5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗肛管内尖锐湿疣的疗效观察

目的探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗肛管内尖锐湿疣的临床疗效及护理方法。方法回顾性分析用ALA-PDT治疗的36例肛管内尖锐湿疣患者的临床资料,采用盐酸氨酮戊酸配制温敏凝胶,均匀涂于皮损处,光动力治疗仪照射,能量密度100/cm2。每周一次,并进行治疗前宣教及心理疏导、治疗中有皱折处需涂满药液、治疗后外涂抗生素等护理方法。结果 36例患者,男20例,女16例,经3次治疗治愈22例,6次治疗治愈10例,4例因疣体较大经3次治疗疣体明显缩小,但由于患者经济原因不再坚持治疗。治愈率88.90%,有效率100%;疗程结束后经6个月随访,复发4例,复发率12.5%。不良反应有局部疼痛、糜烂,视情况予加强局部护理、止痛,大多数症状自行消失。结论艾拉-光动力疗法治疗肛管内尖锐湿疣是一种疗效好、复发率低、微创、实用的治疗新方法,治疗过程中需加强护理和临床指导。

ALA光动力治疗在皮肤科临床应用的研究进展

5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,ALA)介导的光动力治疗(Photodynamic therapy,PDT)是一种利用特定波长(630nm)光能作用于光敏剂进行照射,产生光动力学反应,以破坏细胞的结构和功能,最终对某些非黑色素瘤皮肤癌达到治疗功效〔1〕。此技术在皮肤科领域应用广泛,如皮肤基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)、鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)、日光性角化病(actinic keratosis,AK)和尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)、Bowen病、Paget病等皮肤癌、癌前期病变及其他皮肤良、恶性增生性疾病,都获得了满意的疗效。特别是国内外学者将其应用于非黑色素性皮肤肿瘤的治疗,这种微创、安全、美观、方便的治疗方式越来越引起人们的关注。作者现将ALA-PDT近年来在皮肤病中的临床研究进展综述如下。

5-氨基酮戊酸光动力治疗在皮肤科临床应用的研究进展

5-氨基酮戊酸（5-aminolevulinic acid，ALA）介导的光动力治疗（Photodynamic therapy,PDT）是一种利用特定波长（630nm）光能作用于光敏剂进行照射，产生光动力学反应，以破坏细胞的结构和功能，最终对某些非黑色素瘤皮肤癌达到治疗功效。

甲磺酸伊马替尼增强ALA-PDT对皮肤基底细胞癌细胞杀伤作用研究

目的:探讨5-氨基酮戊酸(ALA)和/或甲磺酸伊马替尼对HaCaT角质形成细胞、基底细胞癌HSC-2内卟啉含量及ABCG2蛋白表达的影响,为进一步提高PDT的临床疗效提供理论依据。方法:本研究采用表皮HaCaT角质形成细胞、HSC-2基底细胞癌细胞系,在有或无甲磺酸伊马替尼的情况下,用ALA孵育这两种细胞。采用Western-Blotting方法测定ABCG2蛋白含量,ELISA方法检测细胞内卟啉物质的含量,并用共聚焦激光扫描显微镜观察细胞内卟啉物质的定位。结果:研究发现在HaCaT细胞和HSC-2细胞中,与单一ALA与HSC-2细胞作用相比,ALA与甲磺酸伊马替尼联合作用可提高原卟啉物质在HSC-2细胞内的蓄积作用,增强PDT诱导细胞死亡的作用,同时与单一ALA与HSC-2细胞作用相比,ALA与甲磺酸伊马替尼联合作用可显著降低ABCG2蛋白的表达,增强PDT治疗对HSC-2细胞的杀伤作用。结论:本研究揭示了ALA-PDT治疗基底细胞癌敏感性降低的可能原因,为采用ALA-PDT联合甲磺酸伊马替尼进一步提高PDT治疗基底细胞癌的疗效提供理论基础。

不同封包方法对局部ALA-PDT治疗老年Bowen病ALA透皮吸收和生物利用度的影响

目的研究不同封包方法对局部5-氨基酮戊酸(ALA)-光动力疗法(PDT)治疗老年Bowen病ALA透皮吸收情况和生物利用度的影响。方法以迷你猪动物作为模型,在有无预先使用角质软化剂处理、不同封包温度、不同溶剂、不同pH值等条件下避光封包ALA,采用荧光法检测ALA透皮吸收和生物利用度,探索局部外用ALA的最佳方法。将此条件用于治疗老年Bowen病作为优化组,目前常规封包方法治疗作为传统组,比较两组患者的治疗效果和复发率。结果 37℃,pH4.0的ALA制剂透皮吸收和转化效率在封包12 h时达到最大吸收,具有显著性差异(P<0.05);而不同溶剂和角质软化剂的使用无显著差异。优化组3例患者经过上述治疗后,皮损消退,有效率100%,均未留明显瘢痕,随访6个月无复发;传统组3例患者中两例患者皮损消退,一例患者经过治疗后留有明显瘢痕且复发,复发率为33.3%(1/3)。结论分析找出局部ALA外用的最佳方法,并选取最佳方式用于临床治疗老年Bowen病,其复发率低,效果更显著,可为ALA-PDT的推广应用提供指导性意见。

ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422脑胶质细胞肿瘤基因P16及P53变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422脑胶质细胞瘤肿瘤基因P16及P53表达的变化。方法:以不同剂量ALA(20mg/kg4、0 mg/kg、60 mg/kg、80 mg/kg1、60 mg/kg)、HPD(1 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、4 mg/kg、5mg/kg)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422脑胶质细胞肿瘤以波长630nm半导体激光照射,功率密度200mW/cm2,每光斑照射20分钟,PDT后一天、三天、七天及十四天,以流式细胞仪测试各组基因P16、P53不同光敏剂组及不同时间表达的变化并与不照光对照组比较。结果:本实验中未作PDT治疗的对照组肿瘤,肿瘤生长快,P16对照组最低值12.01%.最高值15.41%,HPD-PDT组表达最低值17.12%,最高值34.735%,ALA-PDT组,表达最低值17.1%,最高值25.51%,而HPD与ALA联合治疗组表达最低值16.5%,最高值28.22%;P53对照组最低值15.02%,最高值23.16%,HPD-PDT组,表达最低值29.98%,最高值43.62%,ALA-PDT组,表达最低值25.06%,最高值33.25%,而HPD与ALA联合治疗组表达最低值28.08%,最高值41.01%。总的P16、P53光动力学治疗组表达明显高于对照组,随光敏剂剂量增加表达值渐增,HPD-PDT组表达高于ALA组,HPD1mg/kg联合、ALA60-80mg/kg,HPD2mg/kg联合ALA40-60mg/kg,HPD3-4mg/kg联合ALA20mg/kg能达到P16表达最佳值及最高值。PDT后七天表达较佳。结论:推测PDT疗法激活了P16基因及p53基因功能,促使肿瘤细胞凋亡及坏死。联合疗法HPD1mg/kg联合ALA60-80mg/kg,HPD2mg/kg联合ALA40-60mg/kg光动力学治疗表达是最佳值或最高值,这样可明显提高ALA-PDT疗效及减少HPD-PDT的皮肤光毒反应。

ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞基因P16及P53变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞瘤基因P16及P53变化。方法:以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,以流式细胞仪测试基因P16及基因P53的变化。结果:本实验中未作PDT治疗的对照组,肿瘤细胞生长良好,可见P16值小于6.59%。P53值小于4%。而PDT治疗组随着光敏剂剂量的加大P16及P53基因值逐渐上升,是未作PDT治疗组的3-4倍,且两光敏剂混合组,P16及P53基因值大于单纯ALA或HPD-PDT治疗组。HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml就能达到HPD5μg/ml PDT治疗组P16基因及P53基因水平。结论:推测PDT疗法激活了P16基因及p53基因功能,促使肿瘤细胞凋亡及坏死。联合疗法HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml光动力学治疗能达到HPD常规剂量5μg/ml PDT的效果,这样可明显提高ALA-PDT疗效及减少HPD-PDT的皮肤光毒反应。

ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞内钙离子变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞内钙离子变化。方法:以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,应用Fluo-3AM为细胞内钙离子荧光指示剂,以激光共聚焦显微镜测定对照组及光动力学组照光后培养24小时活细胞细胞内钙离子含量,及测定单激光及对照组、光动力学治疗组照光前36秒及照光20分钟至停照光后20-100分钟细胞内钙离子浓度的动态变化,每12秒测定一次。结果:空白对照组、单激光、单加光敏剂组活C6胶质瘤细胞显示钙离子荧光值,在120分钟内变化较小。而光动力学治疗组,初照光5-15分钟内荧光明显慢慢增强,以后就逐渐下降,光敏药剂量大的初5-10分钟内荧光亮度上升很快,以后下降也快,可下降为0,剂量越大变化越明显,且光敏剂ALA较HPD更明显。二光敏剂联合组以上反应更明显,HPD1-2μg/ml联合ALA40-60μg/ml与HPD 5μg/ml组动态图相似。结论:通过本实验可推测光动力学作用后细胞内钙离子超载可能在细胞凋亡及死亡中发挥重要作用。二光敏剂联合可提高疗效,降低HPD光敏剂用量,减少皮肤光毒付反应,HPD1-2μg/ml联合ALA40-60μg/ml是较合适的剂量。

ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422胶质瘤肿瘤细胞内钙离子变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422胶质瘤肿瘤细胞内钙离子变化。方法:以不同剂量ALA(20、40、60、80、160mg/kg、)、HPD(1、2、3、4、5mg/kg)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422胶质瘤肿瘤,应用Fluo-3AM为细胞内钙离子荧光指示剂,以激光共聚焦显微镜测定对照组及光动力学组照光后立即、一天、三天肿瘤活细胞细胞内钙离子含量,并同时测定单激光、单用光敏剂、及空白对照组鼠肿瘤细胞内钙离子表达。结果:空白对照组、单激光、单加光敏剂组鼠G422胶质瘤肿瘤显示3天内钙离子荧光值维持在较恒定值,光动力组在治疗后立即组可见钙离子值明显高于未作光动力学治疗的对照组,且与光敏剂剂量增加有关,光动力学治疗后一天及三天组肿瘤细胞内钙离子值明显低于立即组及未作光动力学治疗组,且与光敏剂剂量增加有关。ALA-PDT组较HPD-PDT组更明显。联合治疗组HPD1-2mg/kg联合LA40-60mg/kg光动力学治疗组肿瘤细胞内钙离子值接近HPD 5mg/kg光动力学治疗组。结论:通过本实验可推测光动力学作用后细胞内钙离子超载可能在细胞凋亡及死亡中发挥重要作用。二光敏剂联合可提高疗效,降低HPD光敏剂用量,减少皮肤光毒副反应,HPD1-2 mg/kg联合ALA40-60 mg/kg是较合适的剂量。