ALK-1蛋白阳性的原发性皮肤CD30^+间变性大细胞淋巴瘤1例

报告1例ALK-1蛋白阳性的原发性皮肤CD30+间变性大细胞淋巴瘤。患儿女,6岁。因左下眼睑包块5个月就诊。入院检查见左下眼睑一2.5cm×3.0cm×0.5cm红色包块,组织病理学检查示真皮内大片大细胞浸润,细胞核呈间变性;免疫组化染色示UCHL-1(+)、CD30(+)、ALK-1(+),EBER原位杂交为阴性。ALK蛋白表达模式为细胞质与细胞核。回顾相关文献,该例原发性皮肤CD30+间变性大细胞淋巴瘤检测到ALK蛋白阳性表达系国内首例报告。

人ALK-1的克隆和真核表达载体的构建

目的:克隆人ALK-1基因并构建其真核表达载体.方法:设计ALK-1特异性引物,提取人胚胎肺组织总RNA,用RT-PCR方法获取人ALK-1 cDNA.将ALK-1 cDNA克隆至pcDNA3.1/myc-His(-),双酶切鉴定并测序后,转染HEK293细胞.用Western Blot检测目的蛋白的表达.结果:成功获得人ALK-1全长cDNA,双酶切鉴定证实成功构建pcDNA3.1(-)/ALK-1.测序结果表明ALK-1全长cDNA与GeneBank中ALK-1序列完全一致.转染HEK293细胞后,可检测出Mr约为62×103的目的蛋白.结论:获得了ALK-1全长cDNA并成功构建了ALK-1真核表达载体,证实pcDNA3.1(-)/ALK-1转染HEK293细胞后可表达ALK-1蛋白,为深入研究ALK-1介导的TGFβ信号转导通路在创面愈合以及瘢痕疙瘩发生,发展中的作用奠定了基础.

人ALK-1近端启动子的生物信息学分析

目的:对人ALK-1启动子进行生物信息学分析。方法:从Genebank获取人类基因组序列和人ALK-1 mRNA序列,使用FirstEF程序分析并获得ALK-1近端启动子序列,并使用MatInspector程序对启动子序列中的转录因子结合位点进行预测。结果:使用FirstEF程序成功获得了长度为1Kb的人ALK-1近端启动子序列。MatInspector程序分析该启动子中共含有136个顺式转录调控元件,包括多种早期生长反应基因家族成员、Myc相关锌指蛋白家族成员和Ets家族成员等。值得注意的是在ALK-1启动子中含有6个KLF6结合元件,提示ALK-1参与创面愈合和组织重建过程。结论:获得了人ALK-1近端启动子的转录调控信息,推测KLF6可强烈诱导ALK-1基因表达。

遗传性出血性毛细血管扩张症一家系ALK-1基因突变检测

目的:探讨一个遗传性出血性毛细血管扩张症家系的临床特点及遗传学病因。方法:对13名家系成员进行详细的临床检查、耳鼻咽喉科专科检查及实验室检查,用聚合酶链反应(PCR)扩增13名家系成员和2名健康对照者的ALK-1基因3,4,7,8号外显子。用单链构象多态性(SSCP)进行ALK-1基因的突变分析。结果:13名家系成员中在3号外显子上PCR-SSCP呈明显异常带型者有4例,与正常对照者比较于大约700 bp处多出一条带,包括先证者及先证者的父亲、姑姑及叔辈姑姑。结论:该家系遗传性出血性毛细血管扩张症是由于ALK-1基因突变引起,突变位点位于3号外显子。

ALK-1基因无义突变Arg 479 Stop导致的遗传性出血性毛细血管扩张症

目的 对一个遗传性出血性毛细血管扩张症家系进行Endoglin基因和ALK 1基因突变检测 ,以探讨其病因。方法 用PCR法对先证者的Endoglin基因 14个外显子和ALK 1基因 10个外显子及其侧翼序列和 5′端非翻译区 (5′UTR)序列进行扩增 ,PCR产物纯化后直接测序 ,检测其基因突变。针对家系成员 3代 2 3人基因突变区域进行扩增后测序。结果 发现先证者及家系其他患者ALK 1基因第 10外显子 14 37C→T ,导致 4 79位氨基酸Arg(CGA)变为Stop(UGA) ,均为杂合突变。结论 杂合无义突变C14 37T引起的Arg 4 79Stop是导致本家系遗传性出血性毛细血管扩张症的原因。

非小细胞肺癌患者PD-1通路抑制剂客观缓解率低与EGFR突变或ALK阳性有关

1文献来源Gainor JF,Shaw AT,Sequist LV,et al.EGFRmutations and ALK rearrangements are associated withlow response rates to PD-1 pathway blockade in non-small cell lung cancer：A retrospective analysis[J].Clin Cancer Res,2016,22（18）：4585-4593.

非小细胞肺癌EML4-ALK融合基因1型的表达研究

目的:检测广西非小细胞肺癌癌组织中EML4-ALK融合基因1型的表达水平并探讨其临床意义。方法:运用两步法RT-PCR技术。检测来自于我院81例非小细胞肺癌癌组织和17例支气管扩张或肺大疱等手术切除的非癌肺组织中EML4-ALK融合基因1型的表达水平。结果:81例非小细胞肺癌癌组织和17例非癌肺组织中分别检测出26例(32.10%)和14例(82.35%)EML4基因表达阳性,全部标本中EML4-ALK融合基因1型表达阴性。结论:在广西非小细胞肺癌患者癌组织标本中未检测出EML4-ALK融合基因1型的表达,可能是EML4-ALK融合基因1型在非小细胞肺癌中的表达具有区域异质性。

肺原发性腺样囊性癌的临床病理特征及PD-1、PD-L1、EGFR、ALK基因检测的临床意义

目的探讨肺原发性腺样囊性癌(PACC)的临床病理特征及PACC中程序性死亡受体1(PD-1)及其配体1(PD-L1)、表皮生长因子受体(EGFR)、间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因表达的临床意义。方法回顾性分析36例PACC的临床病理特征,免疫组化采用EnVision法检测PD-1及PD-L1表达情况,ARMS方法检测EGFR基因突变,VENTANA ALK方法检测ALK的蛋白表达情况。结果本组36例PACC患者,男性20例,女性16例,平均发病年龄57岁。其中腺管型15例、筛状型9例,实体型12例。所有PACC患者的PD-1均呈(-),1例PD-L1呈(+)。1例EGFR基因突变(19del),靶向药物(特罗凯)治疗有效。ALK蛋白表达均为(-)。在27例手术根治标本中,晚期分期(Ⅲ-Ⅳ)、残端阳性、神经侵犯、实体/筛状型及淋巴结转移与PACC预后差有明显相关性(P<0.05)。结论 PACC是一类低度恶性肿瘤,但因发病部位与主支气管密切相关,手术困难,易出现残端阳性,导致多次复发与转移。EGFR突变率低,PD-L1蛋白阳性率也很低,但此类患者在靶向治疗和生物治疗中可能获益,因此常规肺癌基因检测和PD-L1蛋白检测临床仍需重视。

肺原发性腺样囊性癌的临床病理特征及PD-1、PD-L1、EGFR、ALK基因检测的临床意义

目的探讨肺原发性腺样囊性癌(PACC)的临床病理特征及PACC中程序性死亡受体1(PD-1)及其配体1(PD-L1)、表皮生长因子受体(EGFR)、间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因表达的临床意义。方法回顾性分析36例PACC的临床病理特征,免疫组化采用EnVision法检测PD-1及PD-L1表达情况,ARMS方法检测EGFR基因突变,VENTANAALK方法检测ALK的蛋白表达情况。结果本组36例PACC患者,男性20例,女性16例,平均发病年龄57岁。其中腺管型15例、筛状型9例、实体型12例。所有PACC患者的PD-1均呈(-),1例PD-L1呈(+)。1例EGFR基因突变(19del),靶向药物(特罗凯)治疗有效。ALK蛋白表达均为(-)。在27例手术根治标本中,晚期分期(Ⅲ-Ⅳ)、残端阳性、神经侵犯、实体/筛状型及淋巴结转移与PACC预后差有明显相关性(P<0.05)。结论PACC是一类低度恶性肿瘤,但因发病部位与主支气管密切相关,手术困难,易出现残端阳性,导致多次复发与转移。EGFR突变率低,PD-L1蛋白阳性率也很低,但此类患者在靶向治疗和生物治疗中可能获益,因此常规肺癌基因检测和PD-L1蛋白检测临床仍需重视。

直链1─烯烃熔点与其分子结构之间的定量关系生物总重量和总密度调查

本文根据分子结构的特点，用图论方法探讨了直链１─烯的熔点与其分子结构之间的关系，提出了一个具有一定结构基础的定量关系、计算结果表明，熔点计算值十分接近实验值，平均误差±０．４５％。应用本文定量关系，不仅能够预测直链１─烯烃的的熔点，而且有助于揭示物质结构性能之间的关系。

TGF-β1受体ALK1和ALK5在翼状胬肉和正常结膜组织中的差异表达

目的:研究不同种类的转化生长因子β-1(TGF-β1)激活素受体样激酶(ALK)在翼状胬肉和正常结膜组织中的表达及其意义。方法:前瞻性研究。选取2020-06/12在徐州医科大学附属医院眼科就诊的40例手术中切除的翼状胬肉标本和40例白内障手术获取的正常结膜标本纳入本次研究。使用ALK1、ALK5免疫组织化学染色观察TGF-β1受体在胬肉和正常结膜组织中的表达定位,并统计染色阳性细胞比例;使用RT-PCR检测ALK1、ALK5 mRNA在胬肉和结膜组织中的表达;并以Western Blot检测ALK1、ALK5蛋白的表达。结果:根据免疫组织化学染色结果,ALK1在翼状胬肉组中的表达水平较正常结膜组明显升高,并且在整个翼状胬肉上皮细胞中均有表达,而在正常结膜组织中仅在上皮细胞的基底层中有表达;两组上皮细胞基底层均检测到ALK5,而翼状胬肉组ALK5水平较正常结膜组下降。两组间ALK1、ALK5阳性细胞比例有显著的差异(均P<0.05)。RT-PCR结果显示,与结膜组织相比,ALK1 mRNA在翼状胬肉中的表达明显增强,ALK5的表达明显减弱,两组间有显著差异(均P<0.05),Western Blot结果显示ALK1、ALK5蛋白的表达差异与RT-PCR结果基本一致。结论:翼状胬肉和正常结膜ALK的表达谱有明显的差异。与正常结膜组织相比,翼状胬肉组织的ALK1表达增强,ALK5表达减弱,表明TGF-β信号通路处于不同的活化状态,对于进一步研究翼状胬肉的发病机制提供实验依据。

遗传性出血性毛细血管扩张症的研究进展

本文对遗传性出血性毛细血管扩张症(Hereditary hemorrhagic telangiectasia,HHT)及其研究进展进行了较全面地论述。HHT是常染色体显性遗传性血管发育异常的一种疾病。目前发现该病的致病基因有2个,一个是Endoglin(ENG)基因,该基因被定位于9q34.1。ENG基因全长约40kb,由14个外显子构成,其编码endoglin(ENG)蛋白,主要表达在内皮细胞上。由ENG基因突变所引起的HHT称为HHT1。以后研究又发现,引起HHT的另一个原因是activin receptor-like kinase1(ALK-1)基因突变所致,ALK-1基因被定位于12q11-q14。ALK-1基因全长约14kb,由10个外显子构成,其编码ALK-1蛋白,其主要表达在内皮细胞上。由ALK-1基因突变所引起的HHT称为HHT2。目前发现与HHT有关的不同的突变有129个,其中有79个与ENG基因突变有关,50个与ALK-1基因突变有关。ENG基因或ALK-1基因的突变有错义突变、无义突变、剪接点突变。目前研究认为HHT产生的分子机制是单倍不足(haploinsufficiency)或显性失活(dominantnegative)。据目前的研究资料,尚未发现突变热点。HHT1与HHT2相比,HHT1的表型更为严重。

原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤

报告1例原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤。患者男,80岁。因右小腿丘疹、结节伴瘙痒2个月就诊。体格检查发现右小腿胫前数十个孤立的丘疹、结节。皮损组织病理检查示真皮全层大细胞弥漫浸润,细胞核呈间变性;免疫组化染色示CD30(+),间变性淋巴瘤激酶(ALK-1)(-)。结合临床,诊断为原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤。

遗传性出血性毛细血管扩张症分子遗传学研究进展

遗传性出血性毛细血管扩张症(hereditary hemorrhagic telangiectasis,HHT,OMIM 187300)是常染色体显性遗传性血管发育异常的一种疾病。目前,该病的相关基因有3种,分别是ENG、ALK-1和SMAD4基因。通常由ENG突变引起HHT1型,ALK-1突变引起HHT2型,SMAD4突变引起JPHT型。对HHT进行遗传流行病学分析及其深入的分子遗传学研究有利于指导其临床诊治和预防。

Ⅱ型遗传性出血性毛细血管扩张症的发病机理研究进展

遗传性出血性毛细血管扩张征(hereditary hemorrhagictelangiectasia,HHT),又名Rendu-Osler-Weber综合征,是一种以血管发育异常为特征的常染色体显性遗传病。目前流行病学调查研究显示,该病发病率远比以前认为的要高,在法国约为1/2 351,丹麦的Funen约为1/3 500,美国佛蒙特约为1/6 500,北爱尔兰约为1/39 000。然而,国内尚未有大规模的资料统计。本病的发病与年龄相关,一般在40～45岁左右。

一个中国汉族遗传性出血性毛细血管扩张症家系致病基因的定位研究

目的 定位一个中国汉族遗传性出血性毛细血管扩张症家系的致病基因。方法 选择基因ALK - 1及endoglin作为该HHT家系致病基因的候选基因,在候选基因染色体区域进行定位。结果 连锁分析结果发现ALK - 1染色体区域微卫星遗传标记D1 2s1 5 86LODZMAX为1 .82 ,D1 2s1 6 77LODZMAX为1 .74 ,D1 2s1 6 35LODZMAX为1 .6 5 ,D1 2s36 8LODZMAX为1 .87,支持连锁。构建单体型发现家系内所有患者在ALK - 1染色体区域都连锁,无交换重组现象。而endoglin染色体区域微卫星遗传标记连锁分析结果不支持连锁。结论 这个中国汉族HHT家系的致病基因定位在ALK - 1染色体区域。

遗传性出血性毛细血管扩张症发病机制研究进展及诊治

遗传性出血性毛细血管扩张症(HHT)是一种以出血和血管畸形为特征的常染色体显性遗传病,可分为Ⅰ型和Ⅱ型HHT。目前发现endoglin和Alk-1基因突变可分别导致该病,其中endoglin突变与Ⅰ型HHT密切相关,此外还可能有“二次打击。事件参与毛细血管扩张形成过程。对HHT发病机制的研究也有助于深化血管新生的理解。近年来对该病诊断、治疗进行了新的尝试,一定程度上改变了预后。

第三型遗传性出血性毛细血管扩张症的发病机制

遗传性出血性毛细血管扩张症(HHT)是一种以血管发育异常为特征的常染色体显性遗传病,既往的研究发现endoglin、Alk-1基因突变可导致该病,分别称之为HHT-1、HHT-2。最新的研究发现 SMAD4的基因突变也可导致该病,同时也导致幼年息肉病的发生。称之为HHT-3。本文就SMAD4与 HHT的关系综述如下。

一个遗传性出血性毛细血管扩张症家系的临床和遗传学分析

目的 :对一个中国遗传性出血性毛细血管扩张症 (HereditaryHemorrhagicTelangiectasia ,HHT)家系的临床表现和遗传缺陷进行分析。方法 :对该HHT家系进行家系调查 ,并对所有成员进行临床检测。用PCR方法扩增ALK 1(Ac tivinReceptor LikeKinase 1)和Endoglin(ENG)基因的所有外显子、外显子 -内含子交界区和 5’、3’非翻译区 ,采用直接测序的方法查找基因突变。结果 :该家系的先证者有反复发作的鼻出血和皮肤粘膜的毛细血管扩张 ,并均有阳性家族史。各器官均未发现动静脉血管畸形。在家系的先证者及其他 4个成员中发现一个位于ALK 1基因第 8外显子G12 32A的错义突变 ,导致Arg 4 11Gln。结论 :HHT的临床表现多样。新错义突变G12 32A(Arg4 11Gln)可能导致HHT2的分子缺陷。该突变为国内首次报道。