重组人ALR单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用

目的 制备抗重组人肝再生增强因子 (ALR)的单克隆抗体 (McAb)。方法 以基因重组人ALR二聚体(drhALR)为抗原 ,免疫Balb c小鼠 ,制备单克隆抗体。用常规法制备抗ALR单体 (mrhALR)多抗 ,建立夹心ELISA法测定ALR ,初步确定ALR在小鼠组织的分布 ;用荧光免疫方法对胎鼠各组织进行ALR检测。结果 筛选出 3株稳定分泌抗drhALR的单抗杂交瘤细胞株 ,免疫球蛋白亚类分别为IgG1、IgG2a、IgG2b,特异性高 ,用于rhALR的免疫印迹及ELISA检测 ,可同时识别rhALR单体 (mrhALR)和二聚体 (drhALR) ;夹心ELISA法检测小鼠肝、肾、脾提取液ALR含量与鼠龄无关 ,各脏器的ALR含量不同 ,分别为肝 0 .36 μg g、肾 0 .11μg g、脾 0 .0 5 μg g ;免疫荧光检测胎鼠 ,各器官有不同程度ALR的存在 ,无器官特异性。 结论 用drhALR为抗原制备的抗rhALR单克隆抗体 ,能够用于ALR的体内外免疫学检测 。