非小细胞肺癌EML4-ALK融合基因检测结果的初步分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织棘皮动物微管样蛋白4-间变淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因的突变情况,及其与NSCLC临床病理特征和预后的关系。方法采用突变扩增阻滞系统检测26例NSCLC组织中EML4-ALK融合基因的9种突变和表皮生长因子受体(EGFR)的18、19、20、21外显子突变,进一步分析EML4-ALK融合基因突变与NSCLC临床病理特征和总生存期(OS)的关系。结果 26例NSCLC患者中检测到6例EML4-ALK融合基因突变。EML4-ALK融合基因突变与年龄、吸烟史、临床分期、组织分化和EGFR突变有关,与病理类型、性别、标本类型和血清癌胚抗原无关(P>0.05)。EML4-ALK融合基因阳性者的中位OS为9个月,低于阴性者的12个月,但差异无统计学意义(P=0.460)。结论 NSCLC中EML4-ALK融合基因突变多见于无吸烟史或少量吸烟、年龄较小、临床分期较晚、组织分化较差、无EGFR突变的患者。

ALK融合基因阳性肺腺癌患者耐药核心基因鉴定及药物靶点分析

目的探讨ALK融合基因阳性肺腺癌患者原发灶及转移灶基因表达谱的差异,从而探索转移灶耐药机制及相应的药物靶点分析。方法GEO数据库中选取GSE125864,根据肿瘤组织取材部位不同分为原发灶组和转移灶组。首先,比较两组患者之间显著差异基因的表达,并分析这些显著差异基因在生物学功能和富集信号通路等方面的不同;其次,对显著差异基因进行蛋白-蛋白互作网络分析及关键模块、核心基因分析。最后,基于TCGA和癌症治疗反应门户数据库对筛选的10个关键核心进行预后、药物靶点预测等分析。结果共筛选出227个差异基因,以肺腺癌原发灶为对照组,转移灶中共发现134个上调基因,93个下调差异基因;GO和KEGG富集分析显示,这些差异基因的功能主要涉及补体和凝血级联、化学致癌作用、视黄醇的新陈代谢等信号通路;通过蛋白-蛋白互作网络分析,筛选了10个核心基因,其中HRG、AHSG基因表达与肺腺癌不良预后相关,SERPINC1、HRG、APOA1、FGA、FGG等与多种潜在的小分子药物有一定相关性。结论显著差异基因涉及的分子功能及信号通路可能引起ALK阳性肺腺癌患者转移灶耐药。

非小细胞肺癌患者组织原发灶和转移灶中ALK融合基因的研究

目的:研究晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)原发灶和转移灶ALK融合基因阳性率,探讨其相关性。方法:收集2013年1月至2015年5月中国人民解放军北京军区总医院、军事医学科学院附属医院、浙江省肿瘤医院和大连大学附属中山医院原发灶384例,其中配对转移灶246例,统计得出ALK融合基因阳性率并分析原发灶与转移灶ALK融合基因的一致性、ALK融合基因阳性与临床基线资料间的关系。结果:ALK融合基因阳性率原发灶为11.46%(44/384)。ALK融合基因阳性率配对原发灶为10.98%(27/246),配对转移灶为7.32%(18/246),配对的246对原发灶、转移灶组织中,转移灶融合基因阳性而对应的原发灶融合基因阴性2例,原发灶融合基因阳性而对应的转移灶融合基因阴性11例,转移灶较原发灶检出ALK融合基因阳性率高,两者差别有统计学意义(χ2=112.208,P=0.000);转移灶和原发灶ALK融合基因阳性的一致率好(κ=0.683,P=0.000),通过转移灶判断原发灶融合阳性的情况,敏感性为59.26%(16/27),特异性为99.09%(217/219)。结论:非小细胞肺癌中转移灶可以预测原发灶ALK融合基因情况,在难以取得原发灶的情况下转移灶可以作为ALK融合基因测的备选手段。

EMIA-ALK融合基因阳性非小细胞肺癌的诊疗进展

肺癌是世界范围内最常见和最致命的恶性肿瘤之一。非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer， NSCLC）约占肺癌的80．0％～85．0％。由于早期症状不明显，多数患者确诊时多为中晚期，传统的治疗方法如手术、放疗、化疗能改善患者的近期疗效，但对生存期的延长作用有限。近年来，肺癌的靶向药物研究取得很大进展，其中抗表皮生长因子受体（EGFR）和棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴激酶融合基因（EML4-ALK）的制剂已进入临床，并取得较好的治疗效果。

Hi,ALK融合基因型肺癌

写下这个题目真有点别扭，有人懂你的意思吗？ 这个学术社会就这样，新名词总是令人应接不暇。鲁迅说过，世上本无路，人走多了就成为路。这新名词讲多了，说不定就出现一个新学科呢。

ALK融合基因阳性非小细胞肺癌的研究进展

ALK基因重排在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中发生率约3%-5%。ALK基因抑制剂近年来取得极大突破,明显延长了ALK阳新晚期NSCLC患者的生存期;但大部分患者持续用药后会出现获得性耐药。本文分别从ALK基因背景、检测方法、三代ALK抑制剂的治疗效果以及耐药后的策略、展望进行了阐述。希望对临床工作有参考价值和借鉴意义。

伴有CLIP1-ALK融合基因晚期肺鳞癌1例

间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因是非小细胞肺癌的重要的肿瘤驱动基因,约占非小细胞肺癌患者的5%左右,其中97%为肺腺癌患者。自2007年首次在肺腺癌患者中发现棘皮动物微管相关蛋白样4(echinoderm microtubule-associated protein-like 4,EML4)-ALK融合以来,多种ALK融合伴侣相继被检测出来。本例晚期肺鳞癌患者通过二代测序(next generation sequencing,NGS)检测到CLIP1-ALK融合基因,并于2021年5月5日开始先后口服阿来替尼、恩沙替尼治疗,阿来替尼治疗有效,但于2021年9月30日去世。本文报道了接受ALK抑制剂治疗的CLIP1-ALK融合基因的肺鳞癌患者,并对其疗效进行讨论。

非小细胞肺癌ALK融合基因非EML4伙伴的故事

2007年Rikova等[1]在肺癌细胞株中鉴别出TFG-ALK融合基因,拉开了非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)非EML4-ALK融合研究的序幕。2009年5月,Takeuchi等[2]在《Clin Cancer Res》上发表了一篇题为“运用基于免疫组织化学的诊断系统检测出一种新型的ALK阳性肺癌融合基因(KIF5B-ALK)”的文章。KIF5B基因位于10号染色体p11.22区,在胞内运输、有丝分裂、细胞形成等方面起着重要作用。研究者们运用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)分析得出KIF5B基因1~24号外显子与ALK第20号外显子融合,产生一种由几乎整个KIF5B序列连接到ALK的胞内区域组成的融合蛋白。

塞瑞替尼治疗ALK融合基因阳性晚期非小细胞肺癌的效果观察

目的:观察塞瑞替尼治疗间变淋巴瘤激酶(ALK)融合基因阳性晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的效果。方法:选取我院2017年1月—2018年1月收治的82例ALK融合基因阳性晚期NSCLC患者,采用随机数字表法分为两组,各41例。对照组采用含铂类二联化疗,观察组在此基础上随餐服用塞瑞替尼治疗,比较两组近期疗效,血清CEA与CYFRA21-1水平,不良反应及3年生存率。结果:观察组的ORR、DCR均高于对照组(P<0.05);治疗后,观察组血清CEA、CYFRA21-1水平低于对照组(P<0.05);观察组腹泻发生率高于对照组(P<0.05),两组食欲下降、恶心呕吐、上腹痛、肝功能异常、贫血、骨髓抑制发生率比较差异无统计学意义(P均>0.05);观察组2、3年生存率均高于对照组(P<0.05)。结论:塞瑞替尼治疗ALK融合基因阳性晚期NSCLC的近远期效果确切,可降低血清CEA与CYFRA21-1水平,减少肿瘤负荷,延长生存期。

间变性大细胞淋巴瘤患儿EEF1G/ALK 融合基因的鉴定与检测

目的明确1例伴少见ALK融合基因的间变性大细胞淋巴瘤患儿的分子诊断,建立该融合基因的实时荧光定量PCR检测方法。方法采用基于锚定多重PCR的二代测序技术,鉴定患儿腹股沟肿大淋巴结组织中ALK基因的伙伴基因。建立EEF1G/ALK融合基因实时荧光定量PCR方法,并对方法的重复性、灵敏度和特异性进行性能评价。在此基础上检测此患儿肿瘤组织、骨髓、外周血和脑脊液EEF1G/ALK融合基因的表达。结果经二代测序鉴定该患儿肿瘤细胞EEF1G/ALK融合基因阳性,Sanger测序验证为EEF1G Exon 6和ALK Exon 20的融合。建立的实时荧光定量PCR方法最低定量限为40拷贝/体系;弱阳性标本和强阳性标本的批内精密度CV分别为0.52%和0.17%;批间精密度CV分别为1.32%和1.14%,重复性好;检测其他ALK融合阳性标本结果为阴性,特异性好。复发时送检的淋巴结穿刺组织和外周血的融合基因定量检测结果为138.92%和0.0039%,其余检测为阴性。结论明确此例间变性大细胞淋巴瘤为少见EEF1G/ALK融合基因阳性。建立的EEF1G/ALK融合基因定量检测方法特异性、重复性好,灵敏度高,完全满足融合基因MRD监测的需要。

褪色HE染色切片ALK基因融合检测可行性探索

目的 探索利用HE染色切片褪色样本进行ALK基因融合检测的可行性。方法 选取3例ALK基因融合阳性的福尔马林固定石蜡包埋(formalin fixed and paraffin embedded,FFPE)组织样本的HE染色切片,分别经盐酸乙醇褪色法和高锰酸钾草酸氧化漂白法褪色后,提取RNA,采用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术,检测ALK基因融合。结果 从经盐酸乙醇褪色法或高锰酸钾草酸氧化漂白法褪色的HE染色切片中提取的RNA的纯度与从对照切片中提取者无显著差异,但其浓度较从对照切片中提取者显著降低。在模板量相同的条件下,经盐酸乙醇褪色的HE染色切片与对照组切片均检测到明确的ALK基因融合阳性,而经高锰酸钾草酸褪色的HE染色切片无任何曲线升起。从经盐酸乙醇褪色的HE染色切片中提取的RNA的完整性与从对照切片中提取的RNA的完整性无差异,但显著高于从经高锰酸钾草酸褪色的HE染色切片中提取者。为保证研究的准确性,本研究采用免疫组织化学与荧光原位杂交法对选取的ALK基因融合阳性样本进行验证,结果发现所选样本均为明确阳性。结论 HE染色切片经盐酸乙醇褪色后提取的RNA可以用于ALK基因融合检测。

EML4—ALK融合基因型非小细胞肺癌抑制剂研究进展

EML4—ALK融合基因是在非小细胞肺癌（NSCLC）中发现的新分子分型，由2号染色体上两个基因片段倒位融合而成，目前发现的9种亚型均具有恶化致癌能力。该融合基因在腺癌、不吸烟或少吸烟和缺少表皮因子生长受体（EGFR）及结直肠癌基因（KRAS）变异的患者中检出率较高。该融合基因能够编码ALK酪氨酸激酶，通过一系列信号转导途径使下游产物异常磷酸化，导致癌变。因此以该融合基因为靶点，使用特异性抑制剂以抑制其表达，可达到治疗效果。目前正在进行临床试验的相关抑制剂为PF02341066和TAE684等。

在中国大样本肺癌患者中分析ALK基因融合的临床特征和复杂性

间变淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase,ALK）基因是非小细胞肺癌（non-small cell lungcancer,NSCLC）的重要驱动靶点。肿瘤中含ALK重排的患者可从ALK酪氨酸激酶抑制剂（tyrosinekinase inhibitor,TKI）治疗中获益,但是靶向治疗的临床疗效在不同患者间存在明显差异。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体和ALK基因检测及其与临床病理特征的相关性

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变及EML4-ALK融合基因检测情况与临床病理特征的相关性,探讨其EGFR基因及EML4-ALK融合基因突变的意义。方法通过扩增阻滞突变系统(ARMS-PCR法)和RT-PCR法对216例NSCLC样本中EGFR基因及EML4-ALK融合基因进行检测。结果本研究中,EGFR基因突变率为40.7%,且多见于女性、不吸烟人群、腺癌患者及有胸膜转移者,与患者年龄、分化程度、是否有区域淋巴结转移无明显相关;多因素Logistic回归分析显示吸烟史和病理类型是EGFR突变的独立影响因素,即EGFR基因突变更易发生于不吸烟人群及腺癌患者;EML4-ALK融合基因突变率为6.1%,其表达状况与年龄、性别、吸烟史、肿瘤病理类型、分化程度等临床病理特征无明显相关。结论 NSCLC患者中EGFR基因突变率高于EML4-ALK融合基因突变率,EGFR基因突变在女性、不吸烟人群、腺癌患者及有胸膜转移者中较高,其中吸烟史和病理类型是EGFR突变的独立影响因素。

非小细胞肺癌患者ALK,EGFR及KRAS基因的检测及临床病理特征

目的:研究汉族非小细胞肺癌患者中间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及Kirsten鼠肉瘤基因(Kirsten rat sarcoma,KRAS)突变的阳性率及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)的方法检测ALK融合基因异常表达,采用PCR检测EGFR基因和KR AS基因突变,采用χ2检验及Fisher精确概率法进行数据分析。结果:共2 267例进行了ALK融合基因检测,其中1 655例同时进行了EGFR突变检测,951例同时进行了KRAS检测。ALK融合基因、EGFR基因及KRAS基因突变阳性率分别为7.28%(165/2 267)、48.58%(804/1 655)、11.40%(108/947)。ALK基因突变多见于年轻、腺癌患者;EGFR基因突变多见于女性、腺癌患者;KR A S基因突变多见于老年、男性、腺癌患者。1 655例同时进行了ALK与EGFR检测的病例中,共6例存在双基因突变(0.36%);947例同时进行了ALK与KRAS检测,共4例存在双基因突变(0.42%);943例同时进行了EGFR与KR A S突变检测,未发现双突变病例。结论:非小细胞肺癌患者ALK,EGFR和KR A S基因的突变与患者的年龄、性别、组织学类型均存在相应的联系,个别病例可以出现ALK融合基因与EGFR或KR AS突变共存。

非小细胞肺癌组织中ALK、ROS1、RET融合基因检测方法的比较

非小细胞肺癌在恶性肿瘤中的发病率和死亡率中高居榜首,是中国首要的一个公共卫生问题。近年出现的分子靶向药能显著改善非小细胞肺癌患者的生存质量,因此对患者突变基因的准确检测显得尤为重要。目前临床上检测非小细胞肺癌患者ALK、ROS1、RET融合基因的主要方法有荧光原位杂交、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应以及新兴起的下一代测序,但这4种方法优缺点各异。本文通过比较这几种常见的检测方法,为融合基因检测方法的选择提供参考。

1例ALK融合阳性非小细胞肺癌患者6年治疗报告

目的报告1例克唑替尼治疗ALK融合阳性非小细胞肺癌患者6年的治疗经过。方法患者女性,35岁,2012年12月因"体检发现右肺占位"就诊于我院。2012年12月31日行右锁骨上淋巴结切除活检,病理示低分化腺癌,诊断为右肺腺癌(T4N3M0ⅢB期)。该患者经FISH检测ALK融合阳性,于2013年2月7日开始口服克唑替尼250 mg,每日2次。分别于2014年11月4日和2016年2月24日出现颅脑转移,给予相应靶病灶射波刀放疗,同时继续口服克唑替尼。后因病灶控制不佳,2016年10月-2018年1月间断给予贝伐珠单抗400 mg静滴,同时联合口服克唑替尼。对该患者进行疗效及相关不良反应的随访,克唑替尼耐药后于2018年5月18日更换为艾乐替尼治疗,随访截至2018年9月30日,无严重不良反应发生。结果患者口服克唑替尼及联合局部治疗,共维持63.4个月,最佳疗效PR。结论 ALK阳性晚期非小细胞肺癌患者,一线使用克唑替尼治疗有效率高,治疗期间病情进展后,克唑替尼联合局部治疗,再次用药后疗效依然好。

恩沙替尼治疗EML4-ALK/TP53共突变肺鳞癌1例并文献复习

肺鳞癌约占非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的30%,是第二常见的肺癌组织学类型。具有间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合突变的NSCLC仅占所有NSCLC病例的2%-5%,且几乎只存在于肺腺癌患者中。因此ALK检测在肺鳞癌患者中不常规进行,个别见于报道的ALK融合突变肺鳞癌患者的靶向治疗效果也不清楚。本例晚期肺鳞癌患者通过二代测序发现存在棘皮动物微管相关蛋白样4(echinoderm microtubule associated protein like 4,EML4)-ALK(V1)和TP53共突变,2020年12月3日开始口服恩沙替尼,疗效评价为部分缓解(partial response,PR),无进展生存期(progression-free survival,PFS)达19个月,疾病进展后改为洛拉替尼。其中一线恩沙替尼治疗创造了有文献报道以来ALK突变肺鳞癌患者靶向治疗最长的PFS。本文报道了1例接受恩沙替尼治疗的EML4-ALK和TP53共突变肺鳞癌患者,并回顾相关文献,对此类罕见患者的治疗进行了讨论。

ALK重排型肺癌的临床特征分析

目的:探讨ALK重排型肺癌的临床特征,为ALK阳性肺癌患者的个体化治疗提供依据。材料及方法:选取2016年11月至2019年3月期间我院收治的104例ALK重排阳性的肺癌患者作为阳性组,另随机选取172例ALK重排阴性的肺癌患者作为阴性组,回顾性分析ALK阳性患者的临床特征,数据采用SPSS 26.0软件进行统计分析。结果:ALK阳性组与ALK阴性组在年龄、吸烟史、病理类型、转移情况和TNM分期方面,差别具有统计学意义(P 0.05)。结论:ALK阳性的NSCLC在年轻、不吸烟、腺癌、III~IV期临床分期患者比例较高;与EGFR突变相比,具有ALK基因重排的NSCLC的患者更年轻、更易表现为腺癌、临床分期晚、易发生转移;与野生型肺癌相比,ALK阳性的NSCLC多表现为年轻、女性、不吸烟、腺癌以及III~IV期临床分期。

EML4-ALK阳性表达非小细胞肺癌患者的临床特征及治疗现状

棘皮动物微管相关类蛋白4(EML4)与间变性淋巴瘤激酶(ALK)融合基因首次被发现存在于部分非小细胞肺癌中。该融合基因是由2号染色体上2区1带和2区3带易位形成,可以诱导肿瘤生成,而ALK抑制剂能够拮抗其促肿瘤生成活性。本文旨在介绍EML4-ALK基因阳性表达肺癌患者的临床特征及该基因在肺癌诊断、治疗中的意义。