ALA-PDT对尖锐湿疣凋亡及细胞因子的影响

目的:检测5-氨基酮戊酸-光动力疗法(ALA-PDT)治疗前后尖锐湿疣皮损凋亡相关因子(Fas、caspase3、Bcl-2)及促炎症细胞因子(CCL-20、TNF-α、IL-1)的表达,探讨AL A-PDT治疗尖锐湿疣的可能机理。方法:收集10例尖锐湿疣患者ALA-PDT治疗前后皮损(同时以正常健康者皮肤组织对照),采用荧光定量PCR检测其Fas、caspase3、Bcl-2、CCL-20、TNF-α、IL-1 mRNA表达;Western blot检测其Fas、caspase3、Bcl-2、CCL-20、TNF-α、IL-1蛋白表达。结果:尖锐湿疣皮损组织内Fas、caspase3、Bcl-2、CCL-20、TNF-α、IL-1 mRNA和蛋白表达均高于正常皮肤组织(P<0.05);与治疗前比较,治疗后Bcl-2、CCL-20、TNF-α、IL-1 m RNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Fas、caspase3 m RNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:AL A-PDT是一种能有效治疗尖锐湿疣的方法,它可诱导细胞表面凋亡蛋白Fas、caspase3的表达、减少凋亡抑制因子Bcl-2的表达,从而可能依靠内源性途径(线粒体介导的凋亡)和外源性途径(死亡受体介导的凋亡)促进尖锐湿疣角质形成细胞凋亡;并可能通过抑制促炎细胞因子CCL-20、TNF-α、IL-1而发挥局部免疫调节作用。

ALA-PDT破坏K562和HL60白血病细胞实验条件选择的研究

目的研究在5 -氨基乙酰丙酸( 5 -aminolaevulinicacid ,ALA)介导的光动力疗法(PDT)灭活K5 62和HL60白血病细胞株的实验中,光敏剂的浓度、暗室孵育时间、光源波长及ALA -PDT后继续培养对细胞存活率的影响。方法用不同浓度( 0 .5、1、1.5、2mmol/L)的ALA避光孵育细胞不同时间( 1、2、4、6、12h) ,给予不同波长( 4 10、5 77nm)光源照射后,即刻处理或继续培养,采用MTT法检测细胞存活率。结果ALA +光照能对白血病细胞产生灭活作用。细胞存活率随ALA浓度的增加而降低,在细胞密度为2×10 5个/ml,ALA浓度2mmol/L ,暗室孵育4h细胞存活率最低,光源波长为410nm时细胞存活率低于偏离此波长时的存活率。PDT后2 4hK5 62细胞的存活率较PDT后即刻的升高,而HL60则进一步降低,ALA -PDT对正常外周血单个核细胞及外周血干细胞存活率影响不大。结论ALA -PDT能够灭活K5 62和HL60白血病细胞。较理想的实验条件是2mmol/LALA避光孵育2×10 5/ml细胞,4h、光源波长410nm ,PDT后2 4h。在此条件下,K5 62细胞对PDT的反应不如HL60细胞敏感,对PBMC无灭活作用,对外周血造血干细胞影响较小。

ALA-PDT联合0.1%他克莫司软膏治疗玫瑰痤疮疗效观察与分析

目的:观察ALA-PDT(5-氨基酮戊酸光动力疗法)联合0.1%他克莫司软膏治疗玫瑰痤疮的疗效及安全性。方法:将95例Ⅰ型及Ⅱ型玫瑰痤疮患者随机分为治疗组、对照1组及对照2组。治疗组及对照1组采用双波长ALA-PDT治疗,每周1次,共治疗4次,同时,治疗组及对照2组采用0.1%他克莫司软膏,每日2次,连续8周。结果:治疗第8周后,治疗组、对照1组及对照2组总有效率分别为86.11%、62.96%及34.38%,均未见严重不良反应,治疗组与两对照组比较,总有效率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ALA-PDT联合0.1%他克莫司软膏治疗玫瑰痤疮安全、有效,可明显改善患者生活质量,且不良反应少。

ALA-PDT对K562、HL60细胞株破坏的实验研究

探讨基于氨乙酰丙酸介导的光动力作用(ALA-PDT)对白血病细胞株HL60和K562细胞的杀伤模式及其可能机制。在ALA-PDT处理细胞的优化条件下,用透射电镜对处理细胞进行超微结构观察,选择AnnexinV-FITC/PI双标法明确ALA-PDT对两种白血病细胞的杀伤模式,PI染色流式细胞仪分析ALA-PDT后细胞周期的变化,以Fluo-3/AM为钙离子指示剂采用激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化。透射电镜观察发现PDT后即刻的细胞呈现典型的凋亡小体,24h后大部分发生坏死;双标法检测显示PDT后即刻及24h后细胞的死亡模式分别以凋亡和凋亡后坏死为主。光动力作用后即刻和作用后2h,K562细胞S期所占的比例分别为57.67%±1.13%和84.77%±6.20%,HL60细胞S期所占的比例分别为74.6%±7.27%和84.60%±1.74%;两种细胞内钙离子浓度的均明显升高。在最佳试验条件下,凋亡是ALA-PDT杀伤白血病细胞K562和HL60细胞的最初模式,而凋亡后坏死为其主要模式,ALA-PDT使白血病细胞株阻滞于S期,在白血病细胞株死亡的过程中,细胞内钙离子浓度的增加可能起着重要的作用。

ALA-PDT疗法联合卡介苗多糖核酸肌内注射治疗46例尖锐湿疣患者的中期随访研究及血清NGF、T细胞亚群水平分析

目的探究5-氨基酮戊酸(ALA)光动力(PDT)疗法联合卡介苗多糖核酸肌内注射治疗尖锐湿疣的应用效果及对血清神经生长因子(NGF)、T细胞亚群水平的影响。方法选取2013年8月至2016年10月沈阳市第七人民医院诊治的92例尖锐湿疣患者作为研究对象。随机数表法分为两组,各46例。两组均予以ALA-PDT疗法治疗,在此基础上,实验组予以卡介苗多糖核酸治疗,两组均连续治疗3个月。疗程结束后,统计两组治疗效果及不良反应情况,对比治疗前及疗程结束后血清T细胞亚群(CD4^+、CD4^+/CD8^+、CD8^+、CD3^+)及NGF水平,随访12个月,观察记录复发情况。结果实验组治疗效果优于对照组,且治疗总有效率91.30%(42/46)较对照组76.09%(35/46)高,差异具有统计学意义(P<0.05);两组血清T细胞亚群CD4^+、CD4^+/CD8^+、CD8^+、CD3^+治疗前明差异无统计学意义(P>0.05);疗程结束后,实验组CD4^+、CD4^+/CD8^+、CD3^+较对照组高,CD8^+较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.05);两组血清NGF水平治疗前差异无具有统计学意义(P>0.05);疗程结束后,实验组血清NGF水平较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组不良反应率23.91%(11/46)与对照组15.22%(7/46)相比差异无具有统计学意义(P>0.05);两组均随访12个月,实验组2例失访,对照组4例失访。实验组随访3个月、6个月及12个月复发率均较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对尖锐湿疣患者予以ALA-PDT疗法治疗基础上,加用卡介苗多糖核酸治疗,可有效改善T细胞亚群,显著降低NGF水平,进一步提高治疗效果,且随访复发率较低,安全性较高,在临床治疗中具有重要意义。

ALA-PDT对多种白血病细胞破坏作用的实验研究

目的:本研究主要观察相同条件的5 氨基乙酰丙酸的光动力疗法(ALA PDT)对不同种类的白血病细胞株生存率的影响,以及细胞死亡类型的差异。方法:选择5种白血病细胞(K562、HL60、U937、MOLT 4和6T CEM)进行比较。用MTT法检测细胞的存活率,用AnnexinV FITC PI双染法检测细胞不同死亡类型的比例。结果:不同细胞对相同条件的ALA PDT的敏感程度不同,依次为U937<MOLT 4<6T CEM<K562<HL60,在ALA和光照共同作用下细胞的存活率明显低于单一因素作用引起的细胞存活率。不同细胞的死亡类型不同,其中MOLT 4和U937细胞以早期凋亡为主,K562和HL60细胞以晚期凋亡为主,而6T CEM细胞以坏死为主。结论:ALA PDT能够灭活白血病细胞,不同种类的细胞对其敏感度不同。

更昔洛韦与ALA-PDT联合治疗尖锐湿疣的临床观察

目的 研究更昔洛韦与δ 氨基酮戊酸光动力疗法 (ALA PDT)联合治疗尖锐湿疣 (CA)的疗效和作用机制。方法 10 4例患者随机、均等分成 2组 ,分别接受联合疗法和单纯激光治疗 ,观察疗效和副作用。结果 两种方法都可使皮疹迅速消退 ,症状缓解 ,但前者副作用更小 ,复发率低 (P <0 .0 1)。结论 更昔洛韦与ALA PDT联合疗法是治疗尖锐湿疣和预防复发的有效方法。

CO2激光联合ALA-PDT治疗尿道内尖锐湿疣的可行性及安全性

目的探讨CO_2激光联合ALA-PDT治疗尿道内尖锐湿疣的可行性及安全性。方法随机选择2015年3月~2016年3月我院收治的尿道尖锐湿疣患者112例,将其分为对照组与观察组,各56例,对照组采取CO_2激光疗法,观察组在对照组基础上联合氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)。治疗结束后随访24周,观察疣体复发情况及患者对治疗的满意度。结果治疗后,两组患者第1、2周的一次性治愈率比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者第4、8、12、24周一次性治愈率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者复发率逐渐增加,到第8周时达到稳定状态;观察组患者复发率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者满意度为96.43%,明显优于对照组的83.93%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用CO_2联合ALA-PDT治疗尿道内尖锐湿疣能提高一次性治愈率,有效降低复发率,提高患者满意度。

ALA-PDT对SW480结肠癌细胞周期阻滞作用及对G_1/S关卡调控因子的影响

目的:了解光动力疗法对结肠癌SW480细胞的周期阻滞作用与G1/S关卡调控因子之间的联系. 方法:对体外培养的SW480结肠癌细胞进行ALA-PDT实验,使用流式细胞仪技术观测基于δ-氨基乙酰丙酸的光动力疗法对SW480细胞的细胞周期阻滞作用,应用免疫细胞化学技术检测光动力疗法对G1/S关卡调控因子Chk2,P21wAF1/Cip1/Sdi1,CyclinD1蛋白表达的影响. 结果:基于δ-氨基乙酰丙酸的光动力疗法可在其作用后早期诱导SW480细胞产生G0-G1细胞周期阻滞,G0/G1期比例显著增加,而S期和G2/M期比例明显下降,且呈时间依赖性变化;光动力作用诱导SW480细胞G1/S关卡调控因子Chk2,P21wAF1/Cip1/Sdi1蛋白表达增高,降低CyclinD1 蛋白表达,与G1/S期阻滞进程相一致,均呈时间依赖性变化. 结论:基于δ-氨基乙酰丙酸的光动力疗法可诱导SW480 细胞产生G0-G1细胞周期阻滞,光动力疗法对SW480细胞的G0-G1期阻滞作用与其对多个G1/S关卡调控因子的调节事件有关.

低剂量ALA-PDT对人角质形成细胞生长和分泌细胞因子的作用研究

目的:研究不同剂量5-氨基酮戊酸-光动力治疗(5-aminolevulinic acid photodynamic,ALA-PDT)对体外培养的人角质形成细胞增殖的影响和分泌生长因子的作用。方法:首先以噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)检测ALA-PDT对永生化人角质形成细胞(HaCaT细胞系)增殖的影响,再用相同的方法检测ALA-PDT对分离的人角质形成细胞(kerotinocyte,KC)增殖的影响,最后以ELISA法检测ALA-PDT对KC培养上清液中碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量的影响。结果:低剂量ALA-PDT(0.1m M和0.01m MALA,红光21J/cm^2)能促进HaCaT细胞和人角质形成细胞的增殖;高剂量ALAPDT(0.5m MALA,红光21J/cm^2)抑制其增殖。低剂量ALA-PDT干预24h后,bFGF分泌明显高于0.5m MALA组和单纯红光组;而VEGF呈现24h时轻度下降,24h后明显增加的趋势。结论:高剂量ALA-PDT抑制角质形成细胞的增殖,甚至杀伤细胞;低剂量ALA-PDT能促进角质形成细胞的增殖,并且促进角质形成细胞分泌bFGF和VEGF。

复方甘草酸苷联合ALA-PDT治疗中、重度痤疮44例临床观察

目的评价复方甘草酸苷联合5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗中、重度痤疮的疗效及安全性。方法将入选的85例中、重度痤疮患者按就诊顺序随机分为两组,治疗组44例,对照组41例。对照组予ALA-PDT照射20 min,1次/周;治疗组同时予复方甘草酸苷3片,3次/d,两组患者疗程均为8周。结果治疗8周后,治疗组有效率为90.91%,对照组有效率为73.17%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗结束后3个月时,治疗组复发率4.54%,对照组复发率19.51%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的不良反应发生率比较,差异无统计意义(P>0.05)。结论复方甘草酸苷联合ALA-PDT治疗中、重度痤疮疗效优于单用ALA-PDT治疗,且复发率低,值得临床推广应用。

皮损内注射强的松龙联合ALA-PDT治疗重度痤疮临床观察

目的:探讨强的松龙皮损内注射联合5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗重度痤疮的临床疗效及安全性。方法:将140例重度痤疮患者随机分成两组。治疗组:70例,给予强的松龙囊肿及结节内注射,同时配合ALA-PDT治疗,每7d治疗1次,共治疗4次;对照组:70例,仅给予ALA-PDT治疗,每7d治疗1次,共治疗4次。治疗第2、4、6周对两组患者进行疗效判断及不良反应对比,并且判定安全性及治疗后3个月的复发状况。结果:所有患者经过1~4次治疗后,治疗组总有效率为97.1%,对照组总有效率为87.1%,治疗组疗效明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:强的松龙皮损内注射联合光动力疗法治疗重度痤疮安全、有效,不良反应发生少。

ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的治疗机制的初步研究

目的:研究ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕中MMP-2和TIMP-1的变化,探讨ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的治疗机制。方法:分为正常组、阴性对照组、高浓度ALA-PDT治疗组、低浓度ALA-PDT治疗组、PDT治疗组进行治疗,1次/周,共3次。治疗后1月、2月和3月采集样本,进行RT-PCR和Western blot实验。结果:ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕是有效的。结论:ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的治疗机制可能是通过逆转MMP-2和TIMP-1之间的失衡状态实现的。

ALA-PDT联合DL-100C电脑多功能电离子手术治疗机治疗尿道尖锐湿疣的护理

选取我院2014年6月-2015年6月收治的30例尿道尖锐湿疣患者为研究对象,均行ALA-PDT联合DL-100C电脑多功能电离子手术治疗机治疗,将两组患者随机分为观察组和对照组各15例。观察组实行整体护理模式,对照组实行常规护理模式,对比两种护理模式的护理满意度。结果观察组护理满意度为93.33%,对照组护理满意度为73.33%,组间差异具有统计学意义（P〈0.05）。ALA-PDT联合DL-100C电脑多功能电离子手术治疗机治疗尿道尖锐湿疣的临床效果显著,辅以整体护理可有效提高患者满意度。

5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗尖锐湿疣影响因素及预后探讨

目的:研究5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)在尖锐湿疣临床治疗中的效果,并探讨其影响因素和预后情况。方法:我院治疗的尖锐湿疣患者60例,随机分为两组。治疗组采用ALA-PDT治疗;对照组采用液氮冷冻治疗,比较两组治疗效果和预后情况。结果:对照组临床治愈率为66.67%,低于治疗组的93.33%(P<0.05);治疗组复发率低于对照组(P<0.05)。结论:应用ALA-PDT疗法治疗尖锐湿疣疗效显著,复发率较液氮冷冻治疗低。

5-ALA-PDT联合微波治疗不同尖锐湿疣HPV病毒分型的疗效对比

目的对比研究5-氨基酮戊酸光动力疗法(5-ALA-PDT)联合微波治疗不同尖锐湿疣HPV病毒分型的疗效及复发率。方法选取2016年1月-2018年1月本院68例尖锐湿疣患者,随机数字表法分组,每组34例。对照组给予微波治疗,在此基础上,实验组给予5-ALAPDT。观察对比HPV病毒分型、治疗效果,于治疗后3个月随访两组复发情况。结果 68例尖锐湿疣患者中,HPV基因检测阳性共68例,包含44例一重HPV感染(每组22例),二重HPV感染22例(每组11例),三重HPV感染2例(每组1例);实验组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后3个月随访,两组均无脱落病例。实验组复发率2.94%与对照组8.82%比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。结论 5-ALA-PDT联合微波用于不同HPV病毒分型尖锐湿疣患者,具有疗效佳、复发率低等优势,特别是HPV病毒分型高危型亚型者。

ALA-PDT联合高频电灼治疗基底细胞癌的疗效观察及护理

目的 探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）结合高频电灼治疗基底细胞癌的疗效及护理体会.方法 对40例基底细胞癌患者,根据个体的皮损状况给予ALA-PDT联合高频电灼治疗,同时给予良好的护理及指导,对完全缓解的病例进行为期6个月的随访.结果 经过5～15次的治疗和良好的护理后,完全缓解31例（77.5％）,部分缓解4例（10.0％）,无效5例（12.5％）,总有效率为87.5％;美容效果满意度评价中,满意29例（72.5％）、一般满意4例（10.0％）、不满意7例（17.5％）;31例完全缓解的患者随访6个月,有4例（12.9％）复发;所有病例均未出现感染、创口愈合不良.结论 ALA-PDT结合高频电灼治疗对基底细胞癌疗效优越,结合良好的护理措施,可以提高治疗效果,增加患者对治疗的满意度.

外用盐酸氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗尖锐湿疣的疗效观察

目的观察尖锐湿疣的患者,采用外用盐酸氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗的疗效。方法选取2015年12月~2016年12月本院收治的以尖锐湿疣为诊断的患者100例作为研究对象,依照患者主观意愿选择治疗方案的区别分为两组。采用ALA-PDT治疗的47例患者称为光动组,采用普通传统CO_2激光疗法53例患者称为对照组。将两组患者的一次治疗治愈率,疗程结束后疣体清除率,1、3个月复发率及不良反应发生率对照解析。结果光动组43例一次治疗即治愈占组数91.49%,对照组39例一次治愈占组数73.58,两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。疗程结束后全部患者均可清除疣体。治疗结束后1、3个月复查,其中光动组复发率为2.13%、4.26%,总复发率6.39%;对照组13.21%、22.64%,总复发率35.85%,两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。光动组出现2例轻度刺痛灼烧感,1例轻度粘膜糜烂、尿痛,1例溃疡,4例不良反应均较轻;对照组出现6例轻度刺痛、灼烧感,7例轻度粘膜糜烂、尿痛,4例感染,3例瘢痕,3例溃疡,2例尿道狭窄,共计25例不良反应均较重,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于尖锐湿疣的患者,采用外用盐酸氨基酮戊酸光动力疗法治疗,临床效果显著,不良反应发生情况较轻,复发率较低,有在临床上推广使用价值。