allo-HSCT前后DEK-NUP214融合基因的变化及其对急性髓系白血病患者治疗和预后的临床意义

目的探讨急性髓系白血病患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)前后DEK-NUP214融合基因的变化及其对治疗和预后的临床意义。方法回顾性选取2019年2月至2022年2月海南医学院第二附属医院急性髓系白血病患者60例,DEK-NUP214均为阳性,均接受allo-HSCT治疗,分析移植前后DEK-NUP214融合基因表达、移植后微小残留病(MRD)阳性患者的治疗及预后。结果移植前DEK-NUP214阳性52例,中位表达水平为0.38%(0.03%~738.90%),3年累积复发率(CIR)为(17.42±2.12)%,移植相关死亡率(TRM)为(24.42±4.22)%,无病生存率(DFS)为(61.42±13.42)%,总生存率(OS)为(60.42±13.75)%;阴性8例,移植后未复发或死亡。移植后DEK-NUP214阳性36例,阴性24例。Kaplan-Meier显示,DEK-NUP214阳性患者具有较差的预后。移植后DEK-NUP214阳性36例,移植1个月后,表达水平降低了500(5.70~5663.00)倍,持续DEK-NUP214阳性8例,随访期间复发;移植2个月后,因严重预防移植物抗宿主病死亡4例;移植6个月后,DEK-NUP214基因阴性24例;移植3年后,DEK-NUP214阳性患者具有较高的CIR,为(27.02±4.64)%,DEK-NUP214阴性患者未复发。DEK-NUP214阳性患者的TRM为(23.75±3.47)%,高于DEK-NUP214阴性患者[(16.62±2.51)%],差异有统计学意义(P<0.05),但二者的DFS、OS比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。60例患者的白细胞数为(8.23±1.25)×10^(9)/L,血小板数为(66.25±10.42)×10^(9)/L,血红蛋白水平为(81.52±10.56)g/L,DEK-NUP214水平为(488.56±81.23)%;输注中性粒细胞(8.81±1.23)×10^(8)/kg,输注CD34+细胞(1.75±0.23)×10^(6)/kg,白细胞植活时间为(14.23±2.56)d,血小板植活时间为(16.85±2.42)d;急性移植物抗宿主病20例,慢性移植物抗宿主病4例,白血病复发8例,死亡20例,其中死于复发8例,治疗相关死亡12例。结论急性髓系白血病患者allo-HSCT前后DEK-NUP214融合基因变化明显,能够对MRD状态进行敏感有效评估。

白细胞介素-2对allo-HSCT后白血病早期复发患者治疗效果的临床研究

目的观察白细胞介素-2(IL-2)对异基因造血干细胞移植术(allo-HSCT)后白血病早期复发患者的治疗效果。方法 2010年6月～2011年6月,本科共对14例allo-HSCT后复发的患者给予IL-2治疗,观察其临床疗效及并发症。结果 13名患者随访13～24月(中位时间18月),未出现本病全面复发,无病生存率为92.85%。GVHD的表现均为Ⅰ度,发生率为35.7%。结论 IL-2是治疗allo-HSCT后早期复发的有效且重要的方法,取得了较好的疗效,且治疗后GVHD的发生率低、表现较轻。

allo-HSCT受者细胞因子基因多态性与急性移植物抗宿主病的关系

目的:探讨在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、干扰素γ(IFN-γ)等多种疾病相关细胞因子基因多态性与急性移植物抗宿主病(aGVHD)的相互关系。方法:选取2014年1月至2015年12月进行allo-HSCT的受者32例及正常人群36例作为研究对象,采用聚合酶链式反应(PCR)联合基因测序对目的基因特殊SNP位点基因分型进行检测,观察受者术后出现aGVHD的不同情况,分析细胞因子基因多态性对allo-HSCT预后的影响,探讨疾病相关细胞因子特殊SNP点突变与a GVHD发病严重程度的潜在相关性。结果:在全部allo-HSCT受者中,TNF-α-308(G/A)、IL-6-174(G/C)、IL-10-1082(A/G)、TGF-β1+915(G/C)、IFN-γ+874(T/A)等细胞因子的基因多态性分布与重度aGVHD的发生率未见有显著性的差异(P>0.05)。在TGF-β1+869SNP位点上,C/T型allo-HSCT患者中重度a GVHD发病率显著高于C/C、T/T两个基因型患者组(P<0.01)。结论:在allo-HSCT患者中TGF-β1+869(C/T)基因多态性与a GVHD发病的严重程度具有密切联系。C/T型allo-HSCT患者更容易发生重度aGVHD,是诱发严重aGVHD出现的潜在危险因素。因此,在allo-HSCT患者中针对TGF-β1+869(C/T)进行基因多态性检测,制定合理的aGVHD预防方案,可能有助于减少减轻aGVHD的发生。

儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)的诊治及预后

目的探讨儿童异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后淋巴细胞增殖性疾病(allo-HSCT post-transplantation lymphoproliferative disease,PTLD)的诊治及预后。方法收集接受alloHSCT的患儿200例,其中5例患儿发生PTLD。分析allo-HSCT后EB病毒重激活的危险因素,并结合5例患者的临床资料分析allo-HSCT后PTLD患者的治疗及预后。结果对EB病毒重激活的6种危险因素进行单因素分析发现,性别、血型与EB病毒重激活的发生无相关性(P>0.05),原发病种、HLA匹配度、干细胞来源、GAHD与EB病毒重激活的发生率相关(P<0.05)。多因素分析发现,HLA完全相符的患儿EB病毒重激活的发生率较低(P<0.05),发生GAHD的患者发生EB病毒重激活的概率明显增加(P<0.05)。5例PTLD患者的EBV-DNA载量较高,均在104以上;PTLD患者的平均发病时间为65.6 d。5例患者随访过程中,1例因多脏器功能衰竭而死亡。结论 PTLD的发生与EB病毒的重激活密切相关,可通过降低危险因素的发生率、预防阶段使用利妥昔单抗清除供者和宿主的记忆B细胞等方法,降低EB病毒的重激活,从而减少PTLD的发生。

HLA-II类抗原基因分型PCR-SSP方法在ALLo-HSCT中的应用

准确的HLA配型是异基因造血干细胞移植 (Allo -HSCT)成功的关键之一 ,经典的血清学方法用于HLA -II类抗原的配型因存在诸多不足可导致漏配或错配 ,为了克服血清学方法的种种不足 ,我们建立了HLA -II类聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR -SSP)基因配型方法 .此方法可避开血清学方法的种种干扰 ,直接从基因水平检测HLA的个体遗传学差异 .结果表明 :PCR -SSP方法具有重复性好、特异性强、灵敏度高、实验结果易于判断等特点 ,对于Allo -HSCT选择理想供者 ,减少或减轻Allo -HSCT时GVHD的发生 ,有着至关重要的意义 .可满足Allo -HSCT对HLA配型准确性高的要求 ,为在同胞兄弟姐妹间和无血缘关系供

Combined intensive preconditioning regimen allo-HSCT with imatinib for treatment of Ph chromosome positive acute lymphocyte leukemia

Objective To evaluate the outcome of combination of intensive preconditioning regimen allo - HSCT with imatinib for treatment of Ph chromosome positive acute lymphocyte leukemia ( ALL) . Methods Between 2009 and 2010,8 patients diagnosed as Ph + ALL received

TK-Ⅱ联合allo-HSCT治疗高危Ph染色体阳性白血病的疗效

目的探讨第二代酪氨酸激酶抑制剂(TK-Ⅱ)甲磺酸伊马替尼联合亲缘异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗高危Ph染色体阳性白血病的疗效。方法将符合标准的48例高危Ph染色体阳性白血病患者随机分成两组各24例。观察组给予TK-Ⅱ联合allo-HSCT治疗;对照组给予单纯allo-HSCT治疗。比较两组患者造血重建、移植物抗宿主病(GVHD)、长期存活情况。结果观察组患者急性GVHD总发生率为70.8%,显著高于对照组的41.7%(P<0.05)。观察组患者慢性GVHD中局限性发生率为16.7%,显著低于对照组的41.7%(P<0.05)。观察组患者慢性GVHD的总发生率为29.2%,显著低于对照组的58.2%(P<0.05)。观察组患者2年存活率为62.5%,显著性高于对照组的33.3%(P<0.05)。结论 TK-Ⅱ联合allo-HSCT治疗高危Ph染色体阳性白血病能够有效促进手术的成功,提高患者的存活率与生活质量,降低疾病的复发率,值得在临床上推广使用。

Allo-HSCT治疗FLT3-ITD阳性急性髓系白血病患者的临床效果研究

目的:研究异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗FLT3-ITD+急性髓系白血病(AML)患者的临床效果。方法:选取2012年1月至2018年12月在本院进行allo-HSCT治疗的FLT3-ITD+AML患者56例,对其临床资料及治疗效果等进行分析和评估。结果:所有患者均获得中性粒细胞植入,粒系造血重建中位时间为13(10-20)d,巨核系造血重建中位时间为15(9-23)d。所有患者中位随访时间为34.3(5.6-101.4)个月,至随访结束41例(73.2%)患者存活,15例(26.8%)患者死亡,3年OS率及DFS率分别为71.2%和65.6%。单因素分析显示,未发生aGVHD患者OS率为(81.2±9.4)%,显著高于发生aGVHD患者(55.4±9.1)%(χ^2=5.309,P<0.05);移植治疗前1个疗程即达到CR的患者OS率为(80.2±9.2)%,显著高于>1个疗程才达到CR的患者(45.3±8.5)%(χ^2=4.275,P<0.05)。Cox多因素生存分析显示,化疗1个疗程未达到CR及发生aGVHD为影响该类患者OS率的危险因素。结论:allo-HSCT治疗可显著改善FLT3-ITD+AML患者的预后,移植治疗后未发生aGVDH及移植前化疗1个疗程达到完全缓解(CR)患者的预后较好。

allo-HSCT受者DNA嵌合状态研究进展及法医学意义

随着医疗新技术的迅速发展,造血干细胞移植在临床上的用途越来越广泛。移植后供者源细胞几乎存在于受者所有组织,必然对个人识别和亲权鉴定产生重要影响,应引起法医工作者的重视,避免因此而产生错误的司法鉴定结论。本文就近年来allo-HSCT受者不同组织DNA嵌合状态的研究进展及其对法医物证鉴定的影响作一综述,希望能对相关研究和实践提供参考。

移植时间和检测方法与allo-HSCT受者的DNA嵌合率及法医学意义

影响allo-HSCT受者DNA嵌合率的因素有很多:如受者的疾病类型、移植前预处理方案、移植时病情的严重程度、造血干细胞来源、局部的GVHD、HLA是否相合等。本文主要讨论与法医学关系最为密切的2个影响因素,即移植后时间和检测方法的灵敏度。法医物证学工作者在检案实践中,对allo-HSCT受者进行亲权鉴定或个体识别时,需注意移植后时间和检测方法的灵敏度对嵌合率的影响。女性受者接受男性供者HSCT的情况下,受者毛囊中可以检出供者Y染色体DNA,检案实践中来源于犯罪现场的生物检材不能仅仅检测Y染色体特异遗传标记,以免导致错误判断。

去甲基化药物联合维奈克拉在急性髓系白血病造血干细胞移植中的应用进展

移植后复发是导致急性白血病异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)失败的主要原因,复发患者的挽救性治疗效果有限,预后往往很差,很少有患者能够长期存活。去甲基化药物(hypomethylating agents, HMAs)联合维奈克拉(Venetoclax, VEN)的治疗已经成为指南推荐的对于≥60岁尤其是不适合强化疗的初治急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)患者的新标准治疗方案。但关于allo-HSCT过程中HMAs+VEN的联合治疗,目前临床应用较少。本文就二者联合应用于桥接allo-HSCT、移植后复发预防及挽救治疗中的作用作一综述,以阐明其治疗AML移植患者的整体疗效,进一步指导其在allo-HSCT中的临床应用。

Allo-HSCT术后浆细胞瘤样PTLD 1例

移植后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)是异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后一种罕见且致死率高的并发症。现报道1例急性混合表型白血病的青年女性患者, 接受Allo-HSCT后并发浆细胞瘤样PTLD, 应用利妥昔单抗、硼替佐米、甲泼尼龙治疗后缓解, 截至2021年9月7日, 浆细胞瘤未复发。

异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病的现状及展望

异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是根治恶性血液病的有效手段,在全球范围内广泛应用。近20年allo-HSCT蓬勃发展,移植数量逐年增加,移植方案不断优化,移植疗效和安全性不断提高。该文介绍allo-HSCT治疗恶性血液病的现状并对未来可能的发展方向进行展望。

基于供者因素分析异基因造血干细胞移植后发生急性移植物抗宿主病的影响

目的探讨供者因素对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。方法2015年1月至2021年12月我院行异基因造血干细胞移植的患者62例为研究对象,发生aGVHD的患者为发病组,其余纳入未发病组。回顾性分析患者、异基因造血干细胞移植者临床资料,分析供者因素对aGVHD的影响,并进行统计学分析。结果共28例患者发生aGVHD,发生率为45.2%,其中Ⅰ~Ⅱ度为21例,Ⅲ~Ⅳ度为7例。发病组供者平均年龄(35.7±6.2)岁,明显高于对照组(27.1±3.8)岁(P<0.05);发病组供者、受体性别不同率、ABO血型不合率、HLA不全相合率均明显高于未发病组(P<0.05);发病组供者白蛋白浓度、CD3^(+)T细胞、CD3^(+)CD4^(+)T细胞、CD3+CD8^(+)T细胞数量与未发病组差异无统计学意义(P>0.05);Logistic回归分析显示,供者年龄、供者、受体性别不同(男供女)、ABO血型不合、HLA不全相合是allo-HSCT后aGVHD发病的独立危险因素(P<0.05);性别不同、ABO血型不合、HLA配型不全合均会使aGVHD发病提前(P<0.05)。结论供者因素对allo-HSCT后aGVHD发病具有一定影响,其中年龄、性别、血型、HLA配型需是其独立危险因素,移植前值得重视。

维奈克拉联合阿扎胞苷加供者淋巴细胞输注治疗髓系肿瘤异基因造血干细胞移植后复发的临床疗效及安全性分析

目的分析维奈克拉(VEN)联合阿扎胞苷(AZA)加供者淋巴细胞输注治疗髓系肿瘤异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后复发的临床疗效及安全性。方法回顾性分析2018年9月至2022年6月在广西医科大学第一附属医院接受allo-HSCT后复发,并接受VEN+AZA+供者淋巴细胞输注(DLI)挽救性治疗的8例急性髓系白血病(AML,5例)和骨髓增生异常综合征(MDS,3例)患者的临床资料,评价其治疗效果、并发症及生存状态。结果8例患者中男女各4例,中位年龄为31(15~64)岁。allo-HSCT后复发的中位时间为316(77~1099)d,接受VEN+AZA挽救性治疗的中位时间为10(4~25)d,中位疗程为3.5(1~6)个。5例患者接受第1次VEN+AZA+DLI治疗后达到完全缓解(CR)/血细胞计数未完全恢复的完全缓解(CRi),1例患者在第2疗程联合达雷妥尤单抗治疗后获得CR。2例患者接受首次治疗后仍为未缓解(NR)。中位随访时间为429(40~746)d。8例患者中4例存活(均为首次治疗后即获得并持续CR/CRi的患者);4例死亡,其中3例因疾病进展死亡[2例为AML,1例为治疗相关性骨髓增生异常综合征(t-MDS)],1例AML患者因肺部感染导致呼吸衰竭死亡。中位生存时间为429(40~746)d,预计2年总生存率为41.67%。结论VEN+AZA+DLI治疗allo-HSCT后复发的髓系肿瘤有效,耐受性良好。

含克拉屈滨强化预处理方案异基因造血干细胞移植治疗第一次完全缓解期急性白血病的疗效和安全性观察

目的观察含克拉屈滨强化预处理方案异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗第一次完全缓解期(CR1)急性白血病(AL)的疗效和安全性。方法回顾性分析2021年6月至2023年8月在广西壮族自治区人民医院血液内科移植中心接受含克拉屈滨强化预处理方案allo-HSCT治疗的11例CR1高危和微小残留病(MRD)阳性的低中危AL患者的临床资料,分析其一般资料、移植特征、造血重建情况以及生存情况。结果11例患者移植后均获得造血重建,中性粒细胞中位植入时间为12(11~13)d,血小板中位植入时间为13(11~14)d。粒细胞植入前发生肺部感染2例,血流感染1例,抗感染治疗后均好转。4例发生Ⅰ~Ⅱ度急性移植物抗宿主病,4例发生慢性移植物抗宿主病,均为轻中度。中位随访时间为280(87~667)d,生存10例,死亡1例,预期1年的总生存率为90.00%,无病生存率为78.80%。结论对处于CR1的高危和移植前MRD阳性的低中危AL,采用含克拉屈滨强化预处理方案能够降低复发率,改善总体生存,未增加预处理的相关毒性,具有较好的安全性。

减低剂量预处理异基因造血干细胞移植后CMV、EBV感染情况的研究现状及进展

随着移植模式不断完善,RIC (减低剂量预处理)移植模式的出现使许多不适合接受常规MAC (清髓性预处理)模式的老年患者和体弱的非老年患者,也能够进行造血干细胞移植。但是在RIC-allo-HSCT (减低剂量预处理异基因造血干细胞移植术)术后CMV、EBV感染是一个很棘手的问题。

急性淋巴细胞白血病患者异基因造血干细胞移植结果与早期细胞免疫重建的相关性

目的 探讨接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的急性淋巴细胞白血病患者(ALL)早期免疫重建情况与移植结果的相关性。方法 收集2018年12月至2022年2月本院接受allo-HSCT的99名ALL患者的完整基本信息及治疗情况,采用流式细胞技术分别检测移植前,移植后30 d、60 d、90 d CD3+T, CD3+CD4+T, CD3+CD8+T及CD3-CD16+CD56+NK细胞比例,分析早期淋巴细胞免疫重建与粒系植入,血小板植入,感染以及急慢性移植物抗宿主病的相关性。结果 99名ALL患者粒系中位植入时间11(范围,8~28)d,巨核系中位植入时间14(范围,10~120)d。血流感染(BSI)累积发生率为11.10%,移植后100 d内巨细胞病毒(CMV)累积发生率为40.40%。100 d内EBV累积发生率为7.10%。急性移植物抗宿主病(aGVHD)累积发生率22.30%。移植后1年内发生广泛慢性移植物抗宿主病(cGVHD)累积发生率16.20%。1年累积复发率13.84%。所有患者1年累积无病生存率(DFS)为80.60%,1年总生存率(OS)为90.30%。移植后30 d, CD4+/CD8+比值与aGVHD的发生正相关(OR 1.21,95CI 1.01~1.45,P<0.05)。移植前及移植后30 d,无BSI发生组CD16+CD56+NK细胞绝对计数高于BSI组,差异具有统计学意义(P<0.05)。移植后60 d和90 d, CMV感染组CD4+T细胞绝对计数均低于无CMV感染组,差异有统计学意义(P<0.05),多因素分析提示移植后60 d较高水平的CD4+T细胞是发生100 d内CMV感染的保护性因素(HR 0.91, 95CI 0.84~0.99,P<0.05)。结论 ALL患者接受allo-HSCT后早期淋巴细胞亚群重建跟aGVHD,CMV和BSI等临床事件存在一定相关性。

HLA⁃A基因三倍体家庭的分子遗传学研究———附1例报道

目的研究1名预行异基因造血干细胞移植急性髓系白血病患者及4名家庭成员HLA⁃A基因三倍体分子遗传学基础。方法运用PCR⁃NGS基因测序方法进行家庭成员HLA⁃A,⁃B,⁃C,⁃DRB1,⁃DQB1,⁃E,⁃F,⁃G位点高分辨基因分型。运用PCR⁃SBT方法复核先证者HLA⁃A位点,并进一步使用单核苷酸多态性微阵列(SNP Array)分析技术扫描染色体变异。结果先证者(二姐)携带3个HLA⁃A等位基因:A∗02∶01∶01,A∗11∶01∶01,A∗24∶02∶01。6号染色体6p22.1存在162.9 Kb片段重复:arr[hg19]6p22.1(29,803,377-29,966,301)x3。家系调查表明1条单体型携带2个HLA⁃A等位基因:A∗02∶01∶01,A∗24∶02∶01,B∗54∶01∶01,C∗01∶02∶01,DRB1∗04∶05∶01,DQB1∗04∶01∶01,E∗01∶01∶01∶03,F∗01∶01∶01,G∗01∶01∶01∶01且按照孟德尔遗传定律分离稳定遗传2代。先证者(二姐),大姐,母亲均含有该单体型。结论基因微重复导致健康先证者1条单体型携带2个HLA⁃A等位基因且稳定遗传2代。常规HLA移植配型实验室需注意此种情况并准确报告检测结果。

体外光化学疗法预防小鼠急性移植物抗宿主病作用及其机制

目的探讨体外光化学疗法(extracorporeal photopheresis,ECP)诱导的早期凋亡脾脏单个核细胞对小鼠急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)的预防效果并初步探究其作用机制。方法1)提取C57BL/6小鼠的脾脏单个核细胞,用不同浓度8-MOP(50 ng/mL,100 ng/mL,200 ng/mL,300 ng/mL,600 ng/mL)处理后2J/cm2的紫外线照射,通过Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞的早期凋亡率,确定实验最适宜的8-MOP浓度。2)取6~8周龄SPF级雌性BALB/C小鼠(H-2Kd)35只,X射线8Gy全身照射后分为5组:单纯照射组尾静脉回输生理盐水0.2 mL;同基因骨髓移植组尾静脉回输BALB/C小鼠骨髓有核细胞悬液0.2 mL(含细胞量1×10^(7));异基因骨髓移植组尾静脉回输C57BL/6小鼠骨髓有核细胞悬液0.2 mL(含细胞量1×10^(7));aGVHD组尾静脉注射C57BL/6小鼠骨髓有核细胞(含细胞量1×10^(7))和脾脏单个核细胞(含细胞量1×10^(7))混合液0.2 mL;ECP预防aGVHD组移植前48h预先尾静脉回输ECP处理过的C57BL/6小鼠脾脏单个核细胞0.2 mL(含细胞量1×10^(7)),移植当天尾静脉注射C57BL/6小鼠骨髓有核细胞(含细胞量1×10^(7))和脾脏单个核细胞(含细胞量1×10^(7))混合液0.2 mL。观察ECP对aGVHD的预防效果,应用CBA法检测各组小鼠血清IFN-γ,IL-2、TNF、IL-4和IL-6浓度;流式细胞术检测Th1类细胞的计数。结果不同浓度8-MOP(50 ng/mL,100 ng/mL,200 ng/mL,300 ng/mL,600 ng/mL)处理后小鼠脾脏单个核细胞的早期凋亡率(%):(14.18±0.865)vs(16.76±0.407)vs(18.83±0.404)vs(19.27±0.404)vs(14.5±0.529),确定8-MOP的最适宜浓度为200 ng/mL。在体内实验中,aGVHD组较同基因骨髓移植组和异基因骨髓移植组生存率下降、体重减低、临床评分增高(P<0.01,P<0.01),且移植后小鼠骨髓细胞嵌合率大于90%;ECP可以显著改善移植后小鼠存活率,降低临床评分(P<0.05),并降低血清Th1类细胞因子浓度(P<0.05)和脾脏中Th1类细胞的计数(P<0.05)。结论ECP诱导的早期凋亡脾脏单个核细胞可以通过降低小鼠体内Th1类反应来预防aGVHD的发生。