天花粉蛋白对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR及干细胞标志物ALDH1蛋白表达的实验研究

目的探讨天花粉蛋白对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7／ADR及干细胞标志物ALDH1蛋白表达的影响。办法主要采用MTT法检测不同浓度的天花粉蛋白（TCS）对MCF-7／ADR细胞增殖的抑制作用；流式细胞术（FCM）检测MCF-7／ADR细胞的凋亡情况；四唑氮盐（MTT）比色试验、Western-Blot印迹法观察天花粉蛋白对乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7／ADR的耐药逆转作用。结果MTT分析结果显示，TCS在20-100mg／L浓度范围内有明显的抑制作用，存在剂量-效应和时间-效应关系。流式细胞术检测结果显示：20，40，80mg／L TCS作用48h后，MCF-7／ADR细胞凋亡率分剐为12．56％±0．70％，18．34％±1．01％，38．92％±1．79％，细胞凋亡率随药物浓度增加而增加，各实验组之间比较有显著性差异（P〈0．05）。（MTT）比色试验、Western-Blot印迹法结果发现：MCF-7中未测出ALDH1蛋白，在MCF-7／ADR空白对照和TCS20mg／L作用2d后检测出ALDHJ蛋白表达开始下降，MCF-7／ADR在TCS20mg/L作用3（1，4d后ALDH1蛋白表达明显下降，MCF-7／ADR在TCS 20mg/L作用5d后来检测到ALDHI蛋白的表达。结论天花粉蛋白（TCS）具有逆转乳腺癌细胞株MCF-7／ADR耐药性的作用，可明显下调ALDHI蛋白的表达。天花粉蛋白（TCS）可能通过下调ALDH1蛋白的表达，抑制乳腺癌干细胞的富集，来诱导MCF-7／ADR细胞凋亡，抑制MCF-7／ADR细胞的增殖。

100例肺腺癌组织中ALDH1L2蛋白的表达

目的探究ALDH1L2蛋白在肺腺癌组织中的表达。方法将2013年7月至2017年7月期间接收并行手术治疗100例肺腺癌患者,设为研究组。将手术切除的肺腺癌标本用免疫组织化学法染色存档蜡块,并将同期收集的100例癌旁肺组织进行染色观察,设为对照组,比较组间ALDHlL2蛋白的表达情况。结果肺癌组织中的ALDH1L2蛋白阳性表达率明显要高于癌旁组织组(P<0.05),且表达跟TNM分期、肺腺癌分化程度、既往吸烟史等因素相关。结论通过对ALDH1L2蛋白表达的染色,可以对肺腺癌组织预后进行评价。该项表达可能参与肺腺癌干细胞功能的调节与维持,可作为研究肺腺癌的潜在靶点。

肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在NSCLC中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法,检测70例NSCLC组织中CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1蛋白的表达情况。结果 CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在70例NSCLC组织中阳性表达率分别为88.57%、98.57%、100.00%、100.00%、100.00%,强阳性表达率分别为48.57%、67.14%、67.14%、31.43%、50.00%;NSCLC组织中CD44与SOX2共表达分析存在统计学意义(P=0.028);70例NSCLC中CD44++SOX2++组合占38.57%(27/70),CD44++ALDH1++组合占34.29%(24/70),SOX2++ALDH1++组合占34.29%(24/70),CD133++SOX2++组合占31.43%(22/70),双强阳性NSCLC组织与非双强阳性NSCLC组织比较,病理分化程度方面均有差别,双强阳性NSCLC组织多为中、低分化,而非双强阳性NSCLC组织倾向高分化。上述4种双强阳性组织与非双强阳性组织在病理分化程度上比较,均有统计学意义(P值分别为0.0022、0.0463、0.0463、0.003)。结论 NSCLC组织中OCT4、CD44、SOX2、CD133、ALDH1表达阳性率高;CD44与SOX2存在共表达关系;双强阳性组合CD44++SOX2++、CD44++ALDH1++、SOX2++ALDH1++、CD133++SOX2++,有可能对研究NSCLC干细胞标记物有一定的帮助。

采用免疫组化的方法分析ALDH1基因在有无血吸虫病结直肠组织中的差异表达研究

背景:本研究旨在比较ALDH1基因在有无血吸虫病结直肠组织(息肉、癌组织)中的差异表达及病理特点,探讨我国肠道血吸虫病与结直肠病之间的关系及其可能的病理机制研究,以提高对肠道血吸虫病的认识,为我国肠道血吸虫病的诊断和治疗奠定基础。方法:收集11例结直肠病变组织样本(息肉、癌组织),并将样本分成四组:A、血吸虫组,B、无血吸虫组,C、血吸虫息肉,D、无血吸虫息肉,每个样本重复三次实验。(1)观察每个样本的病理特点并比较有无血吸虫结直肠病组织样本间的病理差异(2)组织芯片分析ALDH1A1和ALDH1B1在结直肠癌中的差异表达及该基因的高低表达与患者预后的相关性分析(3)免疫组化结合HE染色方法分析ALDH1A1蛋白在有无血吸虫结直肠组织中的表达差异。结果:经对有无血吸虫结直肠癌的病例特点进行比较分析发现:(1)在血吸虫肠病组中主要以慢性炎症伴息肉增生为主;(2)结直肠癌芯片数据分析结果表明:ALDH1A1和ALDH1B1基因在结直肠组织中分别表现出了显著下调(p<0.01)和显著上调(p<0.01),但其高低表达与患者总生存时间无显著相关。(3)免疫组化结果发现:与无血吸虫组相比,ALDH1A1蛋白在血吸虫组中的表达表现出下调趋势,但无显著差异(p>0.05)。结论:(1)通过临床特征观察发现,血吸虫结直肠病主要以慢性炎症伴息肉增生为初始病理特征。(2)ALDH1基因可能与结直肠癌的发生显著相关,但与结直肠癌患者的预后无关(3)免疫组化结果表明,血吸虫病可能与结直肠癌的发生无显著相关或可能通过调控其他途径诱导结直肠癌的发生而不是通过调控ALDH1A1蛋白的异常表达而导致的结果。

乙醛脱氢酶ALDH4A1的生物信息学分析

目的研究乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)蛋白的结构与功能,进一步探究其在动脉粥状硬化发生发展及临床病理因素的关系。方法利用Protparam、ProtScale、NetPhos3.1、YinOYang 1.2 Server、NetNGlyc 1.0Server、SOPMA及SWISS-MODEL等在线软件和生物信息学手段对ALDH1A1蛋白的理化性质、亲疏水性、磷酸化位点、糖基化位点及二、三级结构等生物学特性进行了系统分析,并利用Clustal×2和MEGA7.0软件对ALDH1A1蛋白进行同源性分析和系统进化分析。结果ALDH1A1蛋白由563个氨基酸组成,是亲水碱性蛋白,不稳定指数为41.65;在体外哺乳动物中的半衰期为30h;共有44个可能的磷酸化位点和8个可能的糖基化位点;无跨膜螺旋区与信号肽;二级结构预测结果显示,ALDH1A1蛋白中α-螺旋结构与无规则卷曲结构占比都较高,而β-转角结构占比很少,只有4.97%;同源性与进化性分析显示,与褐家鼠序列一致性最高的是黄金仓鼠,它们的亲缘关系最近。结论ALDH4A1进化性高度保守功能重要,有助于揭示蛋白功能、靶向药物设计,有助于动脉粥样硬化治疗提供理论参考。

CyclinD1、P27、CK19、ALDH1A1在乳腺病变中表达及意义

目的探讨细胞周期D1(Cyclin D1)、P27、细胞角蛋白19(CK19)、ALDH1A1在乳腺病变中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测79例乳腺组织标本(包括正常乳腺、乳腺增生、乳腺导管原位癌、乳腺浸润性导管癌)中Cyclin D1、P27、CK19、ALDH1A1的表达情况,分析其与乳腺癌干细胞增殖及乳腺病变组织分化程度之间的关系。结果正常乳腺、乳腺增生、乳腺导管原位癌、乳腺浸润性导管癌中Cyclin D1、ALDH1A1的表达逐渐上升,P27、CK19的表达逐渐下降;乳腺正常及良性增生组织中Cyclin D1、CK19、ALDH1A1的表达明显低于乳腺导管原位癌及浸润性导管癌(P<0.05);乳腺正常及良性增生组织中P27的表达明显高于导管原位癌及浸润性导管癌(P<0.05)。结论 Cyclin D1、P27相互作用调节乳腺癌干细胞的发生及发展过程,CK19、ALDH1A1可作为乳腺癌诊断及恶性程度评估的参考指标。