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儿童t(8;21)/AML1-ETO阳性急性髓系白血病预后相关基因突变的研究进展
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作者 陈春荣 张晶樱 徐晓军 《中国现代医生》 2024年第22期120-124,共5页
近年来儿童急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的发病率逐渐升高,尽管在诊断和治疗方面已取得实质性的进展,但AML的治疗效果仍不及急性淋巴细胞白血病。随着分子生物学技术的不断发展,发现儿童AML不同基因突变对疾病的发生发... 近年来儿童急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的发病率逐渐升高,尽管在诊断和治疗方面已取得实质性的进展,但AML的治疗效果仍不及急性淋巴细胞白血病。随着分子生物学技术的不断发展,发现儿童AML不同基因突变对疾病的发生发展起重要作用,影响患儿预后,特别是t(8;21)/AML1-ETO阳性的AML患儿。本文旨在探讨t(8;21)/AML1-ETO阳性AML患儿相关基因突变对预后的影响,以期为临床治疗及预后预测提供依据。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 t(8 21)/aml1-eto 基因突变 预后
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地西他滨对AML1-ETO阳性急性髓系白血病细胞中PD-L2分子表达的影响
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作者 李梦月 邵杨柳 +2 位作者 李雨晴 王莉莉 高晓宁 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2023年第3期239-247,共9页
背景复发难治性AML1-ETO融合基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者预后差。程序性细胞死亡蛋白-配体2(programmed cell death-ligand 2,PD-L2)是参与白血病免疫逃逸的重要分子,研究去甲基化药物对白血病细胞中PD-L... 背景复发难治性AML1-ETO融合基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者预后差。程序性细胞死亡蛋白-配体2(programmed cell death-ligand 2,PD-L2)是参与白血病免疫逃逸的重要分子,研究去甲基化药物对白血病细胞中PD-L2分子表达的影响,对于优化用药方案具重要意义。目的分析AML1-ETO融合基因阳性的AML细胞中PD-L2分子启动子区甲基化水平及DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨(decitabine,DAC)对其表达的影响。方法以AML1-ETO融合基因阳性AML细胞系Kasumi-1以及两对AML1-ETO沉默(SKNO-1-PGK,SKNO-1-siA/E)或诱导细胞系(U937-MT,U937A/E,U937A/E+ZnSO4)为模型,采用终浓度为2.5μmol/L的DAC或0.1%二甲基亚砜(对照)处理细胞72 h,其中Kasumi-1、SKNO-1-PGK细胞系设置0.25μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L 3个浓度梯度。采用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测PD-L2 DNA启动子区特异性位点的甲基化水平;采用逆转录实时定量PCR技术检测PD-L2 mRNA表达水平。结果Kasumi-1、SKNO-1-PGK细胞系中PD-L2 DNA启动子区呈高甲基化水平,DAC处理后该区域DNA甲基化水平下降(94.3%vs 90.7%,88.6%vs 83.6%)。2.5μmol/L DAC处理后的Kasumi-1、SKNO-1-PGK、SKNO-1-siA/E、U937A/E细胞中PD-L2 mRNA的相对表达水平均显著高于对照组(P均<0.05);特别是DAC处理后,沉默AML1-ETO基因的细胞系中PDL2表达增加(SKNO-1-siA/E与SKNO-1-PGK相比上升35.80%,P=0.031),过表达AML1-ETO基因的细胞系中PD-L2表达减少(U937A/E+ZnSO4与U937A/E相比下降95.51%,P=0.036)。经DAC处理后的Kasumi-1和SKNO-1-PGK细胞系中,PD-L2 mRNA表达呈浓度依赖性递增(Kasumi-1:r2=0.87;SKNO-1-PGK:r2=0.93。P均<0.05)。结论AML1-ETO阳性AML细胞中PD-L2基因的表达受DNA甲基化调控,AML1-ETO可能参与了PD-L2基因表达的抑制。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 aml1-eto融合基因 DNA甲基化 地西他滨 程序性细胞死亡蛋白-配体2
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AML1-ETO阳性急性髓系白血病患者c-kit突变及其临床意义 被引量:5
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作者 耿素霞 杜欣 +6 位作者 翁建宇 黄欣 陆泽生 钟立业 郭荣 吴穗晶 吴萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期839-842,共4页
本研究探讨AML1-ETO融合基因阳性急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者c-kit突变的发生情况及其临床意义。采用PCR和直接测序法检测31例AML1-ETO阳性AML患者c-kit基因17外显子突变的发生情况,并分析c-kit基因突变与患者的临... 本研究探讨AML1-ETO融合基因阳性急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者c-kit突变的发生情况及其临床意义。采用PCR和直接测序法检测31例AML1-ETO阳性AML患者c-kit基因17外显子突变的发生情况,并分析c-kit基因突变与患者的临床、实验室特征以及疗效的关系。结果表明:31例患者中14例检测到c-kit突变,突变率为45.16%,突变组男性患者的比例为71.43%、初诊时白细胞计数>10×109/L患者的比例为78.57%和伴有髓外浸润患者的比例为21.43%,均明显高于无突变组(29.41%、41.18%、0%,P=0.020,0.036,0.045),两组患者的年龄和骨髓原始细胞比例无明显差异(P=0.437和0.510)。c-kit突变和无突变组化疗完全缓解(CR)率(64.29%∶80%)和复发率(58.33%∶21.43%)的差异无统计学意义(P=0.344和0.054),而死亡率(57.14%)在c-kit突变组明显高于无突变组(20%,P=0.039)。结论:AML1-ETO阳性AML患者c-kit突变常见,突变患者预后差,常规检测c-kit突变对患者的危险度分层、预后评估和选择有效治疗方案有重要意义。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 aml1-eto融合基因 c-kit突变
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定量监测AML1-ETO融合基因表达水平在急性髓系白血病治疗中的临床价值 被引量:4
4
作者 吴学琼 孟力 +3 位作者 田野 刘文励 周剑峰 李春蕊 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期218-220,共3页
目的探讨急性髓系白血病治疗过程中AML1-ETO融合基因表达水平的变化规律。方法采用基于Taq-Man探针的RQ-PCR技术,以AML1-ETO融合基因为靶分子,定量监测15例急性髓系白血病患者初诊和随访时融合基因的表达水平,分析该基因表达水平的变化... 目的探讨急性髓系白血病治疗过程中AML1-ETO融合基因表达水平的变化规律。方法采用基于Taq-Man探针的RQ-PCR技术,以AML1-ETO融合基因为靶分子,定量监测15例急性髓系白血病患者初诊和随访时融合基因的表达水平,分析该基因表达水平的变化与临床特征的相关性。结果患者初诊时,AML1-ETO融合基因的表达水平为198%~788%,该基因的表达水平与相应的骨髓幼稚细胞比例及患者年龄、性别、初诊外周血白细胞计数、血红蛋白量和血小板计数之间均无相关性(P〉0.05);长期缓解(〉1年)患者该基因表达水平降至0.001%~0.01%;复发患者该基因表达水平较缓解时升高,并提前于骨髓细胞形态学复发;AML1-ETO融合基因表达水平大于0,并不能提示临床复发。结论应用RQ-PCR技术对AML1-ETO融合基因进行定量监测,是判断和追踪该基因阳性的白血病患者疗效的良好指标,可以较好地反映患者微小残留病的动态变化。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 aml1-eto融合基因 定量PCR 微小残留病
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丙戊酸钠逆转Kasumi-1白血病细胞株AML1-ETO融合蛋白转录抑制的作用 被引量:3
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作者 赵蕾 朱翠敏 +2 位作者 张志华 田文亮 郝长来 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期363-367,共5页
本研究探讨组蛋白脱乙酰化酶抑制剂(HDAC)丙戊酸钠(VPA)逆转Kasumi-1白血病细胞株AML1-ETO融合蛋白转录抑制机制的作用。Kasumi-1细胞经不同浓度VPA处理不同时间,采用半定量RT-PCR分析AML1-ETO、AML1及cyclin D2mRNA水平的变化情况。结... 本研究探讨组蛋白脱乙酰化酶抑制剂(HDAC)丙戊酸钠(VPA)逆转Kasumi-1白血病细胞株AML1-ETO融合蛋白转录抑制机制的作用。Kasumi-1细胞经不同浓度VPA处理不同时间,采用半定量RT-PCR分析AML1-ETO、AML1及cyclin D2mRNA水平的变化情况。结果表明:不同浓度VPA处理Kasumi-1不同时间,AML1-ETOmRNA水平无明显变化;1-3mmol/LVPA处理Kasumi-1细胞3天时,与对照组比较,AML1mRNA表达水平增高,呈现剂量依赖性,差别具有统计学意义。以3mmol/L VPA处理Kasumi-1细胞,与对照组比较,3mmol/L VPA组cyclin D2mRNA表达水平降低;以不同浓度VPA处理Kasumi-1细胞3天,结果发现随着VPA药物浓度加大cyclinD2mRNA表达水平降低,呈现剂量依赖性,差别具有统计学意义。结论:VPA能通过抑制HDAC的活性,消除AML1/ETO融合蛋白的转录抑制并增加aml-1基因转录,下调aml-1靶基因cyclin D2mRNA的表达。 展开更多
关键词 组蛋白脱乙酰化酶 丙戊酸钠 Kasumi-1细胞株 aml1-eto
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AML1-ETO阳性的儿童急性髓系白血病的诊治分析 被引量:7
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作者 赖长城 李艳红 +1 位作者 梁昌达 何飞 《江西医药》 CAS 2016年第7期615-618,共4页
目的探讨AML1-ETO阳性的儿童急性髓系白血病的临床及生物学特征,比较不同剂量阿糖胞苷缓解后治疗与预后的关系。方法分析AML-ETO阳性的儿童急性髓系白血病患者的临床特征,包括细胞形态学、血象、染色体核型、治疗效果及预后。诱导缓解... 目的探讨AML1-ETO阳性的儿童急性髓系白血病的临床及生物学特征,比较不同剂量阿糖胞苷缓解后治疗与预后的关系。方法分析AML-ETO阳性的儿童急性髓系白血病患者的临床特征,包括细胞形态学、血象、染色体核型、治疗效果及预后。诱导缓解治疗采用DAE/HAE/IA方案,缓解后进行6-10个疗程的联合化疗,根据缓解后化疗所用阿糖胞苷的剂量不同分为A、B两组。结果 43例AML1-ETO阳性的儿童急性髓系白血病初治患儿中,男24例,女19例,中位年龄9(2-15)岁;1疗程完全缓解率77.1%,2疗程完全缓解率94.3%。A,B两组间无事故生存期比较无统计学意义。结论儿童AML-ETO急性髓系白血病中,男性居多,年长儿多发。有无附加染色体对预后无明显影响,应用中大剂量阿糖胞苷联合化疗远期疗效好。 展开更多
关键词 白血病 髓系 儿童 aml1-eto
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AML1-ETO融合基因在儿童急性髓系白血病中的预后评估价值 被引量:2
7
作者 吴薇 李艳 韩瑞玲 《现代检验医学杂志》 CAS 2014年第3期9-11,15,共4页
目的 评估AML1 ETO融合基因对儿童急性髓系白血病的预后作用.方法 对AML1 ETO阳性或阴性的103例急性粒细胞白血病(AML)患儿的临床资料进行回顾性分析,采用Kaplan-Meier曲线评估患儿无病生存(DFS)率和总生存(OS)率,COX回归模型评... 目的 评估AML1 ETO融合基因对儿童急性髓系白血病的预后作用.方法 对AML1 ETO阳性或阴性的103例急性粒细胞白血病(AML)患儿的临床资料进行回顾性分析,采用Kaplan-Meier曲线评估患儿无病生存(DFS)率和总生存(OS)率,COX回归模型评估儿童急性髓系白血病中的预后因素.结果 ①103例AML患儿均进行了双诱导方案化疗.53例AML1 ETO阳性患儿第1疗程和第2疗程的完全缓解率分别为70%和92%,远期复发9例(17%),53例患儿的5年DFS率和OS率分别为(63.6±7.3)%和(74.5±8.9)%.50例AML1 ETO阴性患儿第1疗程和第2疗程的完全缓解率分别为72%和94%,远期复发17例(34%),患儿的5年DFS率和OS率分别为(52.2±6.1)%和(60.7±7.3)%.AML1 ETO阳性患儿远期复发率显著低于AML1 ETO阴性患儿(P<0.05),5年DFS率和OS率均显著高于AML1ETO阴性患儿(P<0.05);②单因素分析显示AML1 ETO阳性患儿中,年龄是影响预后的独立危险因素,年龄越大出现事故或死亡的风险性越大(P<0.05).结论 相比较于AML1 ETO阴性的AML患儿,AML1 ETO阳性的AML患儿经治疗后,其疾病的远期复发率低,长期疗效好,并且年龄是影响其远期治疗效果的重要因素. 展开更多
关键词 aml1-eto 急性髓系白血病 预后
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AML1-ETO融合蛋白对BCL-2基因表达的影响 被引量:1
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作者 庄文越 李正祎 +3 位作者 赵昀 岑建农 庄文卓 陈子兴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1394-1398,共5页
本研究旨在观察AML1-ETO在白血病细胞中对于抗凋亡基因BCL-2表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937-WT、U937-Mock和经AML1-ETO基因转染的U937-A/E1-4的细胞凋亡率;使用免疫印迹法检... 本研究旨在观察AML1-ETO在白血病细胞中对于抗凋亡基因BCL-2表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937-WT、U937-Mock和经AML1-ETO基因转染的U937-A/E1-4的细胞凋亡率;使用免疫印迹法检测cleaved caspase-3蛋白的表达;荧光实时定量PCR检测转染细胞和对照组细胞以及AML-M2患者白血病细胞BCL-2 mRNA的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与BCL-2基因启动子之间直接的相互作用情况。结果表明:AML1-ETO转染细胞的凋亡率明显增加,且检测到cleaved caspase-3蛋白的表达;转染了AML1-ETO的U937细胞系和具有AML1-ETO融合基因的AML-M2患者中,BCL-2的mRNA表达水平显著下调;转染细胞沉淀富集的AML1-ETO直接结合的DNA中含有BCL-2基因的启动子序列。结论:BCL-2是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下调BCL-2的表达。 展开更多
关键词 aml1-eto融合蛋白 BCL-2 基因表达
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丙戊酸钠逆转AML1-ETO融合蛋白转录抑制作用的研究 被引量:2
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作者 张志华 赵蕾 +3 位作者 邢恩鸿 朱翠敏 田文亮 郝长来 《临床血液学杂志》 CAS 2008年第4期373-376,378,共5页
目的:探讨组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂丙戊酸钠(valproic acid,VPA)逆转AML1-ETO融合蛋白转录抑制作用。方法:VPA处理t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-l细胞后,应用流式细胞术检测髓系分化抗原CD11b表达水平的变化,DNA凝胶电泳检测细... 目的:探讨组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂丙戊酸钠(valproic acid,VPA)逆转AML1-ETO融合蛋白转录抑制作用。方法:VPA处理t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-l细胞后,应用流式细胞术检测髓系分化抗原CD11b表达水平的变化,DNA凝胶电泳检测细胞的凋亡变化,分子生物学半定量RT-PCR的方法检测粒-单核细胞刺激因子(GM-CSF)和半胱氨酸天冬氨酸酶7(Caspase7)mRNA表达水平的变化。结果:VPA诱导Kasumi-1细胞的髓系分化抗原CD11b表达的阳性率增加,并呈现时间及剂量依赖性;②VPA诱导Kasumi-1细胞凋亡,出现的典型梯形DNA条带;③VPA诱导AML1靶基因GM-CSF和凋亡相关因子Caspase7的mRNA表达水平的增加,呈时间和剂量依赖性。结论:丙戊酸钠可以通过抑制脱乙酰化酶的活性,消除AML1-ETO融合蛋白转录抑制,诱导细胞分化和凋亡。 展开更多
关键词 细胞分化 脱乙酰化酶 丙戊酸钠 aml1-eto融合蛋白 Kasumi-1细胞株 凋亡
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AML1-ETO阳性急性髓系白血病患者合并c-kit突变预后相关性总结 被引量:2
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作者 张艳芳 冯雅青 +2 位作者 吴继颖 赵芳 马建华 《山西医药杂志》 CAS 2014年第24期2908-2910,共3页
急性髓系白血病(AML)是一组在临床及细胞遗传学上均具有高度异质性的综合征,是在多种致病因素作用下的造血干祖细胞遗传学变异累积的结果,细胞和分子遗传学异常是其致病基础。1973年Ro w ley等[1]首次提出t (8;21)(q22;q22... 急性髓系白血病(AML)是一组在临床及细胞遗传学上均具有高度异质性的综合征,是在多种致病因素作用下的造血干祖细胞遗传学变异累积的结果,细胞和分子遗传学异常是其致病基础。1973年Ro w ley等[1]首次提出t (8;21)(q22;q22)染色体易位,该易位可产生特异性的AML1‐ETO融合基因,在AML的危险度分层中,AML1‐ETO基因阳性是预后较好的一种遗传学异常,通过化疗可取得良好疗效,尤其是采用含有大剂量阿糖胞苷的治疗方案,但很多研究表明并不是所有患者都能取得良好效果,c‐kit基因突变与该类患者预后不良密切相关。我科2011年1月至2014年6月对41例AML1‐ETO阳性的患者进行c‐kit基因突变检测,并分析其与患者预后的关系,现总结如下。 展开更多
关键词 aml1-eto 急性髓系白血病 白血病患者 预后相关性 C-KIT 基因突变 阳性 细胞遗传学
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应用实时定量PCR检测儿童急性髓系白血病AML1-ETO融合基因 被引量:1
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作者 金眉 李志刚 +6 位作者 吴敏媛 朱平 张永红 石惠文 谢静 赵玮 高超 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2006年第4期193-197,共5页
目的应用实时定量聚合酶链式反应方法,分析儿童急性髓系白血病中AML1ETO融合基因的表达水平,探讨AML1ETO表达水平的变化规律。方法采用实时定量PCR方法,以AML1ETO融合基因为靶分子,定量检测了28例急性髓系白血病患儿初诊时融合基因的表... 目的应用实时定量聚合酶链式反应方法,分析儿童急性髓系白血病中AML1ETO融合基因的表达水平,探讨AML1ETO表达水平的变化规律。方法采用实时定量PCR方法,以AML1ETO融合基因为靶分子,定量检测了28例急性髓系白血病患儿初诊时融合基因的表达量,分析了表达量与初诊临床特征的相关性,并对17例患者进行微小残留病定量分析。结果患者AML1ETO融合基因的表达范围在未治疗前达到17094~187800拷贝/106GAPDH拷贝;长期缓解的患者表达量降到0~46拷贝/106GAPDH拷贝;复发患者融合基因表达范围为62633.8~246000拷贝/106GAPDH拷贝。初诊时患者AML1ETO融合基因的表达量与临床特征无相关性(P均>0.05)。结论应用实时定量PCR技术对AML1ETO的定量检测是判断和追踪该类白血病疗效的有力指标,可以较好地反映患者的微小残留病的动态变化。 展开更多
关键词 实时定量PCR aml1-eto 急性髓系白血病 儿童 微小残留病
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影响AML1-ETO阳性急性髓系白血病患者预后的相关因素分析 被引量:3
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作者 闫丽娜 刘宝芹 +1 位作者 刘丽俊 张荣娟 《中华保健医学杂志》 2019年第2期110-114,共5页
目的探讨影响急性髓系白血病1-ETO融合基因(AML1-ETO)阳性AML患者预后的相关因素。方法回顾性分析承德医学院附属医院2012年1月~2017年12月收治的92例初治AML1-ETO阳性AML患者(观察组)临床资料,另选择同期50例AML1-ETO阴性AML患者的资... 目的探讨影响急性髓系白血病1-ETO融合基因(AML1-ETO)阳性AML患者预后的相关因素。方法回顾性分析承德医学院附属医院2012年1月~2017年12月收治的92例初治AML1-ETO阳性AML患者(观察组)临床资料,另选择同期50例AML1-ETO阴性AML患者的资料作为对照组,比较两组基因临床资料,以Kaplan-Meier法筛选出对AML1-ETO阳性AML患者总生存时间(OS)、无复发生存时间(RFS)有影响的因素,并采用Cox回归模型分析影响预后的相关因素。结果观察组初治时红细胞(RBC)、血小板(PLT)、CD19阳性率、微小残留病(MRD)下降对数级值低于对照组,CD34阳性率、CD56阳性率、骨髓原粒细胞百分比(NC)、C-KIT突变率高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。两组患者诱导化疗后疗效及生存率比较差异无统计学意义(P> 0.05),诱导治疗后达完全缓解者的AML1-ETO融合基因定量下降值对数级值高于诱导治疗未达CR者,差异有统计学意义(P <0.05)。Cox回归分析结果显示,男性、年龄> 45岁、CD56阳性率、C-KIT突变为OS的独立预后不良因素,CD19阳性率、诱导治疗后AML1-ETO融合基因定量下降≥2对数级、采用IA诱导方案为OS独立预后良好因素(P <0.05);而男性、年龄> 45岁、C-KIT为RFS独立预后不良因素,诱导治疗后AML1-ETO融合基因定量下降≥2对数级为RFS的独立预后良好因素(P <0.05)。结论 AML1-ETO阳性AML患者的预后受性别、年龄、AML1-ETO融合基因定量下降值、C-KIT突变、CD56及CD19阳性率、诱导方案等因素影响,应加以监测。 展开更多
关键词 aml1-eto 急性髓系白血病 预后 相关因素 分析
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AML1-ETO融合蛋白致急性髓系白血病机制及靶向治疗 被引量:1
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作者 陈占国 李艳 《微循环学杂志》 2014年第3期80-83,共4页
AML1-ETO 基因是急性髓系白血病(Acute Myeloid Leukemia,AML)中最常见的融合基因之一,由 t (8;21)(q22;q22)染色体易位导致位于21q22上的 AML1基因(又名RUNX1基因)与8q22上的ETO基因(又称为RUNX1T1或 MTG8基因)融合而成[1]... AML1-ETO 基因是急性髓系白血病(Acute Myeloid Leukemia,AML)中最常见的融合基因之一,由 t (8;21)(q22;q22)染色体易位导致位于21q22上的 AML1基因(又名RUNX1基因)与8q22上的ETO基因(又称为RUNX1T1或 MTG8基因)融合而成[1],其表达产物为 AML1-ETO 融合蛋白。大约12%-15%的 AML 患者有 t(8;21),90%的M2b 亚型存在 AML1-ETO 融合基因,其阳性可作为 M2b的诊断依据。AML1-ETO融合基因阳性的 AML 患者对化疗较为敏感,部分患者可获治愈,且预后良好。近年来, AML1-ETO融合蛋白与 AML造血干细胞或祖细胞基因突变引起 AML的机制及其潜在靶向治疗研究已成为热点,本文就此进展作一综述。 展开更多
关键词 aml1-eto融合基因 急性髓系白血病 融合蛋白 靶向治疗 病机制 aml1基因 染色体易位 ETO基因
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AML1-ETO融合蛋白对p14^(ARF)基因转录调控的影响
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作者 庄文越 李正祎 +2 位作者 陈奕桦 刘燕 陈子兴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期970-974,共5页
目的:探讨异常转录因子AML1-ETO融合蛋白对p14^(ARF)的转录调控机制。方法:应用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测转染细胞和对照组细胞以及AML-M2患者白血病细胞p14^(ARF)mRNA的表达;用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)对其p14^(ARF)启动子... 目的:探讨异常转录因子AML1-ETO融合蛋白对p14^(ARF)的转录调控机制。方法:应用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测转染细胞和对照组细胞以及AML-M2患者白血病细胞p14^(ARF)mRNA的表达;用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)对其p14^(ARF)启动子的甲基化状态进行分析;染色质免疫沉淀技术(Ch IP)研究转染细胞中AML1-ETO与p14^(ARF)启动子之间直接的相互作用情况;应用qRT-PCR检测5-氮杂胞苷(5-Aza)处理后细胞内p14^(ARF) mRNA表达水平。结果:转染了AML1-ETO的U937细胞系和具有AML1-ETO融合基因的AM L-M2患者中,p14^(ARF)的mRNA表达水平下调;p14^(ARF)启动子在对照组细胞株和无AML1-ETO融合基因的AML-M2患者中处于非甲基化状态,在转染细胞株和具有AML1-ETO融合基因的AML-M2患者中处于高甲基化状态;转染细胞沉淀富集的DNA中含有p14^(ARF)的启动子序列;5-Aza能上调p14^(ARF)mRNA的表达。结论:p14^(ARF)是AML1-ETO融合蛋白可能的靶基因,p14^(ARF)启动子高甲基化所致的基因沉默可能是M2b型白血病发生发展的一个重要因素。 展开更多
关键词 aml1-eto P14ARF DNA甲基化
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融合蛋白AML1-ETO对C/EBPα基因表达的影响
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作者 庄文越 陈子兴 +4 位作者 赵昀 岑建农 沈宏杰 祁小飞 李炳宗 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第32期6041-6044,共4页
背景:已有研究显示AML1-ETO可以通过包括抑制C/EBPα的功能在内的机制引起分化的阻滞。目的:观察AML1-ETO对髓系分化相关基因C/EBPα表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。方法:应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937、U93... 背景:已有研究显示AML1-ETO可以通过包括抑制C/EBPα的功能在内的机制引起分化的阻滞。目的:观察AML1-ETO对髓系分化相关基因C/EBPα表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。方法:应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937、U937-MOCK和U937-A/E1细胞表面抗原CD11b、CD14的表达;荧光实时定量PCR检测C/EBPαmRNA的表达;免疫印迹法检测C/EBPα蛋白的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与C/EBPα基因启动子之间直接的相互作用情况。结果与结论:AML1-ETO转染细胞的细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达明显下降,且转染了AML1-ETO的U937细胞系中,C/EBPα的mRNA与蛋白水平均下调,转染细胞沉淀富集的DNA中含有C/EBPα基因的启动子序列。结果提示C/EBPα是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下调C/EBPα的表达。 展开更多
关键词 融合蛋白 aml1-eto C/EBPΑ 基因表达 CD11B CD14
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丙戊酸钠对AML1-ETO转染细胞中CEBPA基因表达及表观遗传修饰的影响
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作者 庄文越 李正祎 +2 位作者 刘燕 夏薇 陈子兴 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1598-1602,共5页
目的:探讨丙戊酸钠(VPA)对AML1-ETO转染细胞中CCAAT/增强子结合蛋白α(CEBPA)基因表达的影响及诱导沉默基因重新表达的机制。方法:不同浓度VPA处理AML1-ETO转染的急性髓系白血病细胞U937后,CCK-8法和台盼蓝染色活细胞计数检测细胞增殖能... 目的:探讨丙戊酸钠(VPA)对AML1-ETO转染细胞中CCAAT/增强子结合蛋白α(CEBPA)基因表达的影响及诱导沉默基因重新表达的机制。方法:不同浓度VPA处理AML1-ETO转染的急性髓系白血病细胞U937后,CCK-8法和台盼蓝染色活细胞计数检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞表面抗原,RT-qPCR检测CEBPA mRNA的表达,ChIP-qPCR检测组蛋白H3和H4的乙酰化状态。结果:VPA对U937及AML1-ETO转染细胞有明显的生长抑制作用,呈现浓度依赖性和时间依赖性,VPA诱导U937及AML1-ETO转染细胞CD11b和CD14表达升高,VPA明显上调CEBPA mRNA的表达水平,VPA处理组CEBPA基因启动子区核染色质的组蛋白H3和H4乙酰化水平升高(P<0.05)。结论:VPA对U937及其AML1-ETO转染细胞均有生长抑制和促分化的作用。VPA可能通过特异性调节CEBPA基因组蛋白乙酰化水平,改变其表观遗传修饰特征,从而诱导CEBPA基因重新表达。 展开更多
关键词 丙戊酸钠 aml1-eto融合蛋白 CEBPA基因 表观遗传修饰
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AML1-ETO转基因小鼠的建立及初步表型分析
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作者 柳子星 马志敏 +6 位作者 顾鸣敏 孔辉 王龙 匡颖 徐国江 费俭 王铸钢 《诊断学理论与实践》 2005年第2期133-136,共4页
目的:建立AM L1-ETO融合基因转基因小鼠,在整体动物水平研究AM L1-ETO融合蛋白在白血病发病中所起的作用。方法:构建hCG/AM L1-ETO转基因质粒,通过显微注射将该质粒转入小鼠受精卵中,植入假孕母鼠输卵管,获得G0代转基因小鼠;用聚合酶链... 目的:建立AM L1-ETO融合基因转基因小鼠,在整体动物水平研究AM L1-ETO融合蛋白在白血病发病中所起的作用。方法:构建hCG/AM L1-ETO转基因质粒,通过显微注射将该质粒转入小鼠受精卵中,植入假孕母鼠输卵管,获得G0代转基因小鼠;用聚合酶链反应(PCR)方法检测融合基因的整合情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测融合基因的表达情况和组织表达谱。结果:PCR法共检出10只G0代转基因阳性小鼠,其中8个系均产下F1代小鼠,由此建立了8个AM L1-ETO转基因小鼠系。RT-PCR法证实AM L1-ETO融合基因在22系中稳定表达,但血常规、肝脏、脾脏等组织未见异常变化;对该系小鼠的组织表达谱检测表明,融合基因在肝脏、脾脏、心脏和肌肉组织存在不同程度的表达,但在脑组织中不表达。结论:AM L1-ETO融合基因能在转基因小鼠的骨髓等组织中表达,但尚不足以引发白血病,推测其他致病基因在小鼠白血病的发生中也起一定作用。 展开更多
关键词 转基因小鼠 aml1-eto融合基因 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 表型分析 聚合酶链反应(PCR) RT-PCR法 组织表达谱 初步 小鼠白血病 融合蛋白 基因质粒 显微注射 表达情况 稳定表达 异常变化 不同程度 肌肉组织 致病基因 受精卵
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急性髓细胞白血病M2型AML1-ETO融合转录本的检测
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作者 雷平冲 杨爱德 刘慧娟 《河南职工医学院学报》 1999年第3期1-3,共3页
目的:探讨检测AML1-ETO融合转录本在t(8;21)急性髓细胞白血病M2型M2/t(8;21)的临床诊断和预后判断中的意义。方法:用G显带技术对初治M2患者作染色体核型分析,用半筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT/PCR)技术检测AML1-ETO融合... 目的:探讨检测AML1-ETO融合转录本在t(8;21)急性髓细胞白血病M2型M2/t(8;21)的临床诊断和预后判断中的意义。方法:用G显带技术对初治M2患者作染色体核型分析,用半筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT/PCR)技术检测AML1-ETO融合基因转录本。结果:14例初治M2中共检出9例存在AMLI-ETO融合基因转录本,阳性率为64.3%。细胞遗传学技术证实9例均有t(8;21)易位;5例为阴性,均无t(8;21)易位;4例伴t(8;21)易位患者在处于完全缓解后5~72月,RT/PCR结果仍持续阳性。结论:应用筑巢式RT/PCR技术近似半定量检测AMLI-ETO融合转录本,对M2/t(8;21)的诊断和预后判断具有重要临床价值。 展开更多
关键词 白血病 髓细胞 急性 融合转录本 aml1-eto 聚合酶链反应
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AML1-ETO阳性急性髓系白血病CD19的表达及其预后的意义 被引量:4
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作者 边程 何平 +5 位作者 王畅 刘晓亮 刘杉珊 林海 谭业辉 高素君 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1809-1814,共6页
目的:探讨CD19在AML1-ETO阳性急性髓系白血病(Acute myelogenous leukemia with AML1-ETO positive,AML with AML1-ETO positive)患者中的表达及对预后的影响。方法:收集我中心2010年1月至2015年12月共66例初治AML1-ETO阳性AML患者资料... 目的:探讨CD19在AML1-ETO阳性急性髓系白血病(Acute myelogenous leukemia with AML1-ETO positive,AML with AML1-ETO positive)患者中的表达及对预后的影响。方法:收集我中心2010年1月至2015年12月共66例初治AML1-ETO阳性AML患者资料,回顾性分析CD19表达与一般临床特征的关系及对生存期的影响。结果:AML1-ETO阳性AML患者初诊时CD19的表达率为50.0%。CD19阳性与阴性患者在年龄、性别、初诊时血红蛋白、血小板、骨髓原始细胞比例、染色体核型、基因突变无统计学差异(P>0.05)。CD19阳性患者初诊时白细胞计数低于阴性患者,有统计学差异(P=0.027)。CD19阳性患者总体生存率明显优于CD19阴性患者(P=0.030),CD19阳性患者无复发生存率较阴性患者高,但差异无统计学意义(P=0.105)。多因素分析结果提示CD19阳性是AML1-ETO阳性AML患者OS的独立预后良好因素。结论:CD19阳性可能是AML1-ETO阳性AML患者预后良好的标志。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 aml1-eto阳性 CD19 预后
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SIRT1启动子表达调控载体的构建和活性分析及AML1-ETO对其转录活性的影响 被引量:2
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作者 王茜 窦立萍 +5 位作者 李永辉 王莉莉 周蕾 李丹丹 王利军 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期12-18,共7页
目的:本研究旨在分析AML1-ETO阳性白血病中SIRT1基因的表达及调控机理,寻找SIRT1核心启动子区域。方法:利用实时定量PCR方法在AML1-ETO阳性白血病细胞株和白血病临床样本中研究SIRT1基因的表达情况;构建SIRT1基因启动子-荧光素酶报告载... 目的:本研究旨在分析AML1-ETO阳性白血病中SIRT1基因的表达及调控机理,寻找SIRT1核心启动子区域。方法:利用实时定量PCR方法在AML1-ETO阳性白血病细胞株和白血病临床样本中研究SIRT1基因的表达情况;构建SIRT1基因启动子-荧光素酶报告载体,分析其在293T细胞中的活性。采用PCR方法从含有SIRT1基因转录起始位点5'区的基因片段中扩增SIRT1基因核心启动子序列,插入经XhoⅠ和HindⅢ双酶切的荧光素酶报告载体p GL3-Basic,采用阳离子脂质体Super Fect包裹荧光素酶报告重组子转染293T细胞,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。采用双荧光素酶报告基因检测方法,研究AML1-ETO对SIRT1启动子转录活性的调节作用。结果:AML1-ETO的表达与SIRT1的表达呈正相关;成功构建了6种SIRT1基因序列的荧光素酶报告重组子,并通过了酶切以及基因测序方法的鉴定;荧光素酶报告重组子在293T细胞中的荧光素酶活性明显高于阴性对照,明确了SIRT1基因核心启动子位置;研究结果证明融合蛋白AML1-ETO可以正向调控SIRT1启动子活性,SIRT1对AML1-ETO阳性白血病发生发展的影响。研究表明:SIRT1可能是AML1-ETO的靶基因之一。结论:成功构建了SIRT1基因启动子-荧光素酶报告载体,找到了SIRT1基因核心启动子区,且核心启动子在293T细胞中有较高的活性。AML1-ETO通过促进SIRT1启动子的活性对其进行转录调控。 展开更多
关键词 SIRT1基因 荧光素酶报告基因 基因表达调控 基因转染 转录调控 aml1-eto阳性白血病
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