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胡桃醌通过Akt/mTOR/p70S6K通路调控肺癌细胞A549自噬的研究 被引量:1
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作者 马婉婷 黄然 +1 位作者 李逸飞 黄亚威 《中医药学报》 2024年第1期33-38,共6页
目的:研究胡桃醌通过Akt/mTOR/p70S6K通路调控肺癌细胞A549自噬,发挥其抗肺癌作用的机制。方法:MTT法检测胡桃醌对A549细胞存活率的影响。透射电镜和细胞自噬染色检测试剂盒(MDC)观察胡桃醌诱导A549细胞自噬。蛋白免疫印迹法检测自噬标... 目的:研究胡桃醌通过Akt/mTOR/p70S6K通路调控肺癌细胞A549自噬,发挥其抗肺癌作用的机制。方法:MTT法检测胡桃醌对A549细胞存活率的影响。透射电镜和细胞自噬染色检测试剂盒(MDC)观察胡桃醌诱导A549细胞自噬。蛋白免疫印迹法检测自噬标志蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ和LC3I蛋白和自噬经典通路Akt/mTOR/p70S6K相关蛋白的表达水平。RT-PCR法检测A549细胞中Beclin-1和LC3ⅡmRNA表达水平。结果:MTT结果表明胡桃醌抑制A549细胞增殖,IC 50=10μmol/L;透射电镜和MDC实验发现胡桃醌可以诱导A549细胞产生自噬;与对照组相比,胡桃醌可以显著增加Beclin-1蛋白表达水平、LC3Ⅱ/LC3I比值和Beclin-1、LC3ⅡmRNA表达水平(P<0.05,P<0.01);胡桃醌干预后,与对照组相比,Akt、mTOR和p70S6K蛋白的表达水平基本不变,但Akt、mTOR和p70S6K磷酸化蛋白的表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:胡桃醌可能通过Akt/mTOR/p70S6K通路调控肺癌细胞A549自噬。 展开更多
关键词 胡桃醌 自噬 akt/mtor/p70s6k通路 肺癌
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利多卡因通过调控miR-520a/AKT/mTOR/p70S6K通路对SH-SY5Y细胞自噬的影响
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作者 张雯 马琳 +1 位作者 李瑞轩 徐桂萍 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2023年第1期7-13,共7页
目的探讨利多卡因通过调控自噬对神经毒性的影响及相关分子机制。方法培养人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y,MTT实验和乳酸脱氢酶(LDH)测定检测利多卡因对SH-SY5Y细胞活力和毒性的影响;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-520a的相对表达;West... 目的探讨利多卡因通过调控自噬对神经毒性的影响及相关分子机制。方法培养人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y,MTT实验和乳酸脱氢酶(LDH)测定检测利多卡因对SH-SY5Y细胞活力和毒性的影响;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-520a的相对表达;Western blot检测利多卡因对AKT/mTOR/p70S6K通路相关蛋白和自噬相关蛋白的影响;细胞免疫荧光染色评估LC3B的表达;生物信息学预测AKT1是miR-520a的潜在靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-520a和AKT1之间的相互作用。结果与对照组比较,SH-SY5Y细胞活力受到明显的抑制,且呈时间和剂量依赖性,LDH的释放量随利多卡因剂量增多而增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin-1蛋白表达显著升高,p62蛋白表达显著降低,LC3B的荧光强度显著增强,miR-520a的表达显著增加,p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K蛋白表达均显著降低(P<0.05)。与NC inhibitor组比较,miR-520ainhibitor组WT-AKT1的荧光素酶活性显著升高(P<0.05),而MUT-AKT1的荧光素酶活性没有变化(P>0.05)。与利多卡因组+NC inhibitor组比较,利多卡因+miR-520a inhibitor组SH-SY5Y细胞中miR-520a水平降低,LDH的释放量显著降低,p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K蛋白表达均显著升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin-1蛋白表达显著降低,p62蛋白表达显著升高,LC3B的荧光强度显著降低(P<0.05)。结论利多卡因通过上调miR-520a的表达和抑制AKT/mTOR/p70S6K信号通路促进神经细胞自噬。 展开更多
关键词 利多卡因 神经毒性 miR-520a akt/mtor/p70s6k信号通路 自噬
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p-Akt-mTOR-p70S6K信号通路蛋白与卵巢癌临床病理特征及化疗耐药的相关性 被引量:14
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作者 刘文涓 王前 +2 位作者 李凤杰 张淑军 曹兰琴 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期882-888,共7页
目的:研究磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路中的p-Akt,mTOR和p70S6K 3种蛋白与卵巢癌临床病理特征及化学药物治疗(简称化疗)耐药的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测18例卵巢癌化... 目的:研究磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路中的p-Akt,mTOR和p70S6K 3种蛋白与卵巢癌临床病理特征及化学药物治疗(简称化疗)耐药的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测18例卵巢癌化疗耐药和25例化疗敏感组织中p-Akt,mTOR和p70S6K蛋白的表达,分析这些蛋白与卵巢癌临床病理特征及化疗耐药的相关性。结果:p-Akt蛋白在卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别为77.14%,50.00%和66.67%,三者比较差异无统计学意义(P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为73.33%和75.00%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);在I~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期中的表达分别为18.18%和93.75%,差异有统计学意义(P<0.05)。mTOR蛋白在卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别为77.14%,100.00%和83.33%,三者比较差异无统计学意义(P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为80.00%和78.57%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);在I~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期中的表达分别为27.27%和96.88%,差异有统计学意义(P<0.05)。p70S6K蛋白在卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别为80.00%,100.00%和100.00%,三者比较差异无统计学意义(P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为93.33%和78.57%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);在I~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期中的表达分别为45.45%和96.88%,差异有统计学意义(P<0.05)。p-Akt蛋白在卵巢癌化疗耐药和敏感组织中的表达率分别为88.89%及64.00%;mTOR蛋白在耐药和敏感组织中的表达率分别为94.44%及68.00%;p70S6K蛋白在耐药和敏感组织中的表达率分别为100.00%及72.00%,3种蛋白在耐药组中的表达均高于敏感组(P<0.05)。结论:p-AktmTOR-p70S6K信号通路中的3种蛋白可能参与卵巢癌的侵袭和转移,这3种蛋白的表达上调可能与卵巢癌化疗耐药有关,在临床上可作为预测卵巢癌化疗耐药的标志。 展开更多
关键词 卵巢癌 紫杉醇 耐药 akt蛋白 mtor蛋白 p70s6k蛋白
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鲍曼不动杆菌外膜蛋白A通过Akt/mTOR/p70S6K信号通路引起RAW264.7细胞自噬 被引量:5
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作者 安志远 丁文一 +1 位作者 郑春明 黄骁舾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2267-2270,2276,共5页
目的:分析鲍曼不动杆菌标准株ATCC 19606(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)外膜蛋白A(outer membrane protein A,Omp A)对RAW264. 7细胞的自噬诱导作用。方法:建立Omp A刺激RAW264. 7细胞的模型,通过细胞免疫荧光染色、Western blo... 目的:分析鲍曼不动杆菌标准株ATCC 19606(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)外膜蛋白A(outer membrane protein A,Omp A)对RAW264. 7细胞的自噬诱导作用。方法:建立Omp A刺激RAW264. 7细胞的模型,通过细胞免疫荧光染色、Western blot和透射电子显微镜检测Omp A对RAW264. 7细胞自噬的影响。结果:Omp A可以引起自噬蛋白LC3B-II表达升高,并抑制Akt/mTOR/p70S6K的磷酸化水平;雷帕霉素可以进一步降低mTOR和p70S6K磷酸化,并提高Omp A引起的LC3B-II表达升高。结论:鲍曼不动杆菌Omp A通过Akt/mTOR/p70S6K信号通路引起RAW264. 7细胞自噬。这为将来进一步研究鲍曼不动杆菌引起自噬的分子机制及找到对抗其感染的新方法提供理论依据。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 外膜蛋白A RAW264.7细胞 自噬 akt/mtor/p70s6k信号通路
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电针通过AKT/mTOR/P70S6K通路促进大鼠局灶脑缺血/再灌注大脑缺血皮质区血管再生的研究 被引量:4
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作者 李琼莉 蒋锦 +3 位作者 马宏梅 詹剑 张莹 罗勇 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期397-404,共8页
目的:观察电针对大鼠局灶脑缺血/再灌注大脑缺血皮质区p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达及CD34^+微血管密度变化的影响,探讨电针促进大脑缺血皮质区血管再生的机制。方法:140只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、模型+电针组(电针组... 目的:观察电针对大鼠局灶脑缺血/再灌注大脑缺血皮质区p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达及CD34^+微血管密度变化的影响,探讨电针促进大脑缺血皮质区血管再生的机制。方法:140只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、模型+电针组(电针组)、模型+电针+哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)组(抑制剂组);采用线栓法制备SD大鼠右侧局灶脑缺血/再灌注模型,缺血2h后将假手术组、模型组、电针组和抑制剂组各分为再灌注12h、24h、48h、72h、7d五个亚组;取大鼠"百会"穴(GV 20)及左侧"四关"穴(合谷LI 4/太冲LR 3)为电针刺激穴位,刺激时间30min/次,每日1次,最长持续7d;采用Western Blot检测各组大脑缺血皮质区磷酸化的蛋白激酶B(p-protein kinase B,p-AKT)、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)、磷酸化的核糖体蛋白S6乳激酶(p-ribosomal protein S6 kinase,p-P70S6K)蛋白的表达水平;免疫组化法检测大脑缺血皮质区VEGFR2蛋白、CD34^+微血管血管的表达;Longa法检测神经功能。结果:与假手术组相比,模型组p-AKT蛋白的表达在24h、48h和72h增加(P<0.05),模型组p-mTOR和p-P70S6K的蛋白表达在48h、72h和7d增加(P<0.05),与模型组相比较,电针组各个时间点p-AKT、p-mTOR和p-P70S6K蛋白的表达均显著增加(P<0.01),在RAPA的作用下,抑制剂组中各个时间点p-AKT、p-mTOR和p-P70S6K蛋白的表达明显低于电针组(P<0.05);与模型组相比,电针组再灌注72h和7d大脑缺血皮质区VEGFR2蛋白、CD34^+微血管的表达明显增多(P<0.01),与电针组相比,抑制剂组再灌注72h和7d大脑缺血皮质区VEGFR2蛋白、CD34^+血管减少(P<0.05);与模型组和抑制剂组相比,电针组再灌注72h、7d神经功能评分明显改善(P<0.05)。结论:电针可提高大鼠局灶脑缺血/再灌注大脑缺血皮质区p-AKT、p-mTOR和p-P70S6K的表达,可能通过AKT/mTOR/P70S6K通路促进大鼠大脑缺血皮质区血管的再生和神经功能的恢复。 展开更多
关键词 电针 局灶脑缺血/再灌注 akt/mtor/p70s6k 血管再生 雷帕霉素
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PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路在人舌鳞癌细胞耐药中的作用 被引量:3
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作者 章思莹 潘淑婷 +1 位作者 帅芳源 邱嘉旋 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第9期938-942,共5页
目的:通过抑制舌鳞癌细胞中PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路的表达,检测细胞凋亡与自噬的变化,探讨舌鳞癌耐药的机制。方法:以舌鳞癌细胞Cal27与舌鳞癌耐顺铂细胞Cal27/CDDP为研究对象。分别用PI3K/AKT抑制剂LY294002、mTOR抑制剂Rapamyci... 目的:通过抑制舌鳞癌细胞中PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路的表达,检测细胞凋亡与自噬的变化,探讨舌鳞癌耐药的机制。方法:以舌鳞癌细胞Cal27与舌鳞癌耐顺铂细胞Cal27/CDDP为研究对象。分别用PI3K/AKT抑制剂LY294002、mTOR抑制剂Rapamycin、p70S6K抑制剂LY2584702作用该通路各个环节。Western blot检测通路抑制剂作用后相关蛋白的变化。Cyto-ID荧光染色检测自噬体的形成。流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:Western blot结果显示加入抑制剂后舌鳞癌细胞Beclin1表达分别高于对照组,LC3II与LC3I以及Bax与Bcl-2的比值均升高,该通路的p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K等蛋白均有下降(P<0.05)。流式结果显示加入抑制剂后的舌鳞癌细胞凋亡率分别较对照组升高(P<0.05)。Cyto-ID荧光染色后结果显示加入抑制剂后的舌鳞癌细胞自噬小体的数目明显高于对照组(P<0.05)。对比两组细胞显示加入抑制剂后的Cal27细胞发生凋亡与自噬的水平高于Cal27/CDDP(P<0.05)。结论:抑制PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路可诱导舌鳞癌细胞Cal27与舌鳞癌耐顺铂细胞Cal27/CDDP发生凋亡与自噬,激活的PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路抑制细胞凋亡与自噬是Cal27/CDDP细胞产生顺铂耐药的原因之一。 展开更多
关键词 舌鳞癌 pI3k/akt/mtor/p70s6k 顺铂耐药 自噬 凋亡
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木瓜总三萜通过调节miR-10a和PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路诱导胃癌细胞凋亡 被引量:15
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作者 冯旻璐 许海燕 +4 位作者 贺海波 张媛媛 江伟杰 覃慧林 张继红 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第12期2929-2935,共7页
目的:通过观察木瓜总三萜对人胃癌HGC-27细胞株生长的抑制作用,探寻其可能的作用机制。方法:将HGC-27细胞分别单用木瓜总三萜或同转染miR-10a mimic、PI3K抑制剂LY294002、mTOR抑制剂CCI-779及分别与木瓜总三萜联用处理后,采用MTT和JC-... 目的:通过观察木瓜总三萜对人胃癌HGC-27细胞株生长的抑制作用,探寻其可能的作用机制。方法:将HGC-27细胞分别单用木瓜总三萜或同转染miR-10a mimic、PI3K抑制剂LY294002、mTOR抑制剂CCI-779及分别与木瓜总三萜联用处理后,采用MTT和JC-1法检测细胞活性和线粒体活性,实时定量PCR法检测miR-10a mRNA表达,Western blot法检测HGC-27细胞中PI3K、Akt、mTOR、p70S6K蛋白表达及其磷酸化。结果:木瓜总三萜可显著降低HGC-27细胞活性和线粒体活性,促进细胞凋亡;上调miR-10a mRNA表达,下调p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K蛋白表达及降低p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K比值(P<0.05)。结论:木瓜总三萜具有抑制人胃癌HGC-27细胞线粒体活性和细胞增殖的作用,其机制可能与促进miR-10a表达,抑制PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路激活有关。 展开更多
关键词 木瓜总三萜 胃癌 HGC-27细胞 pI3k/akt/mtor/p70s6k信号通路
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复方肠泰方通过抑制Akt/mTOR/p70S6K通路诱导CT26细胞自噬的研究 被引量:1
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作者 刘芮奇 李灵常 +1 位作者 崔莉 孙娥 《中医药信息》 2022年第10期1-6,共6页
目的:研究复方肠泰方对结肠癌CT26细胞增殖和自噬的影响及其可能的作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度复方肠泰方对CT26细胞增殖的影响,MDC染色法和透射电镜观察复方肠泰方干预CT26细胞后是否形成自噬体。蛋白质印迹法检测自噬相关蛋... 目的:研究复方肠泰方对结肠癌CT26细胞增殖和自噬的影响及其可能的作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度复方肠泰方对CT26细胞增殖的影响,MDC染色法和透射电镜观察复方肠泰方干预CT26细胞后是否形成自噬体。蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白LC3和Beclin-1的蛋白表达。采用自噬诱导剂雷帕霉素研究复方肠泰方是否诱导CT26细胞自噬性死亡。采用蛋白质印迹法检测Akt/mTOR/p70S6K通路相关蛋白表达水平。结果:复方肠泰方可以抑制CT26细胞的增殖;透射电镜观察到复方肠泰方干预的细胞中有类似自噬溶酶体结构;MDC结果显示,与空白对照组相比,复方肠泰方组细胞荧光强度增强;复方肠泰方能增加LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin-1的表达水平(P<0.05);与复方肠泰方组相比,复方肠泰方和雷帕霉素共同处理使CT26细胞的病死率显著增加(P<0.05);此外,复方肠泰方干预后,CT26细胞Akt、mTOR和p70S6K的蛋白表达基本不变,p-Akt、p-mTOR和p-p70S6K的蛋白表达较空白对照组显著降低(P<0.05)。结论:复方肠泰方可能通过抑制Akt/mTOR/p70S6K通路诱导结肠癌CT26细胞自噬,从而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 复方肠泰方 细胞自噬 akt/mtor/p70s6k通路 结肠癌 CT26细胞
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PI3K、Akt、mTOR、p70S6K基因在宫颈癌变过程中的表达及相关性研究 被引量:14
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作者 卢丹 钱静 +2 位作者 孙飞 潘枢 冯倩倩 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第2期46-51,共6页
目的探讨PI3K、Akt、mTOR、p70S6K在宫颈癌变过程中的表达。结合宫颈病变的临床病理学特征,对4个基因蛋白阳性表达的相关性进行临床研究。方法选取20例宫颈糜烂伴鳞状上皮化生、60例宫颈上皮内瘤变(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各20例)以及48例... 目的探讨PI3K、Akt、mTOR、p70S6K在宫颈癌变过程中的表达。结合宫颈病变的临床病理学特征,对4个基因蛋白阳性表达的相关性进行临床研究。方法选取20例宫颈糜烂伴鳞状上皮化生、60例宫颈上皮内瘤变(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各20例)以及48例宫颈鳞状细胞癌患者,应用免疫组织化学SP法检测各组宫颈组织中PI3K、Akt、mTOR、p70S6K的表达,选取10例正常宫颈组织作为对照组。结果 1在宫颈癌变动态过程中,从宫颈糜烂伴鳞化、宫颈上皮内瘤变到宫颈鳞状细胞癌,PI3K、Akt、m TOR、p70S6K癌基因阳性表达率逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.05)。2PI3K、Akt、mTOR与p70S6K在宫颈癌中的阳性表达与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),淋巴结转移组阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.01),与年龄、病灶大小无关(P>0.05)。3PI3K、Akt、mTOR和p70S6K与宫颈上皮内瘤变和在宫颈癌中的阳性表达呈正相关。结论 PI3K、Akt、mTOR、p70S6K在宫颈癌变过程中存在着联合表达,并协同参与了宫颈癌的发生和进展,可以作为早期诊断、预后判断的新的生物学标志物,并为基因的协同治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 pI3k/akt/mtor/p70s6k、宫颈上皮内瘤 宫颈鳞状上皮细胞癌 肿瘤标志物
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强精煎介导PI3K/Akt/mTOR通路调控少精子症大鼠精子发生的实验研究 被引量:3
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作者 陆海旺 宾彬 +3 位作者 林思伟 王德胜 王杰 蓝艳梅 《中医药信息》 2022年第7期33-40,共8页
目的:探索强精煎通过介导PI3K/Akt/mTOR通路及其下游靶因子4EBP1、p70S6K,调控环磷酰胺(CTX)诱导的少精子症模型大鼠精子发生的作用机制。方法:将75只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、mTOR通路抑制剂组(雷帕霉素组)、强精煎+雷... 目的:探索强精煎通过介导PI3K/Akt/mTOR通路及其下游靶因子4EBP1、p70S6K,调控环磷酰胺(CTX)诱导的少精子症模型大鼠精子发生的作用机制。方法:将75只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、mTOR通路抑制剂组(雷帕霉素组)、强精煎+雷帕霉素组和强精煎组,每组15只。采用腹腔注射CTX法诱导少精子症大鼠模型。连续药物干预38 d后,剪开各组大鼠腹腔摘取睾丸,采用免疫组化法检测PI3K/Akt/mTOR通路蛋白及其下游通路蛋白(4EBP1、p70S6 K)、细胞增殖标记蛋白Ki-67表达;采用RT-PCT法检测睾丸组织PI3K/Akt/mTOR基因及其下游靶基因(4EBP1、p70S6K)表达。结果:与空白对照组比较,模型组、雷帕霉素组睾丸组织PI3K、Akt、mTOR、4EBP1、p70S6 K、Ki-67蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),雷帕霉素组降低尤为明显。与模型组、雷帕霉素组相比,强精煎组睾丸组织PI3K、Akt、mTOR、4EBP1、p70S6K、Ki-67蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组、雷帕霉素组睾丸组织PI3K、Akt、mTOR、4EBP1、p70S6K基因表达水平均显著降低(P<0.05)。强精煎组睾丸组织PI3K、Akt、mTOR、4EBP1、p70S6K基因表达水平明显上调(P<0.05)。结论:强精煎可能通过激活PI3K/Akt//mTOR/4EBP1/p70S6K蛋白/基因表达、激活Ki-67蛋白表达等多途径调控少精子症大鼠生精细胞的增殖,促进精子发生,提高精子数量。 展开更多
关键词 强精煎 少精子症 pI3k akt mtor 4EBp1 p70s6k ki-67
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栀子苷对PDGF诱导的HSC-T6增殖活化的影响 被引量:2
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作者 孔令娜 占书箱 +3 位作者 黄成 马陶陶 林翔 李俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期481-485,共5页
目的探讨栀子苷抑制血小板衍生生长因子(PDGF)介导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的作用及其可能机制。方法培养HSC-T6,体外给予不同浓度(20、50、100、200、400μg/ml)的栀子苷,通过MTT法检测细胞的活力;选取20、50、100μg/ml的栀... 目的探讨栀子苷抑制血小板衍生生长因子(PDGF)介导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的作用及其可能机制。方法培养HSC-T6,体外给予不同浓度(20、50、100、200、400μg/ml)的栀子苷,通过MTT法检测细胞的活力;选取20、50、100μg/ml的栀子苷,PDGF刺激后,采用MTT、实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测细胞增殖和细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;进一步采用Western blot法检测栀子苷对MAPK通路蛋白P-ERK、P-p38和Akt/mT OR/p70S6K通路蛋白的表达。结果栀子苷可以抑制PDGF诱导的HSC-T6的增殖和减少活化标志物α-SMA的表达,并且明显抑制Akt、mT OR和p70S6K的磷酸化水平,但是对ERK、p38活化水平无显著影响。结论栀子苷可以抑制PDGF诱导的HSC-T6的增殖与活化,可能起到抗纤维化的作用,这一作用的产生可能与Akt/mT OR/p70S6K通路有关。 展开更多
关键词 栀子苷 HsC—T6 肝纤维化 akt/mtor/p70s6k
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三邻甲苯磷酸酯染毒的母鸡脊髓中AKT/mTOR/p70S6K信号通路的变化
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作者 寇蕊蕊 邹朝双 +2 位作者 高媛 谢克勤 宋福永 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期157-160,共4页
目的研究三邻甲苯磷酸酯(TOCP)所致迟发性神经病(OPIDN)中AKT/mTOR/p70S6K信号通路的变化,探讨OPIDN发生的分子机制。方法 30只成年罗曼母鸡随机分为5组,每组6只,给予750 mg/kg TOCP一次性灌胃,然后分别在TOCP染毒后0、1、5、10和21 d... 目的研究三邻甲苯磷酸酯(TOCP)所致迟发性神经病(OPIDN)中AKT/mTOR/p70S6K信号通路的变化,探讨OPIDN发生的分子机制。方法 30只成年罗曼母鸡随机分为5组,每组6只,给予750 mg/kg TOCP一次性灌胃,然后分别在TOCP染毒后0、1、5、10和21 d时间点处死一组动物取脊髓组织,免疫印迹法检测脊髓中AKT、p-AKT、p70S6K、p-p70S6K和mTOR的相对含量。结果 TOCP染毒引起母鸡脊髓中磷酸化AKT、p70S6K和mTOR的含量显著下降(P<0.05),而AKT、p70S6K的含量没有明显变化(P>0.05)。结论 TOCP干扰了AKT/mTOR/p70S6K信号通路的调节机制,这可能与OPIDN的发病机制有关。 展开更多
关键词 三邻甲苯磷酸酯 有机磷化合物诱发的迟发性神经病 akt mtor p70s6k信号通路
原文传递
加味柴胡疏肝汤调控miR-204对急性癫痫小鼠海马AKT/mTOR/P70S6K通路和脑电图的影响 被引量:10
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作者 汪顺贵 玉倩 +7 位作者 李华霞 李欢 卢玲 廖现秋 陈炜 宋曦 秦红玲 刁丽梅 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期273-276,共4页
目的探讨加味柴胡疏肝汤是否通过调节miR-204影响急性癫痫小鼠AKT/mTOR/P70S6K信号通路以及脑电图。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组、模型组、加味柴胡疏肝汤组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 mimic组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 in... 目的探讨加味柴胡疏肝汤是否通过调节miR-204影响急性癫痫小鼠AKT/mTOR/P70S6K信号通路以及脑电图。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组、模型组、加味柴胡疏肝汤组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 mimic组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 inhibitor组、卡马西平组。采用匹罗卡品使小鼠致痫,分别予加味柴胡疏肝汤灌胃、抑制及过表达miR-204后观察每组的指标情况;采用脑电图仪检测每组小鼠脑电波;RT-PCR检测每组小鼠海马组织miR-204的表达;Western Blot检测每组小鼠通路蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达情况。结果与生理盐水组相比,模型组小鼠脑电图痫性波明显增多,miR-204表达明显降低,通路相关蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达明显下降;与模型组相比,使用加味柴胡疏肝汤后,小鼠脑电图痫性波减少,小鼠海马组织miR-204表达明显升高,通路相关蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达升高;使miR-204过表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度增大;抑制miR-204表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度减少。结论加味柴胡疏肝汤通过升高miR-204的表达,激活AKT/mTOR/P70S6K通路,使其通路蛋白磷酸化,发挥神经保护的作用,减少痫性波,达到治疗癫痫的目的。 展开更多
关键词 加味柴胡疏肝汤 癫痫 miR-204 akt/mtor/p70s6k 脑电图
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虎杖苷对K562细胞增殖及凋亡的影响 被引量:3
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作者 罗源 王春美 +1 位作者 朱相展 盛光耀 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第3期389-393,共5页
目的:观察虎杖苷对白血病细胞株K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:以不同浓度(0、5、10、20、40、80、160、320μmol/L)虎杖苷处理K562细胞12、24、48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。另取对数生长期的K562细胞,分... 目的:观察虎杖苷对白血病细胞株K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:以不同浓度(0、5、10、20、40、80、160、320μmol/L)虎杖苷处理K562细胞12、24、48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。另取对数生长期的K562细胞,分为3组,观察组加入80μmol/L的虎杖苷,阴性对照组加入DMSO,空白对照组不处理,培养24 h后,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测pAkt、p-m TOR、p70S6K、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果:虎杖苷能有效抑制K562细胞增殖,呈时间和剂量依赖性(P<0.001)。80μmol/L虎杖苷作用24 h后,K562细胞凋亡率增加(P<0.001);细胞周期出现G0/G1期至S期的阻滞(P<0.001);p-Akt、p-m TOR、p70S6K、Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:虎杖苷可有效抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,可能是通过抑制Akt/m TOR/p70S6K信号通路及调控相关凋亡蛋白的表达来实现的。 展开更多
关键词 虎杖苷 k562细胞 akt/mtor/p70s6k 凋亡
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mTOR信号通路蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 李学元 贾爱华 +5 位作者 任玉波 李鑫 马翔宇 张连群 张学广 李新钢 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期75-79,共5页
目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法:选取山东大学齐鲁医院和聊城市人民医院神经外科2007年7月至2010年5月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤... 目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法:选取山东大学齐鲁医院和聊城市人民医院神经外科2007年7月至2010年5月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤石蜡标本87例(Ⅰ~Ⅱ级27例、Ⅲ级24例、Ⅳ级36例),应用免疫组织化学法检测胶质瘤组织中mTOR信号通路关键蛋白pAKT、pmTOR和p-p70S6K的表达,分析它们与胶质瘤患者临床病理特征的关系。结果:pAKT、pmTOR和p-p70S6K在各级胶质瘤中的阳性率分别为:Ⅰ~Ⅱ级70.4%(19/27)、Ⅲ级70.8%(17/24)、Ⅳ级75.0%(27/36),Ⅰ~Ⅱ级77.8%(21/27)、Ⅲ级75.0%(18/24)、Ⅳ级72.2%(26/36),Ⅰ~Ⅱ级63.0%(17/27)、Ⅲ级70.8%(17/24)、Ⅳ级80.6%(29/36);各阳性表达率间无明显差异(P>0.05),但它们的表达水平均随着胶质瘤病理级别的增高而升高(P=0.0001,0.0063,0.0001),而与患者的性别、年龄、肿瘤大小和术前KPS评分等参数无关。pAKT、pmTOR和p-p70S6K三者共表达于42例胶质瘤组织中,在其余45例中仅有一种或两种表达。结论:mTOR信号通路蛋白在胶质瘤的发生、发展中起着重要的作用,可能是胶质瘤治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 胶质瘤 mtor akt p70s6k 信号转导通路
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mTOR信号转导通路与三氧化二砷反应关联的研究 被引量:1
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作者 姜飞 刘卓刚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期54-56,共3页
本研究探讨三氧化二砷(ATO)作用与mTOR信号通路的联系。应用Western blot方法检测K562/DNR细胞经ATO处理不同时间后细胞中pmTOR、pAKT及pP70S6K的表达;应用流式细胞术检测K562/DNR细胞经ATO联合LY294002或雷帕霉素处理120小时后细胞的... 本研究探讨三氧化二砷(ATO)作用与mTOR信号通路的联系。应用Western blot方法检测K562/DNR细胞经ATO处理不同时间后细胞中pmTOR、pAKT及pP70S6K的表达;应用流式细胞术检测K562/DNR细胞经ATO联合LY294002或雷帕霉素处理120小时后细胞的凋亡率。结果表明:K562/DNR细胞经ATO处理60分钟及120分钟时pmTOR表达高于对照组(p<0.01);经ATO处理30分钟及60分钟时pAKT表达高于对照组(p<0.01);经ATO处理60分钟时pP70S6K表达高于对照组(p<0.01)。K562/DNR细胞经ATO联合LY294002或雷帕霉素处理后细胞凋亡率高于对照组(p<0.01)。结论:K562/DNR细胞经一定浓度的ATO处理后细胞中mTOR信号通路被激活;mTOR信号通路抑制剂可增强ATO触发K562/DNR细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 信号转导通路 mtor akt p70s6k 三氧化二砷
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丹酚酸对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护 被引量:1
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作者 沈芸 张占丰 +1 位作者 王红灵 赵冀安 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2020年第10期1111-1118,共8页
目的:分析丹酚酸通过AKT/mTOR/p70S6K信号通路对骨骼肌缺血再灌注损伤小鼠细胞自噬及凋亡的影响。方法:选取SPF级雄性大鼠45只,随机数字表法分为假手术组、模型组、丹酚酸组,模型组、丹酚酸组制备骨骼肌缺血再灌注损伤模型,丹酚酸组分... 目的:分析丹酚酸通过AKT/mTOR/p70S6K信号通路对骨骼肌缺血再灌注损伤小鼠细胞自噬及凋亡的影响。方法:选取SPF级雄性大鼠45只,随机数字表法分为假手术组、模型组、丹酚酸组,模型组、丹酚酸组制备骨骼肌缺血再灌注损伤模型,丹酚酸组分别在开始实验前72 h、48h、24 h及再灌注前15 min,腹腔注射剂量为30mg/kg的丹酚酸溶液1 mL,假手术组和模型组大鼠腹腔注射生理盐水1 mL。观察各组大鼠腓肠肌组织病理形态,血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,腓肠肌组织Akt、p-Akt、p70S6K、p-p70S6K、mTOR及p-mTOR蛋白表达及腓肠肌组织内Bcl-2、Bax表达。结果:再灌注0 h、4 h及24 h时模型组大鼠腓肠肌湿/干重(W/D)比值较假手术组升高,丹酚酸组腓肠肌W/D比值较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.05);再灌注0 h、4 h及24 h时模型组大鼠血清LDH、CK含量较假手术组升高,丹酚酸组大鼠血清LDH、CK含量较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠腓肠肌Akt蛋白表达较假手术组降低,p-Akt蛋白表达较假手术组升高;丹酚酸组大鼠Akt、p-Akt、p70S6K、p-p70S6K、mTOR及pmTOR蛋白表达较模型组升高,差异有统计学意义(P<0.05);光密度值(IOD)量化腓肠肌细胞内Bax、Bcl-2蛋白表达,模型组Bcl-2 IOD数值、Bcl-2/Bax比值较假手术组降低,Bax IOD数值较假手术组增加;丹酚酸组Bcl-2 IOD数值、Bcl-2/Bax比值较模型组升高,Bax IOD数值较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:丹酚酸可维持骨骼肌缺血再灌注损伤大鼠骨骼细胞Bax与Bcl-2动态平衡,抑制细胞凋亡,其作用机制可能和激活AKT/mTOR/p70S6K信号通路有关。 展开更多
关键词 骨骼肌缺血再灌注损伤 akt/mtor/p70s6k信号通路 丹酚酸 细胞凋亡
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干扰小RNA沉默CAV1表达对人绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭、迁移能力的影响及其作用机制研究 被引量:2
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作者 陈静鸽 周斌 +5 位作者 王川红 程玉敏 周新华 李新敏 王陈英 乔文菲 《癌症进展》 2018年第5期571-574,583,共5页
目的探究干扰小RNA(si RNA)沉默小窝蛋白-1(CAV1)基因表达对人绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能的作用机制。方法将人绒毛膜癌JEG-3细胞分为对照组(不进行转染)、阴性组(转染si RNA-NC)和si RNA-CAV1组(转染si RNA-CAV1)... 目的探究干扰小RNA(si RNA)沉默小窝蛋白-1(CAV1)基因表达对人绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能的作用机制。方法将人绒毛膜癌JEG-3细胞分为对照组(不进行转染)、阴性组(转染si RNA-NC)和si RNA-CAV1组(转染si RNA-CAV1)。Transwell法检测下调CAV1表达对细胞侵袭、迁移能力的影响;实时定量PCR(q RT-PCR)检测转染细胞中CAV1 m RNA的表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中CAV1、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(MTOR)、核糖体p70S6激酶(p70S6K)、磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化MTOR(p-MTOR)、磷酸化p70S6K(p-p70S6K)蛋白的表达水平。结果 si RNA-CAV1组JEG-3细胞中CAV1 m RNA和蛋白的相对表达量均低于对照组(P﹤0.05);si RNA-CAV1组JEG-3细胞的侵袭数目、迁移数目均低于对照组(P﹤0.05);si RNA-CAV1组JEG-3细胞中AKT、MTOR、p70S6K以及磷酸化水平均低于对照组(P﹤0.05)。结论沉默CAV1表达可以抑制人绒毛膜癌JEG-3细胞的侵袭和迁移能力,该作用与AKT/MTOR/p70S6K信号通路有关。 展开更多
关键词 小窝蛋白-1 绒毛膜癌 侵袭 迁移 akt/mtor/p70s6k信号通路
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扶脾柔肝颗粒对肝纤维化模型大鼠的改善作用机制研究 被引量:5
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作者 安祯祥 何远利 +3 位作者 唐东昕 黄丹 王敏 王芳 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第21期2587-2592,共6页
目的:研究扶脾柔肝颗粒(FRG)对肝纤维化模型大鼠的改善作用机制。方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱片组(化学药阳性对照,0.2mg/kg)、扶正化瘀胶囊组(中药阳性对照,0.415g/kg)和FRG低、中、高剂量组(20、40、80g/kg),除空白... 目的:研究扶脾柔肝颗粒(FRG)对肝纤维化模型大鼠的改善作用机制。方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱片组(化学药阳性对照,0.2mg/kg)、扶正化瘀胶囊组(中药阳性对照,0.415g/kg)和FRG低、中、高剂量组(20、40、80g/kg),除空白组和模型组各11只大鼠外(各取1只用于判断是否造模成功),其余每组10只。除空白组外,其余各组大鼠腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液并灌胃30%乙醇以复制肝纤维化模型。造模成功后,各给药组大鼠灌胃相应药物,空白组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续4周。末次灌胃后,观察大鼠肝组织病理形态学变化;检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)水平;检测大鼠肝组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平;检测大鼠肝组织中蛋白激酶B(Akt)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)的mRNA和蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠肝小叶结构紊乱,纤维组织增生明显,部分有假小叶形成;血清中HA、LN、PCⅢ、ColⅣ水平和肝组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平以及Akt、AMPK、mTOR、p70S6K的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,FRG各剂量组大鼠肝组织损伤明显减轻,血清和肝组织中上述指标(FRG低剂量组LN、PCⅢ除外)水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:FRG可改善大鼠肝纤维化,其作用机制可能与下调肝组织中自噬相关蛋白和Akt/AMPK/mTOR/p70S6K信号通路相关蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 扶脾柔肝颗粒 肝纤维化 自噬 akt/AMpk/mtor/p70s6k信号通路 大鼠
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