胶原蛋白海绵对拔牙创愈合过程中基因ALP表达的影响

目的探讨胶原蛋白海绵填入拔牙创后牙槽窝早期骨愈合过程中成骨相关基因ALP表达的变化。方法健康成年大鼠16只,建立大鼠拔牙模型,左侧拔牙创内填入胶原蛋白海绵为实验侧,右侧拔牙创为空白对照侧。拔牙术后1周、2周、4周、8周处死动物取材,利用实时定量PCR法检测实验侧与对照侧ALP表达变化。应用SPSS19.0软件对数据进行统计学分析。结果术后1周、2周、4周、8周,实验侧牙槽窝组织ALP基因表达相对定量均显著高于对照侧组织(P<0.05)。结论基因ALP在填入胶原蛋白海绵的拔牙创组织的表达上调。

HearNPV侵染对棉铃虫中肠碱性磷酸酶活性及表达水平的影响

【目的】通过研究棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)感染宿主昆虫后对宿主中肠碱性磷酸酶(ALP)活性与基因表达水平的影响,明确病毒在侵染宿主过程中对宿主昆虫中肠ALP的调控机理。【方法】采用不同剂量的HearNPV感染3龄棉铃虫,测定感染后不同时间昆虫中肠ALP酶活性及其编码基因表达水平,分析病毒感染试虫与未感染健康试虫的ALP活性和编码基因表达水平上的差异。【结果】HearNPV感染后,能够显著抑制ALP的活性,且抑制作用与感染病毒的剂量和感染后时间的增加呈正相关。ALP活性的下降与病毒下调其编码基因ALP的表达水平有关。【结论】HearNPV感染其宿主昆虫的过程中导致宿主ALP活性显著下降,该过程可能协助病毒粒子侵染宿主。病毒对ALP活性的抑制作用机理之一是下调了ALP编码基因的表达水平。

三江源高寒草甸土固氮基因(nifH)的多样性和系统发育研究

首次利用PCR_RFLP和测序分析对位于青藏高原腹地的青海三江源保护区高寒草甸土壤微生物固氮基因(nifH)的多样性和系统发育进行了探讨。在 2个样地中 ,共得到 14 3个阳性克隆 ,用限制性内切酶MspⅠ和RsaⅠ进行RFLP分析后得到 35个不同的RFLP谱带型 ,多样性为 2 4 . 5 % ,其中ZD样品中获得 82个阳性克隆和 2 1个不同的RFLP谱带型 ,多样性为 2 5 6 % ,而YS样品中获得 6 1个阳性克隆和 19个不同的RFLP谱带型 ,多样性为 31 1% ,2个样地中有 5个相同的RFLP谱带型。在各样地都发现一个明显的优势种群 ,ZD样地的明显优势种群占克隆数的2 9 3% ,YS的优势种群占克隆数的 32 .8%。对 2 1个克隆进行了部分序列的测定 ,序列的相似性在 71%～ 98%之间 ,在GenBank数据库中没有发现完全匹配的序列 ,因此这些序列可能代表着新的固氮生物株系。最后利用ClustalW与Mega软件和已有序列构建了系统发育树 ,结果发现 ,2 1个序列分为 4个不同的簇 ,大部分的克隆与Proteobac teria的 3个系统发育亚簇 (α、β和γ)具有较高的相似性 ,其中主要的序列都落在第一和第二簇内。YS样地中的优势种群与α_Proteobacteria中的Rhodobactersphaeroides具有较高的相似性 ,而ZD样地中的优势种群则与 β_Proteobac

绿原酸对体外培养成骨细胞活性的影响

为研究接骨草成分之一绿原酸(CGA)对成骨细胞MC3T3-E1活性的影响,采用MTT法检测11.02,22.05,44.09,88.19μmol/L CGA对成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测成骨细胞ALP活性,实时定量PCR检测成骨细胞骨相关基因的表达.结果表明:11.02～88.19μmol/L CGA对成骨细胞增殖具有明显的促进作用.培养2d,44.09μmol/L CGA能促进ALP表达上调;22.05,44.09μmol/L CGA能促进ALP、Runx2、Osterix、c-jun和c-fos基因的表达;培养6 d,44.09μmol/L CGA能促进c-fos基因的表达;在整个培养过程中,I型胶原(Col-I)基因的表达具有浓度和时间依赖性.故CGA具有一定的成骨活性,是接骨草的成骨活性成分之一.

补骨脂提取物对体外培养小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞分化的影响

目的：研究补骨脂提取物对体外培养新生小鼠颅骨MC3T3-E1细胞分化的影响。方法：以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型，将培养的MC3T3-E1小鼠成骨细胞分为4组：空白组，补骨脂提取物（含生药）0．02，0．2，2g·L^-1不同剂量组。检测细胞ALP，I型胶原蛋白的含量，采用real—time PCR测定补骨脂提取物对MC3T3一E1细胞ALP，I型胶原蛋白及骨钙素mRNA表达的影响。结果：补骨脂提取物生药剂量0．2g·L^-1，能提高MC3T3-E1细胞ALP的活性，促进I型胶原蛋白分泌。同时分别在7～14d对MC3T3-E1细胞ALP，以及在14～21d I型胶原蛋白、骨钙素mRNA表达有明显的促进作用。结论：中药补骨脂提取物能有效促进成骨细胞的分化，为研究中药补骨脂的作用机制提供参考。