抑制组(inhibitor组),三组转染24 h、48 h、72 h和96 h时,均使用CCK-8检测各组细胞增殖活性;转染48 h后,RT-PCR检测各组细胞内miR-370表达;Annexin V-FITC/PI联合流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,Western Blot检测各组细胞PI3K、P-AKT、FoxM1蛋白表达。结果mimics组细胞miR-370 mRNA表达远高于其他两组(均为P<0.05),inhibitor组细胞miR-370 mRNA表达显著低于其他两组(均为P<0.05)。自转染48 h起,inhibitor组细胞增殖活性显著高于其他两组(均为P<0.05),而mimics组细胞增殖活性显著低于其他两组(均为P<0.05),这种趋势一直持续至转染后96 h。mimics组细胞早期凋亡率显著高于其它两组(均为P<0.05),而inhibitor组细胞早期凋亡率在三组中最低(P<0.05)。mimics组细胞内PI3K、P-AKT、FoxM1蛋白表达均显著低于其他两组(均为P<0.05),而inhibitor组细胞内PI3K、P-AKT、FoxM1蛋白表达显著高于其他两组(均为P<0.05)。结论miR-370能够抑制人视网膜母细胞瘤细胞Y79的增殖,促进其凋亡,这种影响可能是通过降低PI3K/AKT/FoxM1信号通路的活性实现的。

环状RNA circ-FOXM1降低克唑替尼对肺癌细胞抑制效果的作用机制研究

目的探讨环状RNA circ-FOXM1降低克唑替尼对肺癌细胞抑制效果的作用机制。方法构建克唑替尼耐药肺癌细胞株H2228/CR。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测circ-FOXM1在BEAS-2B、H2228、H2228/CR细胞中的表达。将H2228细胞分为circ-FOXM1过表达组和过表达对照组。将H2228/CR细胞分为circ-FOXM1沉默组和沉默对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的半抑制浓度(IC_(50))。经克唑替尼干预处理后,采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,采用Transwell实验检测各组细胞迁移数,采用Western blot实验检测各组细胞磷酸化的磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)的表达水平。结果H2228/CR细胞circ-FOXM1表达水平高于H2228细胞,H2228细胞circ-FOXM1表达水平高于BEAS-2B细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。克唑替尼对过表达组细胞的IC_(50)显著高于过表达对照组细胞(P<0.05)。克唑替尼对沉默组细胞的IC_(50)显著低于沉默对照组细胞(P<0.05)。经克唑替尼干预处理后,过表达组的细胞凋亡率低于过表达对照组,细胞迁移数、p-PI3K/PI3K比值、p-AKT/AKT比值均高于过表达对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默组的细胞凋亡率高于沉默对照组,细胞迁移数、p-PI3K/PI3K比值、p-AKT/AKT比值均低于沉默对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论circ-FOXM1可能通过激活PI3K/AKT信号通路降低克唑替尼对肺癌细胞的抑制效果。

叉头框蛋白M1在脑胶质瘤中作用的研究进展

胶质瘤是成人中枢神经系统中最常见的原发性肿瘤。叉头框蛋白M1(FOXM1)是叉头框转录因子家族的成员之一,其可通过调控Wnt/β-catenin、Akt/FOXM1、p53通路及其自身的翻译后修饰过程促进神经胶质瘤的恶性增殖、迁移和侵袭等过程。本文总结叉头框蛋白M1在脑胶质瘤中的作用,以期为临床脑胶质瘤的治疗提供新的理论依据和治疗靶标。

葡萄籽原花青素对结肠癌细胞抑制作用的初步研究

葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins, GSPs)是自然界中普遍存在的一类多酚类物质,是天然的抗氧化剂,近来抗氧化剂与癌症的关系已引起了极大的关注。该文以结肠癌细胞株SW480和SW620为模型,探索其对结肠癌细胞生物学特征的影响以及作用的分子机制。该研究中分别采用MTT法以及流式细胞仪检测检测GSPs对细胞增殖能力、细胞周期以及细胞凋亡的影响。二代测序筛选GSPs调控的相关基因以及荧光实时定量PCR方法和Western blot验证靶分子的表达变化。结果显示:GSPs作用于SW480和SW620细胞后,两种细胞形态均发生明显改变、细胞增殖能力下降、细胞周期改变、凋亡率升高;机制研究发现, Akt信号通路以及以FoxM1为代表的抗氧化信号途径在此过程中起着重要的作用。该研究得出GSPs可明显影响结肠癌细胞生物学特征,在此过程中Akt信号通路以及FoxM1具有重要的作用。